Способ определения засухоустойчивости пшеницы

(504 А 01 С 7 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ТЕЛЬСТ А ВТОРСКОМ Н.А.тойчиетричесо крахиология51. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Институт физиологии ирастений АН МССР(56) Генкель П.А., ШаламоваДиагностика жаро- и эасухоувости растений методом фотокого определения статолитномала, Сельскохозяйственная1980, том ХЧ, Р 3, с. 448(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАСУХОУСТОЙЧИВОСТИ ПШЕНИЦЫ(57) Изобретение относится к физиологии растений и может быть использовано в селекции озимой и яровойпшеницы. Цель изобретения - повыше ние объективности оценки и уменьшение трудоемкости способа. Семена проращивают в течение 84-132 ч. Затемсемена на водяной бане подвергаютвоздействию температуры 84-87 С втечение 15-20 мин, Измеряют активность изоферментов о-амилаэы методом вертикального электрофореза вполиакрипамидном геле и сравниваютс контролем-сортом классификатором.Чем меньше снижена активность изоферментов, тем больше засухоустойчивость,1292680 10 40 45 50 55 Тираж 630 Подписноег. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к Физиологии растений и может быть использовано в селекции озимой и яровой пшеницы,Цель изобретения - повьппение объективности оценки и уменьшение трудоемкости способа.П р и м е р, 1. Семена опытныхобразцов пшеницы, взятые с растений,выращенных рядом (парным методом) ссортами-классификаторами, проращивают в чашках Петри по 30 семян вкаждой по схеме: 48 ч при 20 С втемноте, затем еще 48 ч при последовательном двухкратном чередованиивоздействия света (белого от люмицесцентных ламп для яровой и пропущенного через красный светофильтрдля озимых) 15 ч и темноты 9 ч. Повторность опыта 4-кратная. Для анализа берут 20 проростков из каждойчашки и переносят в стеклянные пробирки емкостью 25 мл, в которые наливают по 10 мл воды, помещают наводяную баню при температуре воды80,85 и 90 С на 10,15 и 20 мин. После этого пробирки с проростками .одновременно вынимают и быстро выливают из них горячую воду и тут же опускают их в воду комнатной температуры. Далее проростки тщательно растирают в ступках с толченым стеклом и экстрагируют Фермент водой из расчета 0,5 мл на одно проросшее семя. Растертую массу переносят в пробирки той же емкости, взбалтывают на качалке в течение 1 ч, центрифугируют 20 мин при 6 тыс. об/мин. Активность изофермента д "амилазы определяют методом вертикального электроФореза в полиакриламидном геле (И.В.Лукашевич. К методике определения изоферментов амилазы в полиакриламидном геле с йод-крахмальной пробы. - Изв. АН Кирг.ССР, 1974, У 1, с. 42-45).На 1 мл насадочной жидкости добавляют 60 мг, акриламида, 0,4 мл этой смеси наносят на трубку с полимеризованным 7,57.-ным полиакриламидным гелем и проводят электрофореэ в трио-глициновом буфере рН 8,3. Белковые зоны, обладающие Ы -амилазной активностью, обнаруживают в гелях путем инкубации фермента при 40 С в течение часа в ЗХ-ном раствореВНИИПИ Заказ 300/1Произв.-полигр. пр-тие,крахмала, приготовленном на ацетатном буфере рН 5,6. Далее промываютводой и выдерживают 5 мин в растворейода для выявления реакции ферментана крахмал. Окрашенные гелипромывают водой и фиксируют 27,-ным раствором трихлоруксусной кислоты. Проявленные полосы на гелях (электрофореграммы) отражают степень активности изоферментов д -амилазы и регистрируют в виде записи (денситограмм) на микрофотометре МФ, Для выявления степени разрушения изоферментов вследствие воздействия высокой температуры измеряют высоту (мм) у максимально проявленного изофермента на денситограмме в опытном образце и выражают ее в процентах к высоте проявления того же фермента на денситограмме сорта-классификатора.Сортом-классификатором берут для озимых Одесскую, для яровых - Эритроспермум 841, оба районированные, засухоустойчивые.Полученные экспериментальные данные позволяют утверждать, что оценка степени разрушения изоферментов с -амилазы и снижение их активности в проросших семенах высокой темпеоратурой позволяет достоверно дифференцировать сорта мягких озимых и яровых пшениц по их засухоустойчивости и может быть принята в качестве способа определения этого свойства при ведении селекции в этом ,направлении,Формула изобретения Способ определения засухоустойчивости пшеницы, включающий проращивание семян, воздействие температуры, измерение биохимического показателя и сравнение с контролем, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повьппения объективности оценки и уменьшения трудоемкости, семена проращивают в течение 84-132 ч, затем подвергают воздействию температуры 84-87 ОС в течение 15-20 мин, а в качестве биохимического показателя используют активность изоферментов ос - амилазы, при этом засухоустойчивость тем больше, чем меньше снижена активность изоферментов.