Патенты с меткой «флавивирусов»

Номер патента: 1678835

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Злобин, Плетнев, Шаманин

МПК: C12N 15/33

Метки: выявления, зонд, идентификации, кислоты, комарами, нуклеиновой, переносимых, флавивирусов, фрагмент

...суммарную РНК мозгаВыделение суммарной РНК мозга. Суммарную РНК выделяют экстракциейгорячим кислым Фенолом (60 С, рН 5,2) в присутствии додецилсульфата натрия(5,0-1,0 мас,/объем) с последующим спиртовым осаждением, Осадок РНК собирают центрифугированием 30 мин при 6000 об/мин, Осадок растворяют в 7,54-ном Формальдегиде - 10 мМ Фосфата натрия,рН 7,0, и определяют концентрацию РНК спектрофотометрически, принимая 1 о.е, Ао=10 мкг РНК:Иммобилизация РНК на нитроцеллюлоэных Фильтрах, РНК денатурируют прогревом в 7,54-ном растворе Фор" мальдегида 15 мин при 56 С, эате;.: добавляют раствор 20 цБЯС (3,0 М натрий хлорид - 03 М натрий цйтрат рН 7,0) до концентрации 10 г ЯБС и образцы РНК наносят на нитроцеллюлозные Фильтры. Фильтры сушат при...

Номер патента: 1678837

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Злобин, Плетнев, Шаманин

МПК: C12N 15/31, C12Q 1/68

Метки: выделения, зонд, идентификации, кислот, нуклеиновых, флавивирусов, фрагмент

...6000 об/мин, Осадок растворяют вбуфере 7,5 Ф формальдегид - 1 О мй натрий фосфат, рН 7,0, и определяютконцентрацию РНК спектрофотометрически, принимая 1 о.е. Аь= 40 мкг РНК,Иммобилизация РНК на нитроцеллюлозных фильтрах. РНК денатурируютпрогревом в 7,5 ь-ном растворе формальдегида 15 мин при 56 фС, затемдобавляют раствор 20ЯЯС (3,0 Инатрий хлорид - 0,3 М натрий цитрат,рН 7,0) го концентрации 1 ОЯЯС и образцы РНК наносят на нитроцеллюлозные Фильтры. Фильтры сушат при комнатнсй температуре 15-30 мин, а затем в вакуумном сушильном шкафу 2 чпри 80 фС.Мечение олигонуклеотидов. Олигонуклеотиды метят с помощью полинуклеотидкиназы Т 4 (13) в присутствии= зР-АТР (1000 Ки/ммоль) до удельной активности 500-1000...