Способ диагностики аутоаллергических заболеваний

(5)4 0 1 Ч 33/53 ии институтберйихин,тют Косогорова Л,САу тои ммунв клинике а- нжаев: Здор ю ОАЛЛЕР ГИок, кле ится к клини частности к ронических вос Изобретение отн ой иммунологии, в ам диагностики хр сится к клиничес астности к спосонических воспаливнутренних оргательных заболевани нов с аутоиммунным механизмом патог ыше ни е точние спосо-,особ осуществляют ющим обои веньд/мп ) феричпробиле от370 С т забор99 в соотлазму осто шени т плотнос- . ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ(57) Изобретение относческой иммунологии, вспособам диагностики х н.ез а. Цель изобретения ности диагностики и упр ба, я исследования берут еской крови из локте рку с гепарином (20. стаивания в течение из пробирки производи разводят средой и 1. 2, Р аз веденную наслаивают на гради палительных заболевании внутреннихорганов с аутоиммунным механизмом патогенеза. Целью изобретения является повышение точности диагностики и упрощение способа, У больных беру кровь, выделяют лимфоциты, отмывав среде центрифугированием, ресус дируюти доводят концентрацию кле до 1 10 /мл, инкубируют с эритроц ми барана в присутствии тканевого тигена в количестве О мл, содер щем 1,57 белка, при температуре 4 в течение 1 ч, После чего определ количество розеткообразующих клет При увеличении розеткообразующих ток по сравнению с контролем (бе антигена) диагностируют аутоаллер ,ческое заболевание,ти 1,078 г/смэ фиколл-верографина и центрифугируют 30 мин при 1500 об/мин. После центрифугирования пастеровской пипеткой отбирают лимфоцитарное кольцо на границе разделениЯ фаз фиколл- верографин, Полученные клетки трижды отмывают средой 199 при 1000 об/жн в,течение 10 мин, В камере Горяевапроизводят подсчет клеток для определения концентрации взвеси с последующим доведением ее до10 вмп6 В первую пробирку вводят 0,25 мл клеточной взвеси указанной концентрации, 0,25 мп 0,57-ного раствора эритроцитов барана и 0,1 мл водно-соле-, вой вытяжки из тканевых антигенов, содержащей 1,57 белка (опыт), Центрифугируют при комнатной температуре 5 мин при 1000 об/мин с последующейФормула изобретения Способ диагностики .аутоаллергических заболеваний, включающий заборкрови у больных, выделение лимфоцитов, инкубацию их с антигеном и эритроцитами барана, определение роэеткообразующих клеток и при уменьшенииколичества розеткообразующих клетокпо отношению к контролю диагностируют аутоаплергическзе заболевания,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения точности и упрощения .способа, инкубацию лимфоцитов, антигена и эритроцитов барана осуществляют одновременно, при этом антигениспользуют в объеме 0,1 мп и концентрации белка 1,5 Х,вченко 40 Корректор Л, Пилипенко Заказ 1192/43 Тираж 788 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 з14675 инкубацией в холодильнике при 4 С в течение 1 ч. После инкубации осадок ресуспендируют и в камере .Горяева определяют процент клеток образовав 15 ших розетки с тремя и более эритроцитаья барана, По разнице Т-РОК в контроле и опыте судят о сенсибилизации Т-лимфоцитов к вводимому антигену.П р и м е р, Больной К:, 36 лет, поступил в клинику с диагнозом хронический обструктивный бронхит в фазе обострения, При проведении предла 1 г гаемого способа с введением в реакцию роэеткообразования 0,1 мп водно-соле вой вытяжки из неизмененной ткани легкого, содержащей 1,57 белка, были получены следующие результаты: контроль Т-РОК 607, .опыт Т-РОК 3 Д, Та" ким образом, 237 Т-лимфоцитов сенси билиэированы к нормальной легочной ткани, При введении в реакцию розеткообраэования 0,1 мл водно"солевой вытяжки иэ неизменной ткани печени, содержащей 1,57 белка, были получены 25 следующие результаты; контроль Т-РОК 607.опыт Т-РОК 453, т. е. выявлена сенсибилизация 153 Т-лимфоцитов к неизменной ткани печени, При целенапра" вленном клиническом обследовании у больного К, был выявлен хронический персистирующий гепатит, При проведении предлагаемого способа с лимфоци-. таж больного К, и водно-солевыми вы" тяжками из других органов и тканей сенсибилизации Т-лимфоцитов не выявлено. Т-лимфоциты здоровых людей не снижали роэеткообраэующих свойств при проведении предлагаемого способа,Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой степенью достоверности определять степень аутосенсибилизации Т-лимфоцитов и при использовании набора стандартных анти-, генов диагностировать патологический процесс на ранних стадиях, а такжепри латентном течении.Из сравнения известного способа (7 РОК (больные).15,8+3,2 и Ж РОК (здоровые) 5,2+2,5, соответсвенноСоставитель В.Лито Редактор Н.Тупица Техред И.Верес 144р(0,05), и предлагаемого способа(здоровые) 2,0+0,45, соответственнор(0,001) видно, что предлагаеиай способ более достоверен, так как показатель достоверности различий междуданными практически здоровых и больных людей максимален - р(0,001; вто время как при известном способеон составляет лишь р(0,05, что обеспечивает большую точность диагностикиКроме того при параллельном сравнении из ве стно го и предлагаемо го спо"собов выявлено преимущество последнего в скорости исполнения.исследований, Время исследования при известномспособе 132,8+0,6 мин, при предлагаемом способе 113,30,5 мин (р(0,001),Следовательно, на проведение исследования по предлагаемому способу требуется в 1,2 раза меньше времени, .чемпри исследовании по известному способу,Так как известный способ не удалось воспроизвести в 6 случаях из25 (247), а предлагаемый способ воспроизводится во всех 1007 случаев,можно сделать вывод, что предлагаемый способ более точен по сравнениюс известным,