Способ получения гербицида n 51262

ВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТИЙ О ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ АТ 4027022/2804.02,8620603/198505.02.85(46) 30. 11.88. Бюл. Яф 44 (71) Санкио Компани Лими (72) Тацуо Ханейси, Муцу Акио Ториката, Такао Ока Тодзигамори и Кацухико К (53) 576,8(088.8)(57) Изобретение относится к микробиологической промышленности, вности к способу получения нового гербицида, именуемого как вещество51262, Цель изобретения - получениенового более эффективного гербицида.Способ заключается в культивированииактиномицета Ястерощусеа Ьуцговсорхсцз РЕКИ ВР=958 на жидкой питатель-ной среде, содержащей источники углерода, азота в минеральные соли, споследующим удалением биомассы и выделением целевого продукта из культуральной жидкости и его очисткой,Полученньй гербицид более эффекти"вен по сравнению с биолафосом,4 табл., 3 ил.Вид растения Узколистные сорняки Зейаг 1 а ЬаЬег, Неггш. Рдуйаг 1 а вап 8 ц 1 па 11 в (Ь) асор. Широколистные сорняки е АшагапсЬцв геггоЕ 1 ехцвЗЫа врхпове Ь,Ашйговьа агйеш 1 пЫо 11 а Ь. П р и м е ч а н и е. Ингибирование роста 0-53 - эффективность 0; 6-30 Х - 1; 31-50 ж - г; 51-70 З - 3; 71-95 ж - 4; 96-1003 - 5. Таблица 3 Эффективность при дозировкахРщьйагха ващцьпа 1 хв(Ь) Зсор ЕсИпосЫоа сгцв-За 111(Ь) Веацч Зегагьа ч 1 гЫ 1 в(Ь)Веацч Широколистные сорняки АшагапйЬцв гесгоГ 1 ехцв Ь. ЕсЬ 1 посЫоа сгцв-ца 111(Ь)Веасю.Зейаг 1 а ч 1 гИ 1 в(Ь)Веацч Вгавв 1 са агчепв 1 в(Ь)КцпйгеСЬепоройдцша 1 Ьцш Ь.АЬцгИоп йЬеорЬговй. Иейдс.1442063 Продолжение табл.З Вид растения Эффективность при дозировках,(м,д.активного ингредиента) 250 500 Вгазз 1 са агчепз 1 з(1)КцпйгеСЬепорой 3.иа а 1 Ьищ. ЬАЬцс 11 оп гЬеорЬгазг.1 МейдеЯИа зр 1 поза 1АаЬгаза агсеш 1 зпго 11 а ъТаблнда 4 Эффективность гербидидв на растенияо Веаеет с е е й а Ь 1 . с 1 а и3 3 5 4 3 4 4 5 5 5 3-,4 5 5 в 5 Йб 2 4 2 2 2 3 3 О 2е. а - Мятлик однолетний (роа аппца)Ь - просо куриное1442063 870 ЛО ЛЮ Лд ЛО.емЩИ. 7 еоо эао гво оооо воо юо ФАЗ СМ1442063Составитель Т. Полянская Редактор Л; Пчелинская Техред А.Кравчук Корректор М. Шароши Закаэ 6298/58 Тирах 455 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам иэобретений и открытий113035,Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Проиэводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 430 Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности, к способу получения гербицидов, а именно - нового соединения,именуемого как вещество У 51262,которое проявляет гербицидную актив"ность и способность тормозить рострастений,Цель изобретения ; получение ново го более эффективного гербицида.Структура вещества У 51262 не выяснена в достаточной мере Оно имеетследующие характеристики:Внешний вид: нейтральные, бесцвет ные кристаллы,Удельное вращение: а +28,8о(С=1, 04, НО, П - линия натрия) .Вычислено, Х; С 38, 54; Н 4, 62;И 12,84.20С;Н ИОНайдено,7.: С 38,55; Н 4,53; М 12,90,Температура плавления кристаллов187-189 С.Молекулярная масса 218 м/е.25УФ-спектр (см.фиг,1): отсутствуютмаксимумы поглощения выше 220 нм вводном растворе.ИК-спектр для таблетки КВ представлен на фиг. 2.ЯМР-спектр (д, рра), замерен на400 МГц в тяжелой воде с использованием тетраметилсилана в качествевнешнего эталона, (см,фиг.3).Растворимость: растворимо в воде,метаноле и этаноле, нерастворимо вэтилацетате и ацетоне.Цветовые реакции: положительныедля реакций с серной кислотой, анисальдегидом (серной кислотой и перманганатом калия).Тонкослойная хроматография; значение К= 0,3 на пластине силикагеляУ 5715 (фирма "Мерк Ко", проявлениесмесью 50:10:2 по объему этилацетата,изопропанола и воды.Способ получения гербицида У 51262заключается в следующем;Штамм актиномицета БггергошусезЬуйгозсорхсцз (РЕКМВР)АПК 63584культивируют в жидкой питательной50среде при перемешиванйи и аэрации.Питательная среда содержит источникиуглерода, азота, минеральные соли,В качестве источника углерода могутбыть использованы глюкоза, мальтоза,55сахароза, маннит, мелассы, глицерин,декстрин, крахмал, соевое масло ихлопковое масло, из источников азота-" соевая, арахисовая, хлопковая мука,рыбная мука, экстракт кукурузы, пептон, мясной экстракт, прессованныедрожжи, дрожжевой экстракт, нитратнатрия, аммония или сульфат аммония,из солей - хлористый натрий, фосфаты, карбонат кальция и, при необходимости, соли металлов в внде микроэлементов, В процессе культивирования в жидкой среде можно использовать противовспениватели, такие каксиликоновое, растительное масла илиподходящие ПАВ.Культивирование проводят при нейтральной рН и температуре 24-38 С,наиболее предпочтительно при температуре около 28 фС,Продуцирование вещества Ф 51262 впроцессе культивирования контролируют путем оценки ингибирующей активности культуральной жидкости по отношению к чувствительным видам растений, таких как Вгазз 1 са Кара (Ь)айаг. "Кошагзцпа"(Комацуна"),Наибольший выход вещества Р 5 1262наблюдается после культивированияв течение 60-120 ч. Однако этот период может колебаться в зависимостиот условий и методов культивирования,может быть приемлемым более короткийили более длительный период каждогоконкретного случая путем экспериментирования, с использованием подходящих методов контроля,Вещество В 51262 растворимо вводе, выделяется, главным образом, вкультуральную жидкость, и может бытьвыделено путем удаления сухого вещества, включая мицелий, напримерфильтрованием, предпочтительно с использованием фильтровальных средств,таких как диатомит, или центрифугированием. Оно может быть затем выделено из отделенной жидкой части традиционными методами на основе егоспецифических физико-химическихсвойств и с последующей очисткой принеобходимости.Вещество 9 51262 отделяют от других продуктов с помощью адсорбента,либо адсорбированием примесей, либо адсорбированием вещества У 51262,либо адсорбированием того и другогоотдельно или вместе с последующимэлюированием вещества У 51262. Может использоваться широкий ассортимент адсорбентов, в частности активированный угольсмолоподобные адсор"(проявление гербицидного эффекта или эффекта торможения роста) колеблется в зависимости от метода нанесения или применения, концентрации вещества Р 51262 и чувствительности обработанного растения к веществу, Соединение проявляет гербицидную активность по отношению к различным сорнякам и применимо перед и после всходов. Гербицид может быть нанесен на листву растений. Вещество может тормозить рост растений, не вызывая их гибели. Оно пригодно для предотвращения полегания рисовых растений благодаря укорочению соломы рисового растения, для уменьшения продолжительности или частоты скашивания, пасынкования илиобрезки благодаря торможению роста травянистых и садовых растений, для обеспечения карликовости цветущих растений и т.п.Вещество У 51262 может быть использованосамостоятельно или в смеси с носителем и/или добавками. Композиция может быть представлена в различных видах, например, может быть составлена в виде дуста, крупного порошка, гранул, микрогранул, смачиваемого порошка, водорастворимого порошка или жидкого препарата. Необязательно использовать совершенно чистую форму вещества Р 51262, в связи с чем очистка может быть приостановлена на любой стадии, а результирующее сырое вещество может быть употреблено в качестве активного ингредиента композиции.Используемые в такой композиции носители могут быть синтетическим или природным, органическим или неорганическим веществом, и их смешивают с соединением для облегчения 5 10 15 20 25 3035 40 хранения, транспортировки и обраще 45 ния с активным ингредиентом или жедля того, чтобы.способствоватьмиграции активного ингредиента в расте-,ние. В качестве твердык носителеймогут быть использованы глина, тальк,диатомит, каолин, бентонит, карбонаткальция, гипс, синтетический осажденный кремнезем, аттапульгит, цеолитили пемза, такие синтетические и натуральные смолы, как кумароновая смола, алкидкде смолы, полихлорвинил,сложноэфирная или ксантановая камедь,такие воски, как карнаубский воск илнпарафин и другие органические мате 3 144бенты, такие как "Амберлит" (зарегистрированный товарный знак) ХА 0-2,ХАЭили ХАЮ(производства фирмыРом энд Хаас 1), и "Диайон" (зарегистрированный товарный знак) НР 10,НР 20, СНР 20 Р или НР 50 (производствафирмы "Мицубиси кемикл индастриз").Присутствующие в жидкой части примеси могут быть удалены пропусканиемсодержащего вещество У 51262 раствора через слой или колонку с однимили несколькими упомянутыми адсорбентами или адсорбированием вещества У 51262 на одном или несколькихадсорбентах с последующим его элюированием подходящим элюентом, в частности смесью метанола, ацетона илибутанола с водой,Полученное вещество У 51262 можетбыть дополнительно очищено различными средствами, например распределительной хроматографией в колонке с использованием целлюлозного продукта,такого как "Авицел" (зарегистрированный товарный знак продукции фирмы"Асахи кемикл индастриз") или "Сефадекс ЬН" (зарегистрированный товарный знак продукции фирмы "фармация", Швеция), Примеси, присутствующие в жидкой части, содержащей вещество У 51262, могут быть также удалены адсорбированием их на различныхкатионообменных смолах (сильных или слабых),таких как "Дауэкс 50 И"(зарегистри".рованный товарный знак продукциифирмы"Дау кемикл") или "Амберлит ХКС" (зарегистрированный товарный знак продукции фирмы "Ром энд Хаас" ) или жена анионобменной смоле, такой как"Дауэкс 1" или "Диайон М А 10",Дальнейшая очистка вещества У 51262может быть осуществлена с помощью хроматографии с использованием силикагеля (при необходимости).Вещество У 51262 проявляет гербицидную активность, а также способность тормозить рост растений. Подгербицидной активностью имеется ввиду то, что вещество подавляет рострастений и может, в конечном счете,привести к их гибели, С другой стороны, под способностью тормозить рострастений имеется в виду то, что вещество тормозит или подавляет рострастений, не давая таких признаковгербицидной активности, которые проявлялись бы в некрозе или гибели растений, Реакция растения на вещество5 44206 риалы, такие как ореховая скорлупа (например, грецких и других орехов) или соевый порошок, В качестве жидких носителей используют воду и спирты, такие как метанол, этанол, изопропа 5 нол или этиленгликоль.Композиция может содержать поверхностно-активное вещество (ПАВ), способствующее диспергированию, смачива нию или распределению композиции. Анионные ПАВ вводят в виде натриевой и кальциевой соли лигнинсульфоновой .кислоты, олеата натрия, додецилбензол. сульфоната натрия, диалкилсульфосукцинаты натрия, натриевой, аммониевой и аминовой соли полиоксиэтиленалкиларилэфирсульфатов или полиоксиэтиленалкилэфирсульфатов или свободных кислот или солей полиоксиэтиленалкиларилО эфирфосфатов или полиоксиэтиленалкилфосфатов Из катионных ПАВ использу" ют высшие алифатические амины и конденсаты окиси этилена с такими ами- нами, как хлориды четвертичного ам б мония, Б-алкиламинацетаты и Я-алкиламиноксиды. Из амфотерных ПАВ используют бетаины и ПАВ типа аминокислот. Из неионогенных ПАВ вводят глицеридные и сахарозные сложные эфиры жирных кислот, конденсаты окиси этилена с высшими алифатическими спиртами,конденсаты окиси этилена с алкилфенолами или алкилнафтолами, амиды или этоксилированные амиды высших жирных кислот, высшие жирнокислотные сложные. эфиры сорбита или этоксили" рованных сорбитов, высшие жирнокислотные сложные эфиры глицерийборатов или этоксилированных глицеринборатов .и сополимеры окиси этилена с окисью пропилена.Композиции могут содержать защит" ные коллоидальные вещества, такие как желатин, гуммиарабик,казеин, поливиниловый спирт или карбоксиметилцейлюлозу, или загустители, такие как полифосфат натрия или бентонит., Для расширения применимости и экономии трудовых затрат композиция может быть скомбинирована с фунгицидами, инсектицидами, другими гербицидами, регуляторами роста растений или удобрениями.Используемый штамм актиномицета идентифицирован по "Краткому определению бактерий Берги", М., Мир, 1980, т. 2, Ассопошусейез,штамму присвоен У 8 АПК 63584. Он депонирован в Инсти 3 6туте ферментационных исследованийАгенства промышленной науки и техники Министерства международной торговли и промышленности, Япония, где емуприсвоен номер РЕВИ Р, и повторно депонирован в Институте ферментационных исследований с присвоениемномера РЕВИ ВР.Штамм имеет следующие характеристики.Морфологические и культуральныепризнаки.Вегетативные гифы штамма БАНК 53584растут хорошо, с ветвлением, на средах 1 БР при 28 С в течение 14 сут,При микроскопическом изучении на воздушных гифах наблюдаются простые ветвления. Цепочки спор представляют собой в основном замкнутую спираль,Поверхностная .структура цепочки спорбородавчато-складчатая. Не наблюдается специальных органов, таких каксклероции, фрагментированные вегеративные гифи или спорангии,Воздушный мицелий увлажняется ичернеет в процессе культивирования.Растворимый пигмент не продуцирует.В табл. 1 представлена характеристика роста и колоний штамма, полученныхпосле культивирования в течение 14 чопри 28 С, на различных стандартныхсредах.Физиологические свойства:Гидролиэует крахмал. Разжижаетжелатин. Восстанавливает нитрат. Молоки не коагулирует, Молоко пептонизирует. Растет при температуре (сре"да 1) 11-46 С. Оптимальная температура роста (среда 1) 24-38 С, Растетна среде 1, содержащей 77. ИаС 1, присодержании 103 - роста нет. Разлагает казеин и тирозин. Не разлагаетксантин, Меланоидный пигмент на средах 1, 3, 4 не образует. Меланоидного пигмента (среда 3) нет. Выработки меланоидного пигмента (среда 4)нет.Используемые среды:Среда 1 ф агар на дрожжевом и солодовом экстрактах (1 БР 2),Среда 2; триптоно-дрожже- экстрактовый бульон (1 БР 1);Среда 3: пептоно-дрожже-экстрактовый агар с железом (1 БР 6);Среда 4: тирозиновый агар (1 БР 7),Использование источников углеродаизучали, применяя безальноагаровую .среду Прндхэма-Готлиба после инкуби42063 5 10 15 20 25 30 40 45 50 7 14 рования штамма 63584 в течение 14 сут. Поскольку штамм ЗАИК 63584 может расти, в базальной среде беэ введения дополнительного источника углерода, довольно трудно точно описать его способность использовать источники углерода.Нижепоказана степень относительного испольэованияисточников углерода.Вкачестве контроля использовали базальную среду, обозначено знаком("-").Отношение к источникам углерода:О-глюкоза + В-фруктоза +Ь-арабиноза ф Ь-рамноэаР-ксилоза сахарозаинозит раффиноза -0-маннит контроль ("+" - используется,слабо используется,- не используется).Компоненты цельной клетки.Стенки клеток штамма ЗСгергошусез ЬУ 8 говсордсцв ЗАИК 63584 содержат Ь,Ь-диаминопимелитовую кислоту и глицин.П р и м е р 1. Культуру Зйгерошусеазр. штамм ЗАИК 63584 инокулируют в четыре колбы Эрленмайера по 500 мп, каждая из которых содержит 80 мп среды, имеющей следующий состав, мас.7:Глюкоза 3Дрожжи 1Соевая мука 3Карбонат кальция 0,4МЗЗ 04 7 НО 0,2Противовспениватель.до стерилизации 100Затем штамм культивируют на качалке при 220 об/мин в течение 72 ч при 28 С.2 мп полученной культуры засевают в 130 колб Эрленмайера по 500 мл, каждая иэ которых содержит 80 мп описанной среды, и культивируют на качалке при 220 об/мин в течение 96 ч при 28 С. Полученные культуральные бульоны и смывки,смешивают, в объеме .1 1,4 л, смешивают и добавляют 1 кг "Целита 545" (товарный знак на продукцию фирмы "Джонз Мэнвилл про-, дактс" - смесь фильтруют с получением 11 л фильтрата, имеющего рН 7, 1Затем фильтратпропускают через хроматографическую колонку, заполненную 3 кг активированного угля (продукт производства фирмы "Вако пьюр кемиклэ индастриз") для адсорбирования веще" ства У 51262,Колонку промывают 4,5 л деиони" эованной воды, а затем целевое вещество элюируют 15 л 103-ного (по объему) водного ацетона. 16 л активного элюата конденсируют упариванием при пониженном давлении, а затем лиофиэуют: с получением 61 г сырого порошка, содержащего целевое вещество У 51262, Полученный сырой порошок может быть использован как таковой для агрохимического употребления.Затем сырой порошок адсорбируют на хроматографической колонке, содержащей 500 мл "Авицела", который предварительно уравновешен ацетонитрилом. После этого колонку элюируют 2 л ацетонитрила, 3 литрами 973- ного (по объему) водного ацетонитрила и 6 л 853-ного (по объему) ацетонитрила. Элюат собирают фракциями по 1 л каждая. Установлено, что целевое вещество У 51262 присутствует во фракциях с 6-й по 9-ю. Эти фракции объединяют, конденсируют упариванием при пониженном давлении, а затем лиофилизуют с получением 4,6 г норошка. Порошок растворяют в небольшомколичестве 503-ного (по объему) водного метанола и адсорбируют на "Сефадексе ЬН" в колонке, которую предварительно уравновешивают 503-ным(по объему) водным метанолом, Колонку элюируют, используя 50 Х-ный (пообъему) водный метанол, элюат собирают фракциями по 15 мл. ФракЦииУ 36-50 содержат целевое веществоУ 51262, их собирают, объединяют,конденсируют упариванием при пониженном давлении и вновь пропускают через ту же колонку с "Сефадексом ЬН". Элюированные фракции собирают и лиофилиэуют, получают 334 мгобразца вещества 9 51262 чистотойоколо 703,300 мл этого образца адсорбируютв колонке с силикагелем, которуюпредварительно уравновешивают смесью 10: 1 по объему хлороформа и метаГиола. Целевое вещество элюируют смесью 6:1 по объему хлороформа и мета-, нола и элюат собирают фракциями по 15 мл. Фракции Ф 22-60 собирают, 9 144объединяют, конденсируют упариванием при пониженном давлении, а затемподвергают тонкослойной хроматографии на силикагеле, используя смесь50; 10:2 по объему этилацетата, изопропанола и воды в качестве проявительного растворителя, Целевое вещество экстрагируют смесью 6: 1 по объему хлороформа и метанола. Экстрактконденсируют упариванием при пониженном давлении, а затем лиофилизуют.Получают 25,5 мг вещества 9 51262в виде бесцветного порошка, имеющегоследующие характеристики,Внешний вид: нейтральный, бесцветный порошок.Удельное вращение:в( +24,4 (С==0,61, НО, 0-линия натрия),Вычислено, .: С 35,59; Н 5,08;И 11,86.С.,Н ,ИО НОНайдено, ; С 35,65, Н 5,00;Н 11,71, и т.д, все характеристикивещества У 51262,П р и м е р 2, 260 мг частичноочищенного вещества У 51262 получаютпо примеру 1 (до стадии, на которойполучают сырой образец чистотой около 707), Это частично очищенное соединение растворяют в небольшом количестве воды. Раствор адсорбируютна колонке, содержащей 300 мл "Диайона СНРР", и элюируют водой. Элюат собирают Фракциями по 5 мл и целевое вещество Ф 51262 элюируют в фракциях У 61-67, дающих одно пятно натонкослойной хроматографии. Эти фракции объединяют, конденсируют упариванием при пониженном давлении и лиоФилизируют. Получают 41 мг целевого веществаУ 51262 в виде бесцветного порошка,Все характеристики соответствуют.П р и м е р 3. Получение кристаллического вещества У 512 б 2.Методику по примеру 2 повторяют сполучением 130 мг вещества В 51262в виде бесцветного порошка. Весь этотпорошок растворяют в горячем ацетонеи охлаждают. Отделившиеся кристаллысобирают,Получают 37 мг вещества У 51262в виде бесцветных игл, Характеристики соответствуют.П р и м е р 4. Получение веществав виде гранул. 2063 1 ИПосле культивирования по примеру1 культуральный бульон адсорбируютв колонке с активированным углем. Активную фракцию, элюированную 107.-ным 5(по объему) ацетоном, упаривают досухого остатка при пониженном давлении с получением сырого порошка. Этот,сырой порошок растворяют в воде с получением 507-ного (по массе) водногораствора и его адсорбируют на гранулированной пемзе (размер 10-48 меш поТайлеру (0,295-1,651 мм), получая гранулы,15 П р и м е р 5. Получение смачиваемого порошка. 50 мас.ч. сырого порошка, 3 мас.ч.додецилбензосульфоната натрия, 2 мас.ч,поливинилового спирта и 45 мас.ч. глины смешивают при обеспечении однородности и пульвериэируют, получая смачиваемый порошок,П р и м е р 6. Получение вещест 25 ва в виде водорастворимого порошка.50 мас.ч. вещества У 51262, 2 мас.ч,вещества У 51262, 2 мас,ч. полиоксиэтиленалкилфенилового эфира, 10 мас.ч.синтетического кремнезема и 38 мас,ч.сульфата аммония равномерно смешивают, получая водорастворимый порошок,П р и м е р 7. Получение жидкогопрепарата,10 ч. вещества 9 51262 и 2 ч лаурилсульфата натрия равномерно рас 35творяют в 88 ч, метанола, получая жидкий препарат,П р и м е р 8. Получение жидкого препарата.10 ч. вещества 9 51262 и 2 ч. додецилбенэолсульфоната натрия растворяют в 88 ч. воды, получая жидкийпрепарат.П р и м е р 9. Эффект ингибиро 45вания прорастания семян комацуна.Стерилизованную вату помещают надно пробирок (1 О х 100 мм) высотойоколо 5 мм. В одной пробирке ватупропитывают 0,5 мл дистиллированной50воды, в других - водным раствором,содержащим вещество 9 51262 в различных концентрациях. В каждую пробиркупомещают около 10 семян растения космацуна и выдерживают 3 сут при 28 Сдля определения ингибирующей концен 55трации вещества н-" 51262, оцениваемойпо наличию или отсутствию прорастаниясемян. Минимальной ингибирующий концентрацией вещества У 51262 в отноше12 63 Формула из обрете ния Способ получения гербицида У 51262путем культивирования актиномицетавггергошусез Ьуговсорсцз ГЕ 1 И ВР 958 на жидкой питательной среде, содержащей источники углерода, азота,минеральные соли, при перемешиваниии аэрации, при температуре 24-38 Сс последующим удалением биомассы ивыделением целевого продукта иэ культуральной жидкости,11 14420нии прорастания семян комацуна является 3, 13 мкг/мл.П р и м е р 10. Испытание на предвсходовую обработку почвы.Пластмассовый горшок заполняютверховой почвой с обеспечением площади поверхности около 150 см , за 2тем на почву высевают семена последующих однолетних сорняков Бейаг 1 аЕаЪег 1 Неггш, в 1 д 1 гагда ваацьпа 1 ьв(Ь) Ясогр, ЕсЬ 1 посЫоа сгцв-да 11 г(Ь)Веацч. Бесагр ч 1 гЫ 1 в(Ь) Веацч, АпагапсЬцвгейгог 1 ехцв Ь, Вгаввдса агчепздз(Ь)Кцпгге, СЬепоройдцш а 1 Ьцш Ь,АшЬгозда АгТешвдс 2 о 11 а Ь, АЬцг 11 опгЬеорЬгазга Мейгс, апб Бдба вр 1 поза Ь.затем их покрывают слоем почвы.Спустя сутки после высева семян,водный раствор вещества У 51262 равно-,мерно разбрыэгивают по почве в количестве 15 мл на горшок. Затем горшкиставят в теплицу на 3 недели, послеистечения которых наблюдают рост сорняковГербицидный эффект вещества 25У 51262 оценивают, сравнивая ростобработанных растений с контролем,который не был обработан.Результаты приведены в табл, 2.П р и м е р 11. Обработка листвы. З 0Семена сорняков высевают в горшки,покрывают слоем почвы и оставляют втеплице, Спустя 10 сут после высева,водный раствор вещества У 51262 смешивают с 0,03 мас.Х распределительного средства Грамин Б" (товарный1 11 35знак фирмы "Санке"), В каждый горшокразбрыэгивают 5 мл полученного раствора. Спустя 10 суток после обработки наблюдают рост сорняков и гербицидный эффект вещества У 51262.Результаты опыта представлены втабл, 3,П р и м е р 12. Торможение ростарастенийПластмассовый горшок заполняютверховой почвой с обеспечением площади поверхности почвы 150 см. Высевают семена заливного риса, соибобов, кукурузы и хлопчатника. Клубни многолетних сорняков, сыти пупурной (Сурегцзгогопйцз), высаживаютв каждый горшок и семена и клубнипокрывают той же почвой. Горшки помещают в теплицу на 10 сут. Готовят водные растворы вещества У 51262 (попримеру 11) до требуемых концентраций, и вносят 0,03 об,Х распределиного средства "Грамин Я", 5 мг полученного раствора разбрызгивают напочву каждого горшка. Рост растенийсравнивают спустя 2 недели с контролем, который не подвергался такойобработке. У растений, обработанных125 м,д, вещества У 51262, наблюдалось торможение роста у 507 всех растений, тогда как в горшках, обработанных 500 м.д, вещества У 51262,наблюдалось почти полное подавлениероста побегов и корневища сыти.П р и м е р 13, Испытание вещества У 51262 на токсичность.Раствор вещества У 51262 внутривенно вводили мьппам в количестве100 мг на 1 кг массы тела, .Мышей наблюдали в течение 14 сут и не быловыявлено никаких аномалий.Сравнительные данные по эффективности гербицида У 51262 и Биалафоспредставлены в табл, 4,Испытания осуществляли по примеру11 при концентрации 250 чампи.13 1442063 Таблица 1 Среда Параметр Сахарозонитратный агар ВМ Сахарозо-нитратныйагар ОС Глюконо-аспарагиновый агар ВМ ОС Отсутствует РП Глицерин-аспарагиновый агар ВМ(1 ЯР 5) ОС Отсутствует РП ВМ ОС Отсутствует РП Тирозиновый агар(ХЯР 7) ВМ ОС Отсутствует РП ВИ Крахмальный агарс неорганическимисолями (1 БР 4) Пептоно-дрожжевойэкстракт в агарес железом(1 ЯР 6) РП Р Характеристика роста и колоний штамма АПК 63584 Менее хороший, плоские, бледно-желтооранжевые (2"9-9) Слабосформированный, бархатистый,коричневато-белый (1-6-6) Бледно-коричневая (2-8-9) ОтсутствуетХороший, плоские, бледно-желтоватооранжевые (2-9-9)Слабосформированный, бархатистый, белый Бледно-желтовато-оранжевая (2-9-9) Обильный, плоские, бледнокелтоватооранжевые (2-9-9) Менее хороший, бархатистый, белый Бледно-желтовато-оранжевая (2-9-9) Обильный, плоские, бледно-желтоватокоричневые (6-7-9) Обильносформированный, бархатистьдЪкоричневато-серый (1-5-6) Желтовато-коричневый (6-6-8) Обильный, плоские, бледно-желтоватокоричневые (4-8-9) Менее хороший, бархатистьй, белый Желтовато-коричневый (6-7-8) Обильный, плоские, бледно-желтоватокоричневые (4-8-9) Слабосформированный, бархатистый, белый("Дифко") ВМ Отсутствуют РП Обильньй, плоские, бледно-желтоватокоричневые (6-7-9) Агар на дрожжевом исолодовом экстрактах(1 БР 2) Обильносформированный, бархатистый,коричневато-серый (1-5-6) ВМ Желтовато-коричневый (6-5-8) ОС Отсутствуют РП ФОбильньп, плоские, бледно-желтоватокоричневые (6-7-9)Обильносформированный; бархатистый,коричневато-белый (1-6-6) Агар с овсяной мукой(18 Р 3) ВМ Желтовато-коричневый (6-8-8) ОС Отсутствуют РП Плохой, плоские, бледно-желтовато-оранжевые (2-9-9) Водный агар Менее хороший, бархатистый, светло-коричневато-белый (2-8-7) ВМ Светло-коричневато-серый (2-8-7) ОС Отсутствует РП Плохой, плоские, бледно-желтовато-оранжевые (2-9-9) Агар на картофельноми морковном экстрак"тах Менее хороший, бархатистый, коричневатосерый (1-5-6) ВМ Светло-коричневато-белый (1-7-6) ОС Отсутствует РП Примеч а ние. ч Р - рост, ОС - обратная сторона, ВМ - воэдушныи мицелий; РП - растворимые пигменты,Наэвания цветов и номера проставлены согласно справочнику СиЫе Со Со 1 ог зсапйагй, опублик. "Ниппон сикисай кэнкюсе", Токио, Япония.