Способ определения гидропероксидов липидов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
(19) О 51)4 001 БЭ ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ сясеврр,ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ А ВТОРСКОМУ СВИ 3892842/28-14 30.04.85 07.07.87. Бюл Всесоюзный ка ый центр У 25диологически В,З.Ланкин, А сис и А.И,Вих 616.07(088,8) Апа 1. ВюсЬеш 4" 191.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГИДРОПЕРОКСИДОВ ЛИПИДОВ(57) Изобретение относится к биохимии, Цель изобретения - ускорениеспособа. Анализируемый образец вносят в инкубационную смесь и регистрруют скорость падения оптическойплотности, Добавляют глутатионтрансферазу, отмечают оптическуюплотность, регистрируют скорость ееуменьшения и рассчитывают количествгидропероксидов в пробе.1322153 Составитель И.ЕмельяненкоТехред А.Кравчук Корректор ИМуска Редактор С.Патрушева Заказ 2856/39 Тираж 776 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,Изобретение относится к экспериментальной биохимии, конкретно к меторам анализа биологически активныхвеществ, и может быть использованов клинической биохимии и медицине 5при диагностике ряда заболеваний,Целью изобретения является ускорение способа за счет использования вкачестве фермента - восстановителяглутатион-Я-трансферазы.Способ осуществляется следующимобразом.Анализируемый образец в количестве не более половины конечного объема испытуемой жидкости вносят в инкубационную смесь, содержащую (конечные концентрации) 5 ммоль ЭДТА,ммоль восстановленного глутатиона,0,2 ммоль восстановленной формы нико"тинамидадениндинуклеотидфосфата(НАДФ-Н) и 1 ед/мл глутатион-редуктазы,В течение 5 мин регистрируют скорость падения оптической плотностипри 340 нм (Ч,). Затем добавляют5 ед, глутатион-Б-трансферазы, отмечают оптическую плотность при 340 нм(А,) и, регистрируя скорость ее уменьшения, отмечают время (Т), необходимое для достижения скорости Ч - величину оптической плотности при350 нм (А ) в момент времени Т.Количество гидропероксидов (М )в пробе (моль) рассчитывают по формуле 35 Ат Аа-Чо Тгп 340 500где Е 340 - коэффициент молярной.экстинкциипри 340 нм (339 нм), равный 6,3"Э - -1х 10 М смП р и м е р 1, Определение содержания гидропероксидов линолевой кислоты. К 16,9 нмоль гидропероксидалинолевой кислоты добавляют 10 мкмольЗДТА, 2 мкмоль восстановленного глутатиона, 0,4 мкмоль НАДФ-Н, 2 ед.глутатионредуктазы. Объем доводятбуфером (50 ммоль К, Иа-фосфатный,рН 7,4 и 50 ммоль СаС 1 ) до 2,0 мли проводят определение. Результаты рассчитывают по указанной формуле А =0; А =0,054; Ч= =0,0002; Т=5 мин; М, =16,8 10 моль.Коэффициент корреляции 957. Процент ошибки 0,57.,Таким образом, способ обладает большей точностью и чувствительностью, чем известный ферментативный способ с использованием глутатионпероксидазы и в то же время является более специфичным, что существенно расширяет область его применения. В инкубационной смеси не требуется присутствия фермента каталаэы, а количество основного (восстанавливающего гидроперекиси) фермента требуется в 50 раз меньше для проведения анализа готового образца за меньшее время. Кроме того, не требуется гидролиз этерифицированных гидропероксидов жирных кислот до свободных жирных кислот, что значительно уСкоряет проводимый анализ. Формула изобретения Способ определения гидропероксидов липидов путем их ферментативного восстановления с последующей спектрофотометрией пробы, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, в качестве фермента-восстановителя используют глутатион-Б- трансферазу,
СмотретьЗаявка
3892842, 30.04.1985
ВСЕСОЮЗНЫЙ КАРДИОЛОГИЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР
ЛАНКИН ВАДИМ ЗИНОВЬЕВИЧ, ТИХАЗЕ АЛЛА КАРЛОВНА, ОСИС ЮРИЙ ГУНАРОВИЧ, ВИХЕРТ АНАТОЛИЙ МИХАЙЛОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/92
Метки: гидропероксидов, липидов
Опубликовано: 07.07.1987
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1322153-sposob-opredeleniya-gidroperoksidov-lipidov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения гидропероксидов липидов</a>
Способ определения стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности
Номер патента: 1639652
Опубликовано: 07.04.1991
Авторы: Ананян, Милютина, Орлов, Порошенко, Радул, Шерстнев
МПК: A61H 39/00
Метки: беременности, воздействия, невынашивания, рефлексотерапии, стороны
...осадок мембран эритроцитовсуспендируют в 2 мл 0,01 М трис-НС 1буфера,Из плазмы и суспензии мембран эритроцитов экстрагируют липиды по методу Е,В 1 цЬ, У,1.Вуек (1959). К 0,5 млплазмы или суспензии мембран эритроцитов приливают 2,7 мл дистиллированнои воды, 8 мл метанола и 4 мл хлороформа при постоянном перемешивании. 15Затем смесь экстрагируют 3 мин и приливают 4 мл хлороформа, 4 мл дистиллированной воды, помещают в холодильник и через 40 мин отбирают нижнююФазу, представляющую собой липидный 20экстракт плазмы или мембран эритроцитов.В липидном экстракте определяютсодержание продуктов ПОЛ,Для определения содержания диеновых конъюгатов (Владимиров, Арчаков,1972) 2 мл липидного экстракта плазмыили мембран эритроцитов упаривают...
Способ определения активности ферментов, синтезирующих или разлагающих аденозинтрифосфат
Номер патента: 1070166
Опубликовано: 30.01.1984
Авторы: Кулене, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене
МПК: C12Q 1/00
Метки: аденозинтрифосфат, активности, разлагающих, синтезирующих, ферментов
...ан нА/мин ) и ответа АТФ -чувствительного электрода на стандартную концентрацию АТФ (0,1 мМ)вычисляется скорость ферментативнойреакции (скорость образования АТФ 40 мкмоль/мин 1 и удельная активностьпируваткинаэы в ячейке. Из построен-.ного калибровочного графика (концентрация фермента - скорость ферментативной реакции можно высчитать оп"ределяемую активность ферментногопрепарата (Е/мг белка 1 .Ацетаткиназная реакция аналогичнапируваткинаэной, только в качестведонора фосфатной группы выступает 50 ацетатфосфат. Определение ферментатив.ной активности аналогично.Для определения ферментативнойактивности,гексокиназы используетсязначение ответа д 1(нА) глюкозного 55 электрода на 0,1 мМ глюкозы.При определении активности в реакционную смесь...
Способ получения гидропероксидов полиненасыщенных жирных кислот
Номер патента: 1631086
Опубликовано: 28.02.1991
Авторы: Бридня, Бутович, Кухарь, Цысь
МПК: C12N 11/14, C12P 7/64
Метки: гидропероксидов, жирных, кислот, полиненасыщенных
...арахидоновой кислоты (рН 9) с концентрацией 0,01 ммоль/л. Скорость пропускания40 раствора арахидоновой кислоты поддерживают постоянной и равной 15 мл/мин на 1 г оксида.Затем полученный раствор прокачивают. через колонку, заполненную гидрофобизированным силикагелем С 18 и подсоединенную к выходу колонки с иммобилизованной липоксигеназой. После прокачивания через колонки необходимого объема раствора колонку с 50 гидрофобизированным силикагелем отсоединяют и промывают 5 мл этанола. Вы-, ход гидропероксида арахидоновой кисло, тд составляет 987 а степень чистоты 967 55П р и м е р 3. В колонку объемом 0,3 смз помещают 100 мг гранул "силохрома-С 80" с размером О, 125-0, 16 мм,на которых иммобилизована липоксигеназа в количестве 0,01 мг....
Устройство для предотвращения потери генератором синхронной скорости во время коротких замыканий
Номер патента: 94497
Опубликовано: 01.01.1952
Автор: Линниченко
Метки: время, генератором, замыканий, коротких, потери, предотвращения, синхронной, скорости
...принципиальные схемы различных исполнений описываемого устройства.В исполнении устройства, изображенном на фиг. 1, последовательно с нагрузкой Й включена сосредоточенная емкость С, параллельно которой включена цепь, состоящая из активного сопротивления г и последовательно включенного разрядника 1. Кроме того, в главной цепи имеется выключатель 2,В исполнении устройства, изображенном на фиг. 2, вместо емкости применена сосредоточенная индуктивность 1На фиг. 3 изображена схема нредлагаемого устройства, в котором цепь 3, шунтирующая активное сопротивление, составлена из сочетания сосредоточенных емкостей и индуктивностей. В качестве активных ветвей здесь применены два сопротивления г, и г (возможно также применение и оольшего числа...
Автоматический клиноременный вариатор скорости1изобретение относится к области машиностроения и может быть использовано в приводах машин, где требуется постоянство угловой скорости ведомого вала при уменьшении
Номер патента: 362959
Опубликовано: 01.01.1973
Авторы: Дополнительным, При
МПК: F16H 9/16
Метки: автоматический, быть, вала, вариатор, ведомого, где, использовано, клиноременный, машин, машиностроения, может, области, относится, постоянство, приводах, скорости, скорости1изобретение, требуется, угловой, уменьшении
...подвижные подпружиненные 4 конусные диски, устройство с центробежными грузами 5, снабженными зубчатыми шестернями б, которые установлены на осях 7, расположенных в ступице одного неподвижного конусного диска 3.5 Ступица подвижного диска 4 снабжена зубчатыми рейками 8, взаимодействующими с шестернями б, а внутри этой ступицы расположен гидроцилиндр с поршнем 9, снабженным отверстиями и жестко установленным на валу 1 О 2.Описываемый вариатор скорости работаетследующим образом. При номинальной угловои скорости ведущего вала 1 грузы 5 находятся в горизонтальном положении, при этом 15 обхватываемый диаметр ремня 10 ведомоговала 2 минимальный, С увеличением угловой скорости ведущего вала увеличивается скорость ведомого вала. Грузы 5 под...
Предыдущий патент: Способ диагностики вирусной инфекции у новорожденных с родовой черепно-мозговой травмой
Следующий патент: Измерительный механизм электромеханического прибора
Случайный патент: Измерительная головка