Способ получения (3, 7-диметил-окта-2, 6-диен-1, 4-диол)-1-0 -глюкопиранозида

) С 07 Н 15/08 А 61 1 7 ОПИСА БРЕТЕЙИ ЕТЕЛЬСТВУ ТОО ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ СССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ(с 6) 23,06, 85. Бюл, Р 23 (72) Г, Г, Запе сочная, В. А, Куркин, А.Н.Щавлинский, С.А.Вичканова, Т.В,Фатеева и Н.И.Майсурадзе (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт лекарственных растений(56) 1. Тяс 9 еяс 9 е В., Серег Р Вге 1 гшегег, Е,Мопогегреп-С 1 исоя 1 с 1 е аця реп В 1 аггегп оп Вегп 1 а а 1 Ьа ыпс 1 реп Ргйс 9 геп чоп С 9 аепоше 1 ея 3 ароп 1 са, - "С 9 еш. Вег 1 с 9 ге", 1977, В. 110, я3111-311 .2. Вичкансва С.А, и Рубинчик М.А Излучение и использование лекарственных растительных ресурсов СССР, М., "Медицина", 1964, с, 218 в 2.(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ (3, 7-цИМЕ -ТИП-ОКТА, 6-ДИЕН, 4-Л 11 ОЛ) - 1-0-/3 Э-ГЛОКОПИРАНОЗИДА, о т л и ч а ющ и й с я тем, что измельченныекорневища родиолы розовой (99 одго 1 агояеа Ь., сем . Сгаяяц 1 асеае) экстрагируют низкомолекулярным спиртом(С-С ) в соотношении сырье-экстрагент 1:(5-6) сначала при комнатнойтемпературе, а затем ври кипячениис последующим выделением целевогопродукта упариванием растворителяв вакууме и хроматографированиемэкстрактивных веществ на полиамидев соотношении 1:1,.5 с использованиемхлороформа в качестве элюента и с последующей очисткой целевого продуктадвухкратным хроматографированием насиликагеле с использованием в качест- Све элюента смеси хлороформа с метанолом в соотношении 93:7.. оо жР)О оаэи 2 Овоя 2И В д "- о х о ал о х о оща ю обо щКХЗй ооавхъ охо2овеоои" х х Х : д а Оъ о в л х с 3 ЮХ аоа но код ах а и сох о о а г; ы1162813 Ехоо оО ЛЯбо аохИХа хв оО ЙЕ Ф сц С Йм СД ; СР р С) й аЯ)МК этой ГГ)УЦгпт,1:оброТЕНИЕ 0 ГНОСИСя К ХтМИ:) Д КС)КК)ЕТтС К С поотЭ)ДМ ПолгУтопть)тНОВ.Х цЭ)11 ОЛНЫЭ: б 101 О 1 чтпе СКИ д К Гтв:ц,; ВЕП 1 ЕСЭБ 1;. ГРУпты МОЦаТЕРЦЕНОт иСг 1, Оцт) т -Э тД - )1- дЦ -,Облдтт ЭтОПЕ 1 О, . бтр )таттг) г тг гтптТИБНО С 11 Ю .13 вестет способ Г,элутОни. ,)Нов Ге р Гте ц 013 ьх гл 1 козттОБ, ко то рый з дКЭ 1 ЮЧДД ТСЯ Б ТОМ ., ГО БОДНЬ."1 Э 1")гт КЭлисьгБ Вес ц т д Я 1 эд )ЗВЭекдэдт ц- бе ГавКОЭОМ Ц.И МС ТДЦ Г).ОМ ПО. 1 ЧЕ)1 Е 1 Ы)1З КГ . РДЕТ ХРОМДТО Гт) ст)ЦР )Г Ц; Сит),ГД Згеле сме сью хлоэсфстрм - мс тдт 0: с -)1, тэ)1 шдп) Г фи)ь т)ОВ;тт 1,",1 черездпюминц 51 )1 Г 03 т 01)но х )ОтЯтэ г 1)дт )тГ) ю,КД С:)ЛИКД "ЛЕ СМЕ СтО ХЛОРОФОРМметдкол - Бодд д )энесГО приро;ное сОе);тттстиг,Оста: ле)Ндя це пь дэ;тпд тсятем) что согласно способУ изме: . - : че ккь е ксрневГщд роГио.прс зоной(Вос.01 д говея 1, сем: тог.с 7 янко -ныу .Тгяд 1. Ясеяеэ, эстрягируютниз комолекулярньм спиртом ,С. - С,Б соотношении сырье - экстрдгент 4.Э1: т;5-6) СНяЧаля При Комнатой Ец 7 ЕРатУРЕ, а ЗатЕМ ПРИ КИПЯ)Ц ЦИИ С 1 Эследующм Выделе н нем целе В 0 го пр) ДУКта УПЯРИваНИЕМ РаСтВОРИТЕЭтЯ В ВД- кууме и хромятограФи 1 эованием Окстрдк- э тинных веществ на полиамнде н соотношении 111,5 с использовдкием хлоро)Орма в качестве элюента и с последующей очисткой цтеленого продукта двухкратным хромдтогряфированиемЭ.г ка силикагеле с использоканием В качестве элюента смеси хлороформас метанолом в сооткопении 93;7. ч;с 1 ос т 1,пт)1 г:т)он Гт, ц .,; 1 Г;)7 ВО;Ор:;С 71:О.Я,ПтХ потэ.тт СЕЙ, Д)тич 1 БОТС)Р,Х ПР:БО т .КХ",тд 1 Н)ПД ;гдтте; Твд ц: - ЧЕБ т; 0 гтгопутгт 7, тг-.у -ГЭЭ т:ТОРОКЬ К т: СЭ:ГЕ ГЕГЦЭЕ,Ят Р)Пцг Н 1) )СГ 0 7, Зт)5 д,гЬХ Сгит)Гт)В гг - Е)"- Чдпт Г КОН Гт)С)ЛЬ 3 д Е д)Е )дГу ВОЙК С ТРЯ КЦИ т т ДК К)ЭК ЦРИ бОЛЕЕ БЬ С О К 1 г, Мттв",д 1 уЭЯХ гчо:.)ТОРГЕНОВЫЕ 1,1) гтко ЗИДЬт . ОЭ Е) ГДЭ )Т, Е )11 З: ЯЕт: И". р тт г, ,т гХ т ) г ) , Ст "1 .у т;: Пц Г.05 ГЕ МПЕ Нд турЕ - О ЗЬ.);:С 7 1 э 1 ттт,т:. ";по , тттпт)т, ГЭС гПЭПЕ С Ся КБцт= С Г. -И. БЛ;1 ятт Г, )т С ЧИ;) ГГ;ДСЬ ) П Гот Э)ЭНЧЕ СКГГ ттЗ -ватт твтэс 4 НЭ т )ц,овт ЛЕН .;гтт .,ЭЯ 7 т И ЗК Тсд ИИ10 ько 1)ри топ наткой температуре при -10," тК БтКОТОЭОМУ СНИЭКЕНИЮ ЫХО;аце:тБосс Грэдутд - до 1, 17 ,приЕЭ 9 ЭИ"7.1 ННОг тд СТДДИИ ЗКСТ-.ДК -5 /ции :т З; Ом,. Ря,д ПО .ЭО 1 уВСЛНЧ Ц;е-. С)т С, 0 Од ч. .00 ЕДЕНИЕ ) РЕ"т.т)1 ГНОй ЭКСтЭДГ-ЭИ т,0 1 т 1 Я. у В ч 5 ПОВ )СБХ КИПБГЕ Г()кесткого ем тературного ре)к)ща могут подвергаться цеструкции как сам пеленой продукт, так и некоторые балластные Бепества, что в свою очередь затрудняет высвобождение розиридинд из растительной клетки,Для исчерпывающей экстракции растительного сырья цизкомолекулярными СПИРТЯМИ Сэ - ) ЦЕОЭХОИМО ИСПОЛЬ"1162813 ка Ц 11 Е и экст пе н эовать саатцаше 1111 е сырье - экстрагент1: 5 - 1: 6. Уменьшение этага соа 111 оГи ения,1: 4) це дает смачинаемасти сырья и исчерпывающая экстрякцияв этих условиях невозможна, увеличение соотношения сырье - экстрагентдо 1: 7 це приводит к 11 авьш 1 ению выхода целевого продукта и поэтому ононецелесообразно, так как при этомпроисходит неоправданное увеличение 10расхода ра,.творителя и увеличение времени упаривация экстрактогСоотношение упаре 11 цогс экстракта и палиамида 1:1,5, при катарам получен целевой продукт с выходам 1, 27., является опти 11 аэ 1 ьнь 1 л. При увели 1 ении этого соотношения да 1;2 также получен чистый 1 е,пеной продукт с выходом 1,27 (при 1 ер 11), однако здесь неоправцанна увеличивается расход палиямида и поэтому использование этого соотнапеция нецелесообразно. При уменьшении этого соотно 1 пения до 1:1 чис 1 ыи целевой продукт получить не удается. гХроматаграфическяя очистка кстрактя ця полиямиде при элюираваип хлороформом позволяет избиратепь 11 О де сорбирав ять пелс 1 вой продукт и прястиче ски полностью освободиться на зтай стадии от дубильных веществ, сахаров, флаваноидных гликозидан, салидразида, частична ат фпаванощцых агликонав, тиразола, .гликозидов коричнаго спирта. м.Испол 1 завание элюентной смеси хлороформ - метанол в соотношении 93;7 при храматографиче ской очистке на силикагеле позволяет получить чистый целевой продукт с выходам 1,22.В случае использования элюецтной смеси 1,лароформ - метанол в соотношении 94:6 целевой продукт не цесорбируется с силикягеля и, следовательно,в эт,1 х условиях получение розиридина 11 еназмажно.При использовании элюентной смеси хлороформ - метано 1. н соотношении 92;8 нарушается избирательная десорбция целевого продукта, что приводит к загрязнению его рэзарином - гликозщом коричнаго спирта. Приведенные параметры процесса позволяют получать розирицин с выходам 0,9 - 1,2 Я от веса сырья.П р и м е р 1. 0,.5 кг измельченных воздушно-сухих корневищ радиолы разо,Вастсчцо - Казахста,1 ская область ц-Кярагя 11 ский район, р, Арчитицсуба:1 ьп 1 п 1 сг,",Й 11 аяс) исчерпывающе рягируют метяналам н соотношении (проводят лве экстрякции мацеряпри 20 в течение " дней, третью ракцию ведут при кипении метанотечецие 1 ч). Объединеннь 1 е мета -нальцые экстракты упяринают н вакууме при 40 С (н конце процесса упяри - яч.1 я температуру подчимают до 60 С д;.я уцален 1 и ногы, извлеченной из ряс тительцаго сырья) . Получают сиро - паабрязный остаток (вес 220 г), кото - рый 11 подогретом нице разбянляют .1 е.аналом да объема 250 мл, добав:111 юэ в нега 25 г полиамида для уменьше 1 п 1 я вязкости экстракта и полученную однородную суспецзию хроматогряфируют на колонке с 300 г полиам 1 ща (диаметр 10 см, высота 20 см, заполнен 11 е колонки полиамидом в виде суспенз 1 ц 1 в хлороформе).Целевой продукт-розиридин элюируют 3 л хлороФорма, при этом отбрась 1- нают первые 200 мл элюатов, остальные элюяты объединяют и упаривают. Получец 11 ый продукт содержит следующие пр 1:"1 еси (ТСХ в системе хлорофар; - метачол - вода 26:14:3, "Силуфол УФ 254"): р-ситостерин (0,91 , коричный спирт (0,87), трицин (0,82), розиридол (0,76), тирозал (0,70), даукастерин (0,60), розин (0,54), розариь (0,41), розавин (О 34)Остаток после упяривяния (70 г) храматографируют на колонке, заполненной силикагелем (диаметр 6 см, высот: 20 см вес силикагеля 400 г), Колонку промывают 1 л хлороформа и 3 л смеси хлороформ - метанол 95:5. Целевой продукт вымывают 3 л смеси хлсраформ - метанол 93:7 (остаток после Отгонки растворителей 15 г).Ход храматографирования на силикагеле (1 очистка): 1 фракция 1 л (хлорафармцые элюаты); 2-7 фракции по 0,5 (хлороформ - метанол 95:5);8-:3 Фракции по 0,1 л (хлороформ метанол 93:7); 15-23 фракции по 0,2 л (хлороформ - метанол 93:7);24-28 Фракции по 0,1 л (хлороформ - метанол 93:7). Целевой процукт вымь 1 вается в 12 - 25 фракции, все они объединяютсяи упариваются, ПО 1 тученный на этой"- . 0 ".етяссо я 2 л) Вхопг, ) гт ", - г,"КОГО СЬП)(Я. ЗЯ ХОДОМ ЗЛПРОВ ЯИИ 5;С С . т"С .: Н;,И Я ТО, г От 1С.сс Н (1 ПЛ Я Ст , -т,:утол25 ч ., и сигтг ме;тЕ ) 0 П.)5 Г -сгт 51 Е,) Х(;),т( Т)1;)Г)т)МИ -Н".7)., ).) И 20/с тО 1 СЕР 101. .1 СГОтг)1.н Я хром ато Грса." е ДОПЕВ О быт тОлькОдно ГЯтно с величиеОЙ Й От(оло О .)3 г)О.)голубая окраска которого постспеенотемнеет,П р и м е р 2, 0,5 кг измельчен)ого растительного сырья (пр)мер 1/ИССРПЫВЯЮЦЕ ЭКСТРЯГИРУЮТ ЗТИЛОВЫМ с;г)сгиртом в соотноенеи 1".6. ОбьЕдненные зкстрякты упаривают под ваку/Омс ГОРЯче(1 сиРопообРазныи остаток,(11 .70 Г,г ).Г)оатт 5117)". Ие Я 170 )1;т гоЗ ггс гг )г.г . г .- (Ов Нс.1 30)ЯСТВО)ИТЕ,;Е;1 И КО 1 ИЧ( СТВО ЯЦСОРОснгов, Ры.од 1.,аого продукта 2,2ЧТО СОС Та 3,75 Т г, г А От Е 3 Е Са ВОЗДУ,1 р и м г о ,. О,2 кг сырья зкстра РУт)Т МЕГЯНО 10 М:3 СООТНОВЕЕ 1 ИИ г 1 НЯЛО ГИЧНО Гс)ИЕ РУ 1, гЛЬНЕ 1 ГгЮ обрабогку роноят Яналоично прв:.ерс) 1 И 6, )ЬХО Д(Л)ЕГ 010 ПродуКТс24 г, что составляет 1,2% от весаВОЗДУШНО СУХОГО СЫРЬЯП р и и е р 8, 0,2 кг сырья экстра.гируют метана;ом в соотношении 1:4аналогично прпееру 1. Гальее 1 пл".(е обра ботку ведут аналогично примерам 1и 6. Выход целевого продукта 1,6 г,что составляет 0,8% от веса воздушно-сухого сырья,П р и м е р 9. 0,2 кг сырья экстрагируют метанолом в соотношении 1:бтри раза по ЗС ч при комнатной температуре. Дальнейшую обработку проводят аналогично прпеерям 1 и б.Выход целевого протукта 2,2 г, чтосоставляет 1,1% от веса воздуеносухого сырья.П р и и е р 10, 0,2 КГ сьрьяэкстрагируют В услОВи 5 х (11 я 1-О:етанола В соотнопении ; б трираза пое. Дальнейпуеа обработкупроводят аналогично примерам 1 и б.Выход целевого продукта 2,0 г.что состяВляет 1 р 0% 0". Всся ВозеушНО СУХОГО СЫРЬЯ,11 р и и е р 11. 0,1 кг сырьяэкстрагируют аналогично примегу 1.Упяренный метанольньй э(стра кт(40 г) хромятографируют на к(Е:энкеполиамидя (80 г) аналогично примеру 1, элюируя целевой прод ект 1 лхлороформа, Яльнейепую оорабс ткупроводят аналогично примеру 1,уменьшив соответственно количествосипикагеля и Об(нем элюентной смеси,Выход целевого проьгукта 1,2 г,что составляе: 1,2 У от Веса воздушно-сухого сырья.П р и м е р 12. 0,1 кг измельченЕЫХ ВОЗДУШНО СУХИХ КорНЕВ П РОДИОЛЫрозовой экстрагируют аналогично примеру 1. Уцаренный метанольныйэкстракт (40 г) хро.еятографируют наколонке полиамида (-50 ) аналогичнопримеру 1, элюируя целевой продуктО, 6 л хлорофорьеа. Дальееепую обработку проводят аналогично примерам 1и 1 1, еолучее В этих услОВцях сильнозагрязненный продукт,П р и и е р 13, 0,1 кг корневищобрабатывают до стадии хромятографической очистки на силикаге,пе аналогично пргмеру 1. Полученный продуктхроиатографируют на силикагеле приэлюированеи розиридина смесью хлороформ - метанол 94;б, В этих условияхцелевой продукт не десорбируетсяи получить его невозможкн,Г. р и и . р 14. 0,1 Кг корневпц обрабапвают до стадии хроматогра(.Иче КОЙ Очистки ня силикаГеле яня .Е:ж ГИ 5.: у 1, ПО:Т(гЧЕННЫЕ Прн 3 ОЕ ЕЛБой ПРОДУКТ ДБЯТДЫ ХРОМЯТО Геэаф 51 г уют н Я силин Геле при элюе РОБЯЕ.Ц ПСЗЕРИДИНЯ СИ СЬЮ ХЛОРО фо .и - метанол 92: 8. По.тученный целевой продукт с выходом 1,2)% со:Еепнт пеиле сь розарина.11 сспедоваеетуберкулостятиче ской активности Гроведенс В опытах 1 п г.(.Е ГО МЕтО ТОМ СрцйНЫХ рЯЗВЕдЕНцй ;.р:.арета в дедкой ппитятельной среде 0; гона В Отеоепееии ,со 1 асгег 1(еш гц 1 е 103з итаим 8-37 РпВ,1 сследовянея оказ.15 и, что розип:. е В панн Ех уловяк Опта инГи б; Озал Вост .ОЬЯсвег;цеп г(епегс 110.- 31.=, штамм ПРВ концентрации 63 Э М 5 г/МЧ (ТЯ"Пр; - ,гч, неые данные свидетельству 1 О т. ГЕРЕ(Уг 5 ТЗТИцЕСКИй эфэее(т розирцпНа Ееочтц В 10 раз ппеве,:Еп: е; ( 0(- ее е ( гв 1 ю Г,"е( як" ИВ -ость;цееялцлацетятя, отьося:Еегося к сседеее.:.5 . р(ппы монотерпеноэОструю токс:паость розиридина е(с еД" ют на 3 б бсьех ьяах, В Опы тях исользуют бес;Оро.ныс белые :ъ;ц, с мвы ЕЯСС 01 18 - 20 Г. Препара" э:опят Олнократно внутрибрюш(е Ео Е-с . 5 и: В ДОЗях От 1 300гО ЭМГКГ В ВЦЕ В ОЧЕЕЫХ РГ СТВОРОВРЕ 3 ГЛ,ТЯТЕ ЦССЛЕДОЕЗ ЯЕ ЦЯ УСтаНОВ- лено, цт( при Ввод( нии розидиня дюке В ОО(;ьп.Еех дозах 1 300 мг; КГ:Ве(три - бво;Енно еги адо кино гное не погибло,ВО 3 Цдне еО пока 3 Ятелям Ос трои т; х .(ности Относится к малоток -Е .ЕЬСО Е - Иг Е ЕЕ ЦЯ ,Выход и чистота розиредна в зависимости от значений параметров ПрОПСя ПВЕ;.С-.яВгпЕНЫ В табЛ. 2.тЛНЕЕЫЕ тябЛ. 3 К.КяЗЫВЮТ 5 ЧтО нее"слое бееизкое пс хгическоь(строе;епо Вещество отлечяющееся отпред.,яГаемого сОедцеенця меньшимЧИ(ЛОЕ ЕЕТЛЬг:Х Е ОУППИНЫг РЯСПО лоегее.ееье двойых связей и Гцдроксцльных групп, Обладает другп ве",дом бес лс гиче ской Яктегвно стц - моче гоннойя веще с-. Во, близкое по яе(тивностц, - еп:.Еялц;япетат стлеечяется по хие.1 геской структ 1 ре отсутствием УГЛЕВОДЕОГО ОСТЯТКЯ НЯЛИЧИЕМ ТОЛЬКО о,ной Гидрскс:".ьной группы, этери - фгПЦРОВЯЕЕЕОй УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ, И иным рясно-.огеецеы де.оных связей.