Способ серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1091908
Автор: Сайдулдин
Текст
(19) 01) 0 351) А 61 Б ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ НИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ АВТОРСКОМУ СИДЕТЕПСТВ 30-15 емБюл, Рулдининскийнститут7 (088,8орныеНКол техническ сследования 54)( 57)ОСТИКИ БРО СКОТА,ытуемой с ОСОБ СЕРОЛОГИЧЕСКОИ ДИАГЕЛЛЕЗА У КРУПНОГО РОГАТОлючанхций инактивацию исоротки путем ее нагрева( 21) 3469494/(56) 1.Лабораветеринарии,с, .68-77,ния, добавление бруцеллезного антигна и сыворотки крови, содержащей конлемепт и конглютинин, инкубацию полученной смеси, последующее добавление сенсибилизированных гемолизиномэритроцитов барана и анализ реакциипо степени агглютинации эритроцитов,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения чувствительностиспособа,к образовавшимся агглютинатам эритроцитов дополнительно добавляют 0,02-0,05 мл 1-ного растворатрилона Б и анализ ведут по степенираспада агглютината эритроцитов поддействием трилона Б.е е и еЭаказ 3161/3 Тир;.ик 688 Подписное 3 НИИПИ Государственногс комитета СССР па делам изобретений и открытий 13035,. Москва, Ж 35, Раушская наб д,4/5ф в ,ил ППП "П;-.тая-", г,Ужгород, ул.Проектная,4 Изобретение относится к ветеринарии, в частности к диагностике инфекционных болезней животных.Известен ряд способов серологической диагностики бруцеллеза укрупного рогатого скота, например,в реакциях агглютинации, связываниякомплемента, кольцевой реакции с молохом, а также в реакции связываниякомплемнта, При этом к инактивированной испытуемой сыворотке добавляют антиген и комплемент, а послеопределенного времени сенсибилизированные гемолиэином эритроциты барана. По гемолизу эритроцитов судято наличии бруцеллезных антител в испытуемой сыворотке крови 11Однако известные методы характеризуются недостаточной чувствительностью, что обусловливает необходимостьмногократного исследования животных 20для полного выявления всех заболев ших,Целью изобретения является повы.шение чувствительности способа серологической диагностики бруцеллеза у 25Крупного рогатого скота.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота, включающемуинактивацию испытуемой сывороткипутем ее нагревания, добавлениебруцеллезного антигена и сывороткикрови, содержащей комплемент и конглютинин, инкубацию полученной смеси, последующее добавление сенсибилизированных гемолизином эритроцитовбарана и анализ реакции по степениагглютинации эритроцитов, дополнительно добавляют 0,02-0,05 мл 1 В-ного раствора трилона Б и анализ ведут по степени распада агглютината эритроцитов под действием трилона Б.П р и м е р. Испытуемую сыворотку крови в объеме по 0,25 мл н разведениях 1:5 ( контроль), 1;5 1:10 и т, д, (опытные) инактивируют в водяной бане при 58-60 С 30 мин. В опытные пробирки вносят по 0,25 мл бруцеллез- ного антигена в титре, указанном на этикетке, а в контрольную пробирку - такой же объем физиологического раствора. Во все пробирки добавляют нормальную конглютинирующую сыворотку крупного рогатого скота, содержащую комплемент и конглютинин, Смесь выдерживаютв водяной бане при 37 С 30 мин, после чего добавляют по 0,25 мл индикаторной систем, приготовленной из равных объемов 2-ной взвеси эритроцитов барана и гемолизина в двойном титре. Пробирки выдерживают 1 ч в водяной бане и еще 16 ч - при комнатной температуре, Добавляют по 0,02-0,05 мл 1-ного раствора трилона Б и энергично встряхивают. Полный распад конглютината с образованием гомогенной взвеси эритроцитов принимают за отрицательный результат, а сохранение мелких комочков склеенных зритроцитов с просветлением основного фона - за положительный. Использование предлагаемого способа существенно повышает эффективность серологических исследований на бруцеллез, позволяет за короткие сроки наиболее полно выявить больных животных в неблагополучном ста- дЕ,
СмотретьЗаявка
3469494, 12.07.1982
СЕМИПАЛАТИНСКИЙ ЗООТЕХНИЧЕСКО-ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ
САЙДУЛДИН ТЛЕУБЕРДЫ САЙДУЛДАЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: A61B 10/00
Метки: бруцеллеза, диагностики, крупного, рогатого, серологической, скота
Опубликовано: 15.05.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1091908-sposob-serologicheskojj-diagnostiki-brucelleza-u-krupnogo-rogatogo-skota.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота</a>
Штамм культивируемых гибридных клеток животных мusмusсulus l продуцент моноклональных антител против фактора н эритроцитов крупного рогатого скота
Номер патента: 1645296
Опубликовано: 30.04.1991
Авторы: Березкина, Волкова, Гринчук, Завадская, Игнатова, Ковалева, Милованов, Павличенко, Паншин, Паншина, Супрун
МПК: C12N 5/00, C12P 21/08
Метки: антител, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, фактора, штамм, эритроцитов
...1 х 10 клеток/мп. Бизне 6способность клеток при размораживании 75-80%. Прививка клеток штамма264 сингенным иьппаи вызывает у них образование асцитной опухоли, сопровождаюце- ся выделением асцитной жидкости в 45 количестве от 1 до 8 мп. В асцитной ждкост содержатся специФические монАТ к Н- антигенному фактору крови быка. Способность в продукции монАТ клеткаи птамма Р 264 сохраняется на протяжении трех месяцев непрерывного культишрования клеток. После разораливаия клеток способность продуцировать монАТ сохраняется. Прививка мышам цтамма на разных пассажах культивирования стабильно вызывает обраэоваие асцитных опухолей у мышей с высоким титром ионАТ в асцитной жидкости. фя кариологического анализа клеток штаииа П 264 используют 100...
Рекомбинантная плазмидная днк уе psg94, кодирующая синтез производного белка оболочки вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм дрожжей sасснаrомuсеs cererrial-продуцент производ
Номер патента: 1337408
Опубликовано: 15.09.1987
Авторы: Баев, Брантл, Ланг, Розенталь, Рослер, Скрябин, Эльдаров
МПК: C12N 15/00
Метки: cererrial-продуцент, psg94, sасснаrомuсеs, белка, вируса, днк, дрожжей, кодирующая, конструирования, крупного, лейкоза, оболочки, плазмидная, производ, производного, рекомбинантная, рогатого, синтез, скота, штамм
...пентрцфуировлттця аглдокклеток сусценпцруют в том ж суфрав концентрации 3 х 10 клток/ьтцц,К 200 мл сусцензиц к:теток прибавляют 20 мкг плдзмидной ПНК УЕр 809 тк тОО мкл 507, раствора П.Э.1 . 4000выдерживают 1 ч при 30 мин. Пос.те0инкубируют 5 миц при 42 С. Суспензгттоосаждают пентрцфугированием 1 О с прц1 О тыс. аб./мин. Осадок сусцендцруют в 300 ыкл воды и высевяют цо100 мкл на часики с твердой се:тектив - )Внай средой (0,67 Х дрожжевых азотистых оснований, 2 Ж глюкозы, 20 мпт/лгистидицл, 22 бактолгара),Колонии трансформацтов поятляютсяца 2- децт пос:те пасетов)тот:. - 20чг.кую стлбклтность плазмцдь тЕРВС 94в трацсформацтах определяют клк процент клеток, сохранивших плазктдупри росте в селективных условкяхминимальной среде без лейпкттд,...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных мus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к гормону роста крупного рогатого скота
Номер патента: 1564184
Опубликовано: 15.05.1990
Авторы: Баев, Зеленин, Капник, Прудовский, Рубцов, Скрябин
МПК: A61K 39/395, C12N 5/00
Метки: антител, гибридных, гормону, животных, используемый, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рогатого, роста, скота, штамм
...замораживания - на программномзамораживателеС/мин до -70 С, затем перенос в жидкий азот и хранениев нем.При размораживании клеток послехранения в жидком азоте ампулы быстро 40опереносят в водяную баню при 37 С,слегка покачивая. Содержимое ампулыстерильно переносят в подогретую питательную среду в ячейки платы с макорофагамн, инкубируют при 37 С. После 4520-24 ч инкубации среду сливают идобавляют свежую подогретую питательную среду,Жизнеспособность после размораживания - 70%.50Контроль контаминаций.Проверку на микоплаэменное и бактериальное заражение осуществляли сиспользованием флуорохромов Хехст33258 и ДАПИ и посевом культуральной55среды на мясопептонный; агар. Заражения не обнаружено.Прививаемость животным изогенногопроисхождения -...
Штамм культивируемых гибридных клеток животных мusмusсulus l продуцент моноклональных антител против в-лимфоцитов крупного рогатого скота
Номер патента: 1645295
Опубликовано: 30.04.1991
Авторы: Думалакене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас
МПК: C12N 5/00, C12P 21/08
Метки: антител, в-лимфоцитов, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм
...связанные белки элюируют0,2 И НС 1-глициповым буфером, элюатнейтрализуют 1 М НаОН и диализируютпротив ФСБ.Иодирование белков клеточной поверхности проводят с помощью лактоперокси;азы, В суспензию клеток5-Ох 0 в 1 мл ФБС добавляют100 мкл лактопероксидазы (2 мг/мп),40 ИБк На 3 и 100 мкл О,ОЗХ Н 0Смесь инкубируют 4 мин, осторожноперемешивая, и опять добавляют00 мкл О,ОЗХ ИО. Через 4 мин инкубации клетки 3 раза проьываютФСБ и лизируют 0,5 Х-ным растворомдезоксихолата натрия на боратномбуфере, рН 8,3, имеюцим 1 мИ РМЯГ(уенилметилсульфонилфторида). Эффективность мечения белков устанавливают с 10 Х-ной трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Установлено, что иммуносорбент с М 1 А специфически связывает0,79 Х белков, снятых с НЛ, и 1,36...
Штамм культивируемых клеток почки эмбриона коровы для культивирования вируса лейкоза крупного рогатого скота
Номер патента: 1652338
Опубликовано: 30.05.1991
Авторы: Адомайтене, Немейкайте, Рачкус, Садаускас
Метки: вируса, клеток, коровы, крупного, культивирования, культивируемых, лейкоза, почки, рогатого, скота, штамм, эмбриона
...после 2515 пассажей при определении ревертазной активности вирусной фракции культуральнойжидкости 7-суточной культуры М 18 по методу Ложа и др. обнаружена высокая вируспродуирующая активность, достигающая20 10 -10 вирусных частиц в 1 мл.Вирус лейкоза КРС и его антигены, выделенные клетками М 18 в культуральнуюжидкость, выявляются также с помощьюРИД в агаровом геле в варианте для опре 25 деления титра антигена,Наличие зкстрацеллюлярного вирусалейкоза КРС и его антигенов в культуральной жидкости клеток М 18 регистрируюттакже при помощи иммуноферментного30 анализа (ИФА), После осветления культуральной жидкости (5000 об/мин, 30 мин)вирус лейкоза КРС осаждают в 20-номградиенте плоскости сахарозы ультрацентрифугированием, лиэируют,...
Предыдущий патент: Устройство для слежения за движением живых организмов
Следующий патент: Способ лечения экстрасфинктерных свищей прямой кишки
Случайный патент: Измеритель временных интервалов