Способ окраски гистологических препаратов

(19) 01) 6 01 1 М 1/28 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИ Е ИЗОБРЕТЕНИЯ ЕТЕЛЬСТВ юцфд -ШОВЭ(71) Калининский орденаного Знамени политехниче(56) Волкова О. В., Елецкгистологии с гистологическМедицина, 1982, с. 248 -рудового Красий институт й Ю. К. Основыой техникой. М.,251. М К АВТОРСКОМЪГ ОСОБ ОКРАСКИ ГИСТОЛОПРЕПАРАТОВ с,помощью ричневого, отличающийся тем, ю одновременного выявления элементов различного генеза епарате, ткань замораживают, ы и после нанесения красителя дистиллированную воду, а окят в 1 Б-ном растворе основного в течение 60 - 70 мин.(54) (57) СП ГИЧЕСКИХ основного ко что, с цель структурных на одном пр готовят срез помещают в раску провод коричневого11Изобретение относится к гистологии и медицине, связано с микроскопической техникой и применяется при выявлении структурных компонентов органов и тканей различного генеза.Цель изобретения - одновременное выявление структурных элементов различного генеза на одном препарате.Способ осуществляется следующим образом.Берут исследуемый материал, помещают в 12 Я-ный раствор нейтрального формалина. Фиксируют 3 сут и более, т. е. срок хранения в фиксаторе не ограничен. Промывают в проточной воде комнатной температуры 1 - 5 ч. Споласкивают в дистиллированной воде. На замораживающем микротоме готовят срезы толщиной 15 - 50 мкм и помещают их в чашку со свежей дистиллированной водой. Когда все срезы подготовлены и собраны в чашке с дистиллированной водой, их помещают в бокс с 1-ным водным раствором основного коричневого на 60 - 70 мин. Затем срезы извлекают, промывают в дистиллированной воде 3 - 5 мин, помещают на предметное стекло, расправляют, промокают бумажным фильтром и заключают в глицерин.На окрашенном препарате четко и чисто выявляются элементы разного генеза; нервы, клеточные и неклеточные элементы тканей, их структурно-функциональные отношения и связи.Пример 1. При вскрытии кошки через 20 мин после воздействия электрическим током или магнитным полем берут образец (кожа, подкожные мышцы и т. д.), фиксируют в 12 Я-ном нейтральном формалине 3 сут, промывают образцы в проточной воде 1 - 5 ч, споласкивают их в дистиллированной воде. Готовят на замораживающем микро- томе срезы толщиной 15 - 50 мкм и переносят 50 - 70 срезов в чашку Петри с чистой дистиллированной водой, а затем в солонку с красящим раствором (1 Я-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.Промывают срезы в дистиллированной воде 3 - 5 мин,65921 Помещают срез на предметное стекло,расплавляют его и промокают бумажным фильтром. Заключают в глицерин.При микроскопическом изучении срезовустановлены реактивные изменения нервных волокон, полнокровие сосудов и распад лаброцитов.Заключение: используемые параметрывоздействия превышают предельно допустимые дозы и вызывают структурные нару О шенияПример 2. При патологоанатомическомвскрытии обнаружены признаки нарушения течения процесса регенерации. Кусочек органа с изменениями фиксируют в 12 о-ном нейтральном формалине 3 сут. Промывают образец в проточной воде 1 - 5 ч, споласкивают в дистиллированной воде, Готовят на замораживающем микротоме срезы толщиной 15 - 30 мкм, переносят срезы в чашку Петри с чистой дистиллированной водой на время подготовки всего количества срезов, а затем в солонку с красящим раствором (1 Я-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.Промывают образец в дистиллированнойводе 3 - 5 мин, помещают срезы на предмет ное стекло, расправляют их, промокают бумажным фильтром и заключают в глицерин.При микроскопическом изучении срезовустановлены фрагментация нервных волокон, слабое развитие и фрагментация нервных волокон около раны.З 0 Прокрашивание в 1 Я-ном водном растворе основного коричневого менее 60 мин не позволяет выявить все структуры, более 70 мин - делает фотографию темной, и наглядность резко ухудшается.Окрашенные предлагаемым способомсрезы не нуждаются в дополнительной дифференцировке и поэтому промываются в дистиллированной воде в течение 3 - 5 мин для удаления остатков красителя.Окрашивание в 1 о."-ном водном растворе 40 основного коричневого позволяет исключитьприменение реактивов, которые могут оказать разрушающее воздействие на какие- либо элементы исследуемых структур, что позволяет получить целостное представление об органе.Редактор О. ГоловачЗаказ 4300/34 Составитель С. КачкачеваТехред И. Верес Корректор А. ТяскоТираж 897 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам Изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4