Способ определения концентрации гемоглобина в крови

амен е изданного СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 8690 19) 51)5 С 01 И 33 4 ИЦСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ 06/28-1(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ(57) Изобретение относится к областибиохимии и медицины и мажет быть использовано для определения концентрации гемоглобина в крови, Цель изобретения - снижение токсичности. Кпробе крови добавляют додецилсульфатнатрия или соль жирной кислоты (С-С ,), феррицианид калия, ЭДТА, трисНС 1, затем смесь инкубируют десятьминут и измеряют оптическую плотностьпри 540 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см и рассчитывают концентрацию гемоглобина с учетом коэффициентов малярной экстинкции и разведения крови. кой хим тв енньп ия вр реюк,В.Г лицка лб,ким лабо ия, Под а, 1975,рериновой,седьмую бр осится к области ни биохимии рахидон ределению кон Цель изобрсичности, Поставленн ируют 10 пектрофот В спект снижение токени рах ппика540 н стигается зазируемой прооявлени ения пр счет добав бе феррици кислоты (С фата натри нтенсивность кооли жирноидодецилсульида кали то ого не зав ит от повьш 1 ени жирной кислоты 2, Оп ие ентрации со Приме коэфределен комплек Установление жирзующих комплекс с фициен мо глоб х кислот, абра экстин гло бином. восемь проб,2 мл 5 10е ок, соде рж раствора м их оглоби алиево бин в трис твор При р кариливают рной кислоты, т раство ауриново й, в чет соли жи яютегоициамМ ва этом в первую пр ринов ой, во втор вермирисмитино в третьютую - пал пятую - стеа ГОСУД АРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ. И ОТНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ 1) 4021802/28-14, 402182) 10.02.86(71) Институт биоорганичеАН БССР и Белорусский госинститут усовершенствован(56) Справочник поратарным методам ид, Е.А, Каст, Мс. 11-14,дицины, а именно к о центрации гемоглобин шестую - арахиновои, в олеиновой и в восьмую ой кислоты, Пробы инкумин и регистрируют на ометре Спекорд.роб 3-8 наблюдаетсяс максиМумом поглоина с миристатом,евять пробирок помещают поастворов, содержащих гемоглоразных концентрациях, по 10 мМНС 1, 1 мМ ЭДТА, рН 7,4, Добавкаждую 1 мл раствора, содержамМ миристат калия, 6 мМ ферид калия, 1 О мМ трис - НС 1,ДТА, рН 7,4, Пробы инкубируют1386901 Формула изобретения Составитель Л.Сабурова Техред Л,Олийнык Корректор Л, Патаи Редактор О, Филитова Заказ 152 Тираж 513 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 5-10 мин и измеряют оптическую плот 1 ность при 540 нм в кювете с толщиной с оя 1 см против холостой пробы, не содержащей гемоглобина, По данным5 оптической плотности и известных концентраций гемоглобина строят калибрбвочньщ график, из которого определяют коэффициент экстинкции комплексе гемоглобина с жирной кислотой, Коэффициент равен 35920 М "см- или8980 М см- в расчете на 1 гем.П р и м е р 3. Определение концентрации гемоглобина в крови.К 20 мкл крови приливают 5 мл 15 р створа, содержащего 1 мМ миристат калия, 0,6 мМ феррицианид калия, 1 мМ ДТА, 10 мМ трис-НС 1, рН 7,4. С есь инкубируют 10 мин и измеряют о тическую плотность при 540 нм в к вете с толщиной слоя 1 см против хс 1 лостой пробы, не содержащей крови. Кс 1 нцентрацию гемоглобина в крови определяют по формуле НЬ(М)=251 илиЕ 25НЬ, (г/л)=1,9 Е 251, ге Е - оптическая плотность пробы при 540 нм, При Е=0,27 НЬ=1,9 0,27 251=129 г/л,30 Цифра 4 обозначает количество субъединиц в молекуле гемоглобина, 251 - коэффициент разведения крови,680008980" 4ния концентрации в г/л,П р.и м е р 4. Определение концентрации гемоглобина в крови.В девять пробирок, содержащих 5 мл 0,067.-ного раствора додецилсульфата натрия, добавляют по 20 мкл крови донора, энергично встряхивают, инкубируют 1 О мин при комнатной температуре и измеряют поглощение при 540 нм на спектрофотометре Спекорд в кювете с длиной оптического пути 1 см. Рассчитывают концентрацию гемоглобина в крови по формуле, приводимой вьае, учитывая что коэффициент молярной экстинкции гемоглобина с додецилсульфатом натрия равен 9860. Способ определения концентрации гемоглобина в крови путем обработки пробы крови комплексообразователем с последующим измерением оптической плотности при 540 нм и расчетом, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью снижения токсичности, в качестве комплексообразователя используют додецилсульфат натрия, или феррицианид калия и соли жирных кислот (С - С).