Путере

Номер патента: 1551742

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Клявиня, Марнауза, Менес, Путере, Фридман, Швагере

МПК: C12N 9/48

Метки: железы, карбоксипептидазы, поджелудочной, свиньи

...сосуде - 1 л0,005 Р трис-НС 1 буфера (рН 7,55), 25а во втором - 1 л этого же буфера с0,3 М МаС 1. Объединяют фракции с КПА активностью и осаждают сульфатомаммония до 0,65 насыщения, Осадокотделяют центрифугированием и растворяют в 20 мл 0,05 М трис-НС 1 буФера (рН 7,55). Диализуют против0,005 М трис-НС 1 буфеа (рН 7,55),7 ТТ. Кристаллизацию КП А проводятаналогично примеру 1.35Выход 19,5 мл с спензии ферментас удельной активностью КП Л32,5 ед/мг белка, выход по актиннос -ти 31,57,40ПримерЗ.Т. Приготовление ацетонового-порошка проводят аналогично примеру 111. Экстракция,К 140 г ацетонового порошка добавляют 1400 мл 0,005 М трис-НС 1 буфера рН 7,6. Перемешивают ч 5 мин, центрифугируют, рН экстракта доводят довеличины 7,6 1 М раствором...

Номер патента: 1523570

Опубликовано: 23.11.1989

Авторы: Клявиня, Марнауза, Менес, Путере, Фридман, Швагере

МПК: C12N 9/48

Метки: железы, карбоксипептидазы, поджелудочной, свиньи

...натрия) и отделяют нерастворившиеся примеси центрифугирова- . нием. Полученный раствор КПА диализу- З 5 ют против воды для перекристаллизации КПА. В образовавшуюся суспензию кристаллов добавляют 4,5 1, толуола,Удельная активность 32,5 ед.мг белка; выход по активности 31,54.П р и м е р 3. Ацетоновый порошок из поджелудочной железы свиньи приготавливают аналогично примеру 1.140 г измельченного ацетонового порошка экстрагируют 1400 мл 0,005 И45 трис-НС 1 буфера 7,6, После центрифугирования получают 1400 мл экстракта.К экстракту при 4 ф С добавляют суль. фат аммония до 0,05 насыщенного при рН 7,6. После центрифугирования вы-павшую белковую Фракцию суспендируют в 0,05 М трис-НС 1 буфере с рН 7,6 и подвергают диализу против 0,005 М...

Номер патента: 975797

Опубликовано: 23.11.1982

Авторы: Вина, Путере

МПК: C12N 9/48

Метки: oryzae, аспергиллус, выделения, лейцинаминопептидазы

...рариантный раствор сиаюивают в трчение часа с уравновешенной буфером ДЭАЭ-целлюлозой в объемных соотношениях 1:1,3 и заполняют в хроматогра" фическую колонку. Несорбированце белки отмывают двуня литрами 0,2 Н раствора аС 1 в 0,005 И верональном буфере с рН 7,9-8,1. Активную Фракцию десорбируют одним литром 0,5 И раствора ИаС 1 в том же буФере. Первые 20 мл элюата выбрасывает (не имеют лейцинаминопептидазной активности), следую" щие 320 мл, содержащие максимальноактивный Фермент, собирают и диализируют против 5 л 0,0005 М верональн 9 го ,буфера с рН 7,9-8,1 в течение 24 ч.1Во время диализа буферный раствор меняют 4 раза. С целью концентрирования в 350 мл диализированного Ферментного раствора помещают целлоФановый мешочек с 40 г...