Способ микроскопического определения риккетсий в препаратах

М 105799 С С С Р А. П, Зотов Н. Блино Заявлено 14 августа 1956 г. за556533 в 1(о),)итет полам изобретений и открытий при Совете Министров ССС Рома- едостатОПИСАНИК К АВТОРСКОПОСОБ МИКРОСКОПИ РИККЕТСИЙ ВВ практике работы по изучению и диагностике риккетсиозов и, в частности, Ку-лихорадки наибольшее значение имеют методы серологического и биологического исследований.Однако большую пользу, в особенности в случаях необходимости быстрого установления диагноза, мон(ст припсси такжс микроскопи, . коссследовапис.Для этой цели обычно используют мазки и препараты-отпечатки из органов и других материалов па предметных стеклах, подвергнутые окраске одним из употреоляемых в практике способов, в основу которых кладется основное трсоовапие: четко и контрастно выявлять и дифференцировать риккетсии от других микробов.Е 1 аиболес распространен)ыми способаи окраски мазков-препаратов па р и(котс ни явля Отся:Способ Романовского - Гимза. При этом фиксация мазков и окраска проводится по обычной методике, рекомендуемой для окраски мазков крови, бакгерий и крове- паразитов, с той разницей, что срок окрашивания в несколь часов.Способ Маккиавело, Окраска ЗОБРЕТЕН ВИДЕТЕЛЬСТВУКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯЕПАРАТАХ 0,25%-ным щелочным раствором основного фуксина прп рН 7,2 - 7,4 с ди(рферепциацией 0,5%-ным раствором лимонной кислоты и докраской 1 м-ыъ Вод)ы. ра)стВОром мстиленовой сшы(и.Способ П. Ф, Здродовского. НазВа 1 Иь)Й ав Ор предложил в сосоое Чаккиавсло заменить щелочной раствор фуксша фуксином Пфсифсра, ди(рфсренцпацшо проводить 05%-пым раствором лпмош)ой кислоты, ", для о:(рпп)ва;я фона использов)т) вз"Сто 1%-)Ого ,5 11-ный раствор з)ст, с)Овои спы(и.Два после(Их способ;окраск; ОСНОВац Л Иа ПОВЫШСППОй е(КПСЛО- тоустойчивсст) рпккетспй и представляют собой модификацию метода окраски и)слотоупорных мкробов по Ци.)ь-ЕЕсльссну.Все перечисленные способы являОтся п)рак пчсскп цеыми и пользуются заслужепыпризнан)еъ В качестве методов, позволяющих выявлять как свободно лежащие, так и внутриклсточныс формы риккетсий.В то ке время перечисленные методы окраски не лишены некоторых недостатков,Так, в отношении способановского-Гимза в качестве нМ 105799ка может быть указана длительность процедуры окраски, а в отношении способов Маккиавсло и Здродовского - большая зависимость результатов окраски от качества фуксина. При пользовании фуксином с недостаточно хорошей растворимостью эти методы, даже в опытных руках, нс всегда дают удоглстворптельныс результаты.Уместно отметить, гго пс оторсс ослабление контрастности окраски при пользовании методами Маккиивело и Здродовского может оыть, повидимому, обусговлепо тем, гго в качестве фоновой краски в эких способах используется раствор кн.- тиленовой синьки, Известно, что эта краска имеет ценное свойство - полихромазию, вследствие чего в некоторых условиях, при пользовании даже одной метилеповой синькой, возможно получить окр;шшвание различных клеточных элементов в целую гамму цветов - ог фиолетово-синего до красного,В описываемом способе определения риккетсий в препаратах отмеченные недостатки устранены.Способ имеет ту особенность, 1 то, с целью увеличения точности и сокращения длительности определения, дифференцирование производят раствором муравьиной кислоты, а дополнительную окраску фона в раствором малахитовой зслешл.Предлагаемый способ окраски риккетсий в мазках из тканей и различных выделений животных пригоден в практических условиях и не очень зависит от непостоянства качества бактериологических красителей.Мазок или препарат-отпечаток из органов делается на пред. летном стекле по возможности тонким и равномерным, высушивастся на воздухе и фиксируется на пламени горелки.Окраска производится по известной схеме: фуксин - дифференциация раствором слабой кислоты - дополнительная окраска фона контрастно работающим красителем.Непосредственно перед окраской готовят раствор фуксина. При этомОти. р ликтор 1, 1 О. й 1 азуренко на 1 л,г карболового фуксина Биля добавляется 1,5 - 2,0 ил дистиллированной воды и одна капля 1 %-ного раствора двууглекислой соды.Г 1 риготовлснньй раствор фуксина а.1 пвается на мазок. Окраска длится 78 минут.Краска смывается водой и мазок оыстро (в течение не более двух сек.) ополаскивается О, 25 Ь-нык раствором муравьиной кислоты, после чего снова хорошо промывается водой.Докраска проводится в течение 10 сек. 0.3"/о-ныы водным раствором малахитовой зелени.Л 1 азок хопопо промывается водой, просушивается между ли "тами Фидьтровальной бумаги и просматривается под иммерсией.Риккетсии окрациваются в красный,.рубиново-красный цвето и на зеленоватом фоне выделяются весьма выпукло. При этом они представляются очень хорошо контурированными, что делает возможным полностью видеть делящиеся формы и полиморфизм их. При описанном способе окраски хорошо видны риккетсии, расположенные внутри- клеточно.Посторонняя микрофлора окрашивается в темно-зеленый и зеленый цвета. Цвет клеточных элементов - зеленый, зеленоватый.Предлагаемый способ окрашиваиия риккетсий прост, доступен, процедура окраски мазка не продолжительна, непостоянство качества красителей практически на результатах окраски не сказывается.Предмет изобретенияСпособ микроскопического определения риккетсий в препаратах, подвергнутых окрашиванию раствором фуксина с последующим дифференцированием и с применением дополнительной окраски фона, о тличающийся тем, что, с целью увеличения точности и сокращения длительности определения, дифференцирование производят раствором муравьиной кислоты, а дополнительную окраску фона в раствором малахитовой зелени.Стаидчртгиа. Полн. к иеч, 26 Уг. Объем О,25 и. л. Гираж 100. Цена 25 коп.Гор. Алатырь, типография а 2 Министерства культуры Чувашской АССР, Зак, 2415