Способ определения цитотоксичности пыли

Номер патента: 1263713

Авторы: Косарев, Лотков, Шпигель

ZIP архив

Текст

/66 С 01 Б 21 76 КОМИТЕТ СССР ТЕНИЙ ИОТКРЫТИЙГОСУДАРСТВЕНН ПО ДЕЛАМ ИЗОБ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН(21) 37 (гг) г (46) 15 (71) Ку тут им инский инсти м нова(72) В.В и В.С. Л (53) 63 (56) еГиг ные забо с. 31 -34Автор В 760959 Шпигел профессиональ1983, У 5,во ССС ское св кл. А ельс В 10(54) НОСТ (57) меди СПОСОБ ОПЫЛИИэобреины, а ПЕНИЯ ТОК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ 0414/2804.8410.86. БюбьппевскиД,И. УльКосареотков.633(088иена трудлевания. тение относится к области именно к методам исследо вания патогенного действия промышленных пылей, Цель изобретения - упрощение способа и повышение чувствительности выявления мембранно-повреждающего действия пыли на клетки.Эритроциты человека параллельно инкубируют с образцами различных пылейодной и той же концентрации, Пыльцентрифугируют. Затем в надосадкеопределяют аденозинтрифосфатнуюкислоты (АТф), вышедшую из поврежденных эритроцитов. Определение АТФ осуществляют биолюминесцентным методомпутем введения в реакционную средувысокоочищенного люцеферин-люцеферазного комплекса. Цитотоксическийэффект определяют минимальной пороговой концентрацией. 1 табл,Кварц Доломит 19,3 (+) 16,0 (+) 13,2 (+) 5,0 (-) 10,0 (+) 5,0 (-) 4,9 4,9 0,2 0,02 0,002 0 контроль ЮП р и м е ч а н и е. (+) - эффектповреждающегодействия,Составитель Л, ПокрышкинаРедактор И, Петрова Техред,А.Кравчук Корректор В, Бутяга Заказ 5497/26 Тираж 490 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная,Изобретение относится к медицине,а именно к методам исследования патогенного действия промышленных пылей,Цель изобретения - упрощение способа и повышение чувствительностивыявления непосредственно мембранного-повреждающего действия пыли наклетки.Укаэанная цель достигается тем,что эритроциты человека параллельно 10инкубируют с образцами различныхпылей одной и той же концентрации,затем центрифугируют и в надосадкеопределяют АТФ, вышедшую из поврежденных эритроцитов, биолюминесцентным 15методом путем введения в реакционнуюсреду высокоочищенного люцеферинлюцеферазного комплекса,П р и м е рПриготавливают взвеси кварцевой и доломитовой пыли в 2 Оследующих концентрациях, мг/мл: 2;0,2; 0,02. Затем в ряд пробирок,содержащих 0,1 мл эритроцитарноймассы и 0,8 мл Физиологического раствора прибавляют 0,1 мл взвеси пылив указанных концентрациях (конечныеконцентрации становятся на порядокменьше). Контролем служат пробиркис чистым Физиологическим раствором(без пыли). Содержимое всех дроби- З 0рок инкубируют 45 мин при 37 С, затемвцентрифугируют (3000 об/мин, 15 минпри 4 С). Отбирают 0,2 мл надосадочной жидкости, которую вносят в реакционную среду, содержащую 06 млтрис-ЭДТА буфера (О,1 М, рН 7,75)и 0,2 мл АТФ шопх 1 огпд-гещеп 1 фирмы ЛКБ-ВАЛЛАК. Затем определяют уровень биолюминесценции.В таблице приведены значения уровней биолюминесценции в надосадочнойжидкости после инкубации эритроцитовчеловека. с взвесью кварцевой и доломитовой пылей,Как видно из таблицы, кварцевая 45 пыль вызывает повреждение эритроцитов на субгемолитическом уровне уже в концентрации 0,002 мг/мл - уровеньФотоэмиссии превышает контрольныйболее, чем в 2 раза (в то времякак доломитовая пыль вызывает повреждение эритроцитов лишь при концентрации 0,2 мг/мл),Следовательно доломитовая пыльобладает значительно менее выраженными цитотоксическими свойствами,чем кварцевая пыль,Формула изобретения Способ определения цитотоксичности пыли путем инкубации ее с биологи. ческим объектом и последующим люминесцентным определением, о т л и ч а ю щ и.й с я тем, что, с целью упрощения способа и повышения точности определения непосредственно мембранно-повреждающего действия, в качестве биологического объекта используют эритроциты крови человека, при этом инкубацию проводят параллельно с различными видами пыли, центрифугируют и с помощью биолюминесценции в надосадке измеряют уровень фотоэмиссии, а наличие цитотоксического эффекта определяют минимальной пороговой концентрацией,а

Смотреть

Заявка

3730414, 21.04.1984

КУЙБЫШЕВСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМ. Д. И. УЛЬЯНОВА

КОСАРЕВ ВЛАДИСЛАВ ВАСИЛЬЕВИЧ, ШПИГЕЛЬ АЛЕКСАНДР СЕМЕНОВИЧ, ЛОТКОВ ВЯЧЕСЛАВ СЕМЕНОВИЧ

МПК / Метки

МПК: C12Q 1/66, G01N 21/76

Метки: пыли, цитотоксичности

Опубликовано: 15.10.1986

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1263713-sposob-opredeleniya-citotoksichnosti-pyli.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения цитотоксичности пыли</a>

Похожие патенты