Способ определения числа в-лимфоцитов в биологических средах иммунологическим методом
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1437737
Авторы: Данис, Казанавичюс, Кандрор, Купренис, Урбонавичюс
Текст
ОЮЗ СОВЕТСКИХОЦИАЛИСТИЧЕСКИХСПУБЛИК 4 С 01 М 1/2 ЫЙ М И ОМИТЕТ ОТКР 11 ТИ ОСУДАРСТВЕНО изОБретенри гкнт ссср БРЕТЕН ПИСАНИ ТЕЛЬСТВУ ТОР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧИСЛА В-ЛИМФОЦИТОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ ИММУНОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОМ,8014377 точности результатов и упрощение подсчета числа В-лимфоцитов. Выделяютлимфоцитарную массу. Меченную флюоресцеинизотиоционатом поливалентнуюкроличью антисыворотку к иммуноглобулинам человека разводят средой 199,обрабатывают печеночным порошком ицентрифугируют, Надосадочную жидкостьсмешивают с взвесью лимфоцитов и оставляют на холоду. Затем восстанавливают первоначальное разведение лимфоцитарной массы, делают мазок, высушивают и фиксируют. На мазок наносятраствор меченного родамином бычьегосывороточного альбумина. Мазок высу"шивают и отмывают, В ультрафиолетовомсвете подсчитывают число В-лимфоцитовс антителами к иммуноглобулинам.1437737 лимфоцитарной массы (2 10 ) клеток/мл. Делают мазок, высушивают его в термостате (37 С) и фиксируют 96 -ным эталоном в течение 5 мин, Затем на мазок наносят раствор меченного рода- мином бычьего сывороточного альбумина в разведении средой 199, мазоковысушивают в термостате (37 С, 30 мин) и отмывают средой 199.При подсчете в ультрафиолетовом свете лимфоциты приобретают краснороэовый цвет, В-лимфоциты с антителами к иммуноглобулинам имеют ярко- зеленое свечение. Изобретение относится к медицине и может быть использовано в иммунологии.Цель изобретения - повышение точ" ности результатов, а также упрщение подсчета числа В-лимфоцитов.Способ осуществляют следующим образом.П р и м е р. Лимфоцитарную массу 10 выделяют в градиенте фикол-пак (81077). Полученную массу разводят до концентрации 2 10 клеток/мл. Моноци- .йтарная Фракция определяется в процес-. се работы, прилипая к несиликониэированному лабораторному стеклу, Меченную Флюоресцеиниэотиоционатом поливалентную кроличью антисыворотку к иммуноглобулинам человека разводят средой 199, после чего обрабатывают пе ченочным порошком и центрифугируют при 6000 об/мин 30 мин. 0,5 мл надосадочной жидкостью смешивают с0,5 мл взвеси лимфоцитов, приготовленной в среде 199, встряхивают и 25 оставляют на холоде (4 С) в течение 30 мин с периодическим (через 10 мин) встряхиванием.Рабочую смесь доводят до 8 мл теплой (37 С) средой 199 и вновь помеощают в холодильник (4 С) на 30 мин После температурной ретракции восстанавливают первоначальное разведение формула изобретения Способ определения числа Влимфоцитов в биологических средах иммунологическим методом, включающий выделение лимфоцитарной массы, обработку ее Флюоресцеинизотиоционатом поливалентной кроличьей антисывороткой к иммуноглобулином человека с последующим приготовлением мазков и подсчетом В-лимфоцитов, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности результатов, а также упрощения подсчета числа В-лимфоцитов,мазок дополнительно окрашивают, родамином и исследование проводят в ультрафиолетовом свете. Составитель А.ЧирковРедактор А.Огар ТехредМ.Ходанич Корректор С.Черни Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 Заказ 6993 Тираж 847 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5
СмотретьЗаявка
4007155, 06.01.1986
ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЭНДОКРИНОЛОГИИ И ХИМИИ ГОРМОНОВ АМН СССР
КАЗАНАВИЧЮС ГИНТАУТАС ВИНЦОВИЧ, ДАНИС ЮРГИС КАЗИЕВИЧ, КАНДРОР ВИЛЛЕН ИОСИФОВИЧ, КУПРЕНИС ГИНТАРАС БРОНЕВИЧ, УРБОНАВИЧЮС ВАЙДОТАС ИОЗОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 1/28
Метки: биологических, в-лимфоцитов, иммунологическим, методом, средах, числа
Опубликовано: 15.11.1988
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1437737-sposob-opredeleniya-chisla-v-limfocitov-v-biologicheskikh-sredakh-immunologicheskim-metodom.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения числа в-лимфоцитов в биологических средах иммунологическим методом</a>
Питательная среда для культивирования клеток человека и животных
Номер патента: 1520095
Опубликовано: 07.11.1989
Авторы: Витолс, Дулманис, Стенгревицс
Метки: животных, клеток, культивирования, питательная, среда, человека
...атракта меньше 1 Е не даклеток.Питательна57. эмбрионал я среда с добавлениемьной сыворотки тоже пр1520095 водит к увеличению роста клеток (до1057.), но тогда значительно увеличивается расход дорогой эмбриональнойсыворо.ки. Влияние содержания эмбриональноисыворотки и экстракта цветочнои пыльцы в питательной среде на рост клеток приведено в таблице.5 Приростклеток по Экстрактцветочнойпыльцы,мас.Е Плотность клеток по Плотность Эмбриональная сывоклеток прикультивировании с известномуспособу;тыс.кл/мл ротка, мас.7 отношению к контролю, Е экстракта, тыс.кл/мл 310 300 280 260 325 ракт цветочной пыльцы 10; основная среда КРМ 1-1640 89, культивируют клетки человеческой лимфобластомы. линии Ка 1 в течение 4 мес. В этих условиях достигается...
Способ получения 2, 6-дихлор-4-нитроанилина
Номер патента: 1033494
Опубликовано: 07.08.1983
Авторы: Карпова, Петров, Салов, Соколова
МПК: C07C 87/60
Метки: 6-дихлор-4-нитроанилина
...баней. Температуру поддерживают . на уровне45 С. Массу перемешивают при этойтемпературе в течение 5 ч. По окончании выдержки массу охлаждают льдом дотемпературы 5 С. Выпавший осадок2,6"дихлор-нитроанилина отфильтро"вывают, промывают 10- 15 мл ледянойуксусной кислоты,-затем 200 мл воды,сушат, Получают 15,35 г продукта ст,пл, 191-191,3 С. Выход 92,5 Ж ГЖХанализ показал отсутствие 4-нитроанилина и содержание 2-хлор-нитроанилина - 0,5 Ф,П р и м е р 2. Опыт проводят аналогично приведенному в примере 1.В качестве растворителя используют хлористый метилен.Загружают 3,8 г (0,1 моль) п-нитроанилина, 2,86 мп (0,05 моль) уксусной кислоты (0,5 моль на 1 мольи-нитроанилина) и 120 мл хлористогометилена. При нагревании массы доо40 0 прибавляют...
Способ получения электроизоляционной целлюлозы
Номер патента: 1320307
Опубликовано: 30.06.1987
Авторы: Горячий, Григорьев, Дюкарев, Мороз, Рохлов, Селюжицкий, Яковенко
МПК: D21C 3/02
Метки: целлюлозы, электроизоляционной
...снижается с 0,7 до 0,537 Целлюлозу при концентрации 5,0% обрабатывают водным раствором сернистого ангидрида с расходом БО , равным 0,5% к а.с. целлюлозе в течение 30 мин.Последующую промывку откислованнойцеллюлозы от продуктов реакции проводят до рН массы 6,5 с использованиемсвежей воды. П р и м е р 2. В отличие от примера 1 целлюлозу, полученную лолисульфидным способом варки и подвергнутую предварительной нейтрализации кислой оборотной водой до рН 6,4, обрабатывают при концентрации массы 5,0%-нымводным раствором сернистого ангидрида с расходом ЯО , равным 1,07 к а,с, целлюлозе в течение 30 мин, Данные по зольности целлюлозы в конце процесса кисловки представлены в таблице. Промывку откислованной целлюлозы ведут до тех же...
Способ определения дефекта антигеннезависимой дифференцировки в-лимфоцитов
Номер патента: 1497574
Опубликовано: 30.07.1989
МПК: G01N 33/53
Метки: антигеннезависимой, в-лимфоцитов, дефекта, дифференцировки
...с эритроцитами,нагруженными антииммуноглобулинами,от времени инкубации представлена втабл.1. Контроль - это лимфоциты, инкубированные в среде 199 в течение 60 мин, такое время необходимо для того, чтобы адсорбированные цитофильные иммуноглобулины покинули лимфоциты и остались только истинные мембранные иммуноглобулины, которые синтезированы данной клеткой. При дальнейшей инкубацни (более 60 мин) число лимфоцитов не возрастает.Данные табл,1 показывают, что наиболее выраженный и достоверный эф497574 10 15 20 25 2. 30 35 40 45 50 5 1 Фект увеличения лимфоцитов с иммуыоглобулиновыми рецепторами наблюдают, если суспензию лимфоцитов инкубируют с пептидами из сумки Фабрициуса в течение 60-480 мин (1-8 ч). Если инкубация продолжается менее 1...
Штамм в-лимфоцитов человека, используемый для получения гибридных культивируемых клеток человека
Номер патента: 1437392
Опубликовано: 15.11.1988
Авторы: Катковская, Мекшенков, Серегина
МПК: C12N 5/00
Метки: в-лимфоцитов, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, человека, штамм
...50 мкг/мллипополисахарида из Е.со 1 и Роедееа Мгояеп (РММ) в разведении 1:100и инкубируют 48 ч при 37 С, в атмосфере 57 СО. Обработку РйМ и липополисахаридом проводят для активацииЛПК и увеличения частоты слияния,2 10 клеток НСИ.ТК .6410 с, находящихся в середине логаримической фазыроста смешивают с 2 10 .ЛПК. Смесь7клеток трижды отмывают от РСБ, центрифугируя их при 160 ц. После центрифугирования супернатант удаляютполностью и к осадку добавляют 1 мл457-ного (ПЧ) ПЭГ (м.м. = 4000).ПЭГ добавляют постепенно, осторожновзвешивая в нем клеточный осадок.Процедура добавления ПЭГ занимает1 мин, Еще 1 мин клетки инкубируют сПЭГ при комнатной температуреЗатемк инкубационной смеси медленно постенке центрифужной пробирки добавляют 1 мл КРМ...
Предыдущий патент: Способ определения клеток костного мозга
Следующий патент: Способ лабораторной диагностики гемоспермии
Случайный патент: Пьезокерамический регулятор уровня электрического напряжения