Способ получения сложных эфиров 2-фосфата аскорбиновой кислоты или их солей

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(56) Фридович И. Зс енсе, 1978, 201, 875.ЕР МА 0202589, кл, С 070307/62,19 Настоящее изобретение относится к фосфорнокислотным эфирам аскорбиновой кислоты или их солей и способам их получения.Заболевания сердца, мозга, почек и печени, которые часто встречаются у взрослых, главным образом, связаны с поражением и гибелью клеток и тканей вызываемых ишемией, основным заболеванием ответственным за нарушение снабжения энергией за счет гемостаза, Так например, ишемические заболевания сердца, церебральные ишемические растройства, ишемическая, нефропатия и ишемические язвы пищеварительной системы становятся основной причиной смерти, а также повышения заболеваемости в развитых странах, в ходе развития высоко-цивилизованного и стареющего общества.Разновидности активного кислорода и активных органических радикалов присутствующие в организмах включают супероксид (02), гидрокси-радикал (ОН), синглетный Я 1838320 АЗ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛОЖНЫХ ЭФИРОВ 2-ФОСФАТА АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ ИХ СОЛЕЙ (57) Сущность изобретения: продукт: сложные эфиры 2-фосфата аскорбиновой кислоты ф-лы: -С 0 0 НО Р 0 ОВ С ОН Н(НОСНСН 2 Н, где й - С 9-С 22-алкил. Реагент 1: 0-С(0)- сСссСсСснСсгссссагг г-В Х 2 Р(0)ОВ, где 2, 2, -Н, гидроксилзащитная группа, Й -гидроксилзащитная группа, ацил 1 карбоновой кислоты, карбамоил. Условия реакции; в среде растворителя в присутствии акцептора НО с последующим гидролизом и выделением, возможно, в виде соли. 3 табл,кислород( 02) и пероксидный радикал (РОО), Особенно важной является зависимость между продуцированием 02 в организме и последующим повреждением клеток или тканей разновидностями активного кислорода. Чрезмерное продуцирование 02 может оказаться особенно важным, как существенный фактор повреждения тканей 00 в результате реперфузии при ишемических Од нарушениях или за счет ишемии. СОКак известно, супероксидная дисмутаза (,А) способная эффективно и специфически устранять 02, обеспечивает эффективную защи- Ср ту тканей и улучшение нарушений связанных с ишемической реперфузией или ишемией. Такие соединения как аскорбиновая кислота, а-токоферол, цистеин и восстановленный Од глютатион способны эффективно уничтожать свободные радикалы и, как было установлено, способны предотвращать поражения тканей, которые могут вызываться свободными радикалами при некоторых патологических условиях 1), 1838320ИО О О й представляет собой алводородную группу Сэ-Сисоединений, путем реакцнием отвечающим общей фатическую угле, или солям такихи между соединеформуле: ЕО в которой В 1 представляет собой гидрокеилзащитную группу, ацил карбоновой кислоты, или карбамоил, который может быть замещенным, Е и 7., независимо друг от друга, представляют собой атомы водорода Известно также, что десфериоксамин обладающий железо-хелатирующей активностью, способен подавлять тканевые нарушения вызываемые разновидностями активного кисло. рода.Показано, что 2-0-алкиловые эфиры аскорбиновой кислоты обладают эффективностью при лечении дисфункции системы кровообращения поскольку такие соединения способны уничтожать разновидности активного кислорода.Для лечения острых заболеваний вызванных разновидностями активного кислорода необходимо разработать лекарства физико- химические свойства которых обеспечивают их растворимость в воде в результате чего их можно применять парентерально в виде препаратов для инъекций.В результате поиска таких соединений авторы обнаружили некоторые фосфорнокислые эфиры аскорбиновой кислоты обладающие такими отличными характеристиками и создали свое изобретение.или гидроксил-защитные группы, и соединением отвечающим общей формуле:05Хрр в которой В представляет собой алифатиче 10 скую углеводородную группу, С 9-С 22, а Хпредставляет собой атом галогена, послечего проводят гидролиз,Процесс ведут в среде такого растворителя, как ароматические углеводороды (на 15 пример; бензол, толуол), простые эфиры(например, диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, диоксан, тетрагидрофуран),сложные эфиры (например, атил ацетат), галогенированные углеводороды (например,20 хлористый метилен, хлороформ), диметилформамид, или их смеси, при температуре винтервале -10 - 50 С, в течение 1-10 часов.Молярное соотношение между соединением ( ) и соединением ( ) обычно составляет1,0-1,5.Гидролиэ в описанном выше способеполучения проводят в присутствии такогокислотного катализатора,какхлористоводородная кислота, серная кислота, фосфорная30 кислота, уксусная кислота, и-толуолсульфокислота, метансульфокислота и камфоросульфокислота, в среде смешанногорастворителя состоящего из воды и метанола, этанола, диоксана, тетрагидрофурана35 или 1,2-диметоксиэтана, при температуре, винтервале 10-80 С, причем реакция завершается за 1 - 2 часа.В результате таких реакций происходитсовместное удаление гидроксил-защитных40 групп й, Е и Е и остаточного галогена Х.Далее приводится подробное описаниеспособа получения соединения формулы .При использовании аскорбиновой кислоты в качестве исходного соединения, ее45 вначале превращают в ацетали или кетали.Реакцию проводят путем взаимодействияаскорбиновой кислоты с кетоном или альдегидом, таким как ацетон, бензальдегид ициклогексанон. Реакцию проводят в отсут 50 ствии растворителя или в таком растворителе, как тетрагидрофуранхлороформ,диэтиловый эфир, дихлорметан и дихлорзтан, Реакцию проводят при температуре винтервале от комнатной до 60 С в присутст 55 вии кислотного катализатора. Такие катализаторы включают хлористый ацетил, сернуюкислоту, и-толуолсульфокислоту и камфоросульфокислоту. Время реакции составляет1 - 24 часа, 18383205101520 25 30 35 40 45 50 ааннме о кровотечением в иаттинной обо. ма Полученные таким образом аиетальные или кетальные производные аскорбиновой кислоты могут быть немедленно использованы, без дополнительной очистки, для получения соединенияв результате этерификации гидроксильной группы фосфорной кислоты в положении 2, при этом гидроксильная группа в положении 3 может быть защищена перед тем, как укаэанные производные подвергают этерификации. Защиту 3-гидроксильной группы проводят по реакции с хлорметилметиловым эфиром или хлорметилэтиловым эфиром в среде такого растворителя, как диметилсульфоксид (ДМСО), гексаметилфосфорамид, и тетрагидрофуран, которые могут применяться по отдельности или в комбинации, в присутствии такого неорганического основания, как карбонат калия, карбонат натрия и гидроксид натрия, при температуре в интервале 0 - 40 С (желательно при 25 С) причем реакция завершается за 1 - 18 часов.Таким методом может быть получено соединение , в котором защищены гидроксильные группы в положениях 3-, 5- и 6,Соединениеможет быть получено по реакции спиртового производного алифатического углеводорода или ациклических углеводородных групп представленных радикалом Я, с фосфорилирующим агентом, таким как дигалогенид моноэфира фосфорной кислоты.Растворители применяемые в фосфорилировании включают ароматические углеводороды (например, бензол, толуол), простые эфиры (например, диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, диоксан, тетрагидрофуран), сложные эфиры (например, атил ацетат), гелогенированные углеводороды (например, хлористый метилен, хлороформ), диметилформамид, и их смеси, температура реакции лежит в интервале -10-50 С, а время реакции составляет 1 - 10 часов,Соединения формулыи их соли предотвращают и улучшают состояние при нарушении функций вызванном свободной кислородной группой на ишемия-реперфузионной модели сердца крысы и проявляют при этом слабую токсичность, Поэтому, соединения формулыи их соли могут применяться в качестве терапевтических, профилактических и улучшающих состояние средств при различных нарушениях функций системы кровообращения млекопитающих (например мышей, крыс, кроликов, собак, обезьян, людей), таких как ишемические сердечные нарушения (аритмия, спазм оронарных сосудов, некроз сердечной ткани, инфаркт миокарда и т.п.), нарушения свялочке мозга, нарушения связанные с ишемией церебральных тканей (например, церебральный инфаркт, слабоумие, старческое слабоумие), нарушения связанные с ишемией почек, нарушения связанные с ишемическим гепатитом, а также ишемические растройства пищеварительной системы (например, язвы пищеварительного тракта),Конкретными примерами использования таких соединений для профилактики, лечения и улучшения состояния при нарушениях в системе кровообращения могут служить антиаритмические агенты, вещества предупреждающие инфаркт миокарда, вещества предупреждающие церебральный инфаркт, агенты для предотвращения слабоумия и старческого слабочмия, различные агенты улучшающие состояние при нарушениях в системе кровообращения, например, вещества, используемые для лечения и улучшения состояния после кровотечения в паутинной оболочке мозга и улучшающие возможность прогноза при трансплантации органов, агенты улучшающие деятельность почек, а также вещества подавляющие развитие язв пищеварительных органов.Соединениянастоящего изобретения обладают низкой токсичностью и поэтому такие соединения и их соли могут без опасений применяться орально или парентерально в виде фармацевтических композиций (например, таблеток, капсул(включая мягкие капсулы и микрокапсулы), жидких препаратов, свечей, препаратов для инъекций, препаратов для закапывания в нос) полученных известными рег зе методами путем смешивания с фармацевтически применимыми носителями, эксипиентами и разбавителями,Уровень дозировок зависит от объекта применения, метода применения, симптомов и т.поднако обычная единичная дозировка в случае орального применения на млекопитающих описанных выше составляет 0,1 - 50 мг/кг веса тела, предпочтительно,0,5 - 20 мг/кг веса тела, причем ее принимают 1-3 раза в день.В случае парентерального применения, например, в виде свечей, достаточно 1 - 2 раза в день принимать 5 - 10 мг/кг соединения .В ходе получения оральных препаратов(например, таблеток) описанных выше, в рецептуру могут вводиться связующие агенты (например, гидроксипропилцеллюлоза, гид 55роксиметилп ропилметилцеллюлоза, макрогаол), дисинтеграторы (например, крахмал,кальций-карбоксиметилцеллюлоза), эксипиенты (например, лактоза, крахмал), смазывающие вещества (например, стеаратгния, тальк), и т.п, 183832040 50 В ходе получения парентеральных препаратов (например, рецептур для инъекций), в рецептуру соответствующим образом могут вводиться иэотоники (например, глюкоза, Д- сорбит, Д-маннит, хлористый кальций), антисептики (например, бензиловый спирт, хлорбутанол, метил п-гидроксибензоат, пропил п-гидроксибензоат), или буфферные агенты (например, фосфатный буффер, натрий ацетатный буффер).Примеры, Следующие ниже экспериментальные примеры и примеры предназначены для более конкретного разъяснения настоящего изобретения,Экспериментальный пример 1Подавление продуцирования перекисленных липидов в гомогенате крысинного мозга.У самцов крыс разновидности ЯО (возраст 10-12 недель) под анестезией пентабарбиталом вскрывали вены и вырезали мозговую ткань. Мозговую ткань гомогенизировали в фосфатном буффере (рН 7,4) с получением 57 ь гомогената, Указанный гомогенат инкубировали при 37 С в течение часа и полученное количество перокисленных липидов определяли согласно методу с использованием тиобарбитуровой кислоты (ТВА), Испытуемое лекарство добавляли в 5 ь гомогенат перед инкубированием до конечной концентрации 10 М, Подавление продуцирования перокисленных липидов выражали в , подавления относительно продуцирования в группе на которой применяли только растворитель (ДМСО).Полученные результаты представлены в таблице 1.Как показано в таблице 1, соединениенастоящего изобретения подавляет продуцирование перокисленных липидов, 2-фосфорнокислый эфир аскорбиновой кислоты используемый в качестве контрольного препарата не оказывает подавляющего действия,Экспериментальный пример 2Эксперимент по восстановлению очага инфаркта миокарда вызванного закупоркой - реперфузией коронарных сосудов у крыс:СпособСамцов крыс разновидности Вистар (вес 276 - 330 г) подвергали медианной торокотомии при анестезией пентабарбиталом и левую переднюю нисходящую коронарную артериальную ветвь (АО) на один час зажимали при основании и затем возобновляли кровоток. Через 30-60 минут реперфузии грудную клетку закрывали и животное приводили в сознание, Через 24 часа под анестезией снова вынимали сердце и срезали желудочек, Срезы окрашивали хлористым 5 10 15 20 25 30 трифенилтетразолием (ТТС) при 37 С в течение 15 минут и взвешивали очаг инфаркта,Испытуемое лекарство растворяли в физиологическом растворе и вводили из бедренной вены в дозировке 5 мг/кг через 30 минут после зажима АО, Контрольной группе вводили только физиологический раствор,( ) РезультатыПолученные результаты приведены в таблице 2. Соединение настоящего изобретения уменьшает очаг миокардиального инфаркта на 55 чего не наблюдается в присутствии АР,Пример 1: Динатрий 2-О-(октадецилоксифосфорил)аскорбат (соединение ).Октадециловый спирт (5,4 г) растворяли в смеси толуола (40 мл) и пиридина (8 мл) и полученный в результате раствор прикапывали к раствору оксихлорида фосфора (6 г) в толуоле (60 мл) при охлаждении системы льдом, Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, осадившиеся кристаллы удаляли фильтрацией и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в толуоле (50 мл) и раствор прикапывали при охлаждении системы льдом к раствору 5,6- 0-изопропилиденаскорбиновой кислоты (5,2 г) в смеси тетрагидрофурана (100 мл) и пиридина (4 мл), После перемешивания в течение 1 часа реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, остаток растворяли в этаноле (50 мл) к которому добавляли 1 Й хлористоводородную кислоту (50 мл) и полученную смесь перемешивали при 50 С в течение 20 минут, После охлаждения смесь концентрировали при пониженном давлении, остаток растворяли в этилацетате, промывали водой, сушили (М 9504) и концентрировали при пониженном давлении, Полученные в результате сырые кристаллы перекристаллизовывали из смеси изопропиловый эфир/атил ацетат с получением 2-0-(октадецилоксифосфорил)аскорбиновой кислоты (5 г). Этот продукт растворяли в этаноле (50 мл), к которому прикапывали метилат натрия (28 раствор в метаноле) и осадившиеся кристаллы собирали фильтрацией с получением желаемого соединения (5,1) в виде белого порошка.Т.пл,:220 С (разложение)Элементный анализ для С 24 НаОэйарР Вычислено : С 52,17; Н 7,84Найдено: С 51,92; Н 8,01ИК-спектр (КВг) см: 2910, 1733, 1596.ЯМР-спектр: внутренний стандарт; натрий 3 (триметилсилил)пропансульфонат (020)д: 4,46 (1 Н, синглет), 3,90 (ЗН, мультиплет), 3,72 (2 Н, мультиплет), 1,61 (2 Н,мультиплет), 1,27 (ЗОН, синглет), 0,88 (ЗН,мультиплет).Пример 2: динатрий 2-0(5,6-диметоксиЗ-метил,4-бензохинон-ил)децилоксифосфорил)аскорбат (соединение 2),6(10-Гидроксидецил)-2,3-диметоксиметил,4-бензохинон (1,0 г) растворяли всмеси толуола (7 мл) и пиридина (1,5 мл) и 10.полученный в результате раствор прикапывали к раствору оксихлоридфосфора (0,92 г)в толуоле (10 мл) при охлаждении системыльдом. Реакционную смесь перемешивалипри комнатной температуре в течение 3 часов, осадившиеся кристаллы удаляли фильтрацией и фильтрат концентрировали припониженном давлении. Остаток растворялив толуоле (7 мл) и полученный раствор прикапывали при охлаждении льдом к раствору 205,6-0- изопропилиден-этоксиметиласкорбиновой кислоты (0,86 г) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и пиридина (0,6 мл), Послеперемешивания в течение 1,5 часа реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, остаток растворяли вэтаноле (10 мл); к которому добавляли 1 йхлористоводородную кислоту (10 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 20минут при 50 С,.После охлаждения смесь 30концентрировали при пониженном давлении остаток растворяли в этилацетате, промывали солевым раствором, сушили надбезводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток 35растворяли в этаноле (20 мл) к которомуприкапывали раствор гидроксида натрия вэтаноле и выпавшие кристаллы собиралифильтрацией и растворяли в воде (20 мл),Нерастворенное вещество удаляли фильтрацией, фильтрат доводили до рН 2 с помощью 1 Й хлористоводородной кислоты,экстрагировали этилацетатом, промывалисолевым раствором, сушили над безводнымсульфатом магния и концентрировали при 45пониженном давлении. Остаток снова растворяли в этаноле (20 мл), к которому прикапывали раствор гидроксида натрия вэтаноле при перемешивании в результатечего устанавливали рН равным 5, Выпавшие 50кристаллы собирали фильтрацией с получением порошкообразных кристаллов (70 мг),Т,пл.: 185 С (разложение)ЯМР-спектр (д): 1,28 (16 Н, мультиплет),1,61 (2 Н, мультиплет), 1,99 (ЗН, синглет), 2,44 55Пример 3; динатрий 2-0-(этилфосфорил)-6-0-стеароиласкорбат(соединение 3).Этил дихлорфосфат (0,81 г) растворяли в толуоле (20 мл) и полученный в результате раствор по каплям добавляли к раствору 6-0-стеароиласкорбиновой кислоты (2,65 г) в смеси тетрагидроксифурана (60 мл) и пири- дина (2 мл) при охлаждении системы льдом. После перемешивания в течение 1,5 часа добавляли1 хлористоводородную кислоту (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом, промывали водой, сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении, Остаток растворяли в этаноле (30 мл), к которому прикапывали раствор гидроксида натрия в метаноле, и выпашие кристаллы, собирали фильтрацией с получением порошкообразных кристаллов (2,1 г). Т,пл.:165 С (разложение) ЯМР-спектр (д); 0,88 (ЗН, мультиплет), 1,25 (31 Н, мультиплет), 1,61 (2 Н, мультиплет), 2,41 (2 Н, синглет), 4,00 (26, мультиплет), 4,24 (ЗН, мультиплет), 4,51 (1 Н, широкая).Пример 4; Соединения перечисленные в таблице 3 получали аналогично описанному в примерах 1 - 3,Растворимость в воде полученных соединений составляет 10 мг/мл, Формула изобретения Способ получения сложных эфиров 2- фосфата аскорбиновой кислоты общей формулы О-Р-ОКОН где В - неразветвленный Сз-С 22-алкил, или их солей, о т л и ч а ю щ и й с я тем, чт соединение общей формулы1838320 12 где Й - имеет указанное значение; Х - галоген,с последующим гидролизом полученногопродукта и его выделением или переводомв соответствующую соль. Таблица 1-фосфорнокислый эфир аскорбиновой кислоты бли" Значения пре АР: 2-фосфорн ставляют собой +ЗЕМ.ислый эфир аскорбиновой кисло аблица Нолекулярная Ф-латемпература разложения)Р соейиия (пример тиий анализ (СН)5 ЯНР и/ни нето а ц на о анчислено Сан Оррназ 0,5 Нз220 иСантНСИ Э(СН з) т(С 18:2 сиа нр рНк 1,2 и180(зо, 5 7,32)7 6" где й - гидроксилзащитная группа, ацил1карбоновой кислоты, карбамоил, который может быть замещен;Е,2 - независимо друг от друга Н или гидроксилзащитная группа,подвергают взаимодействию с соединением общей формулы ОХ ич -о-Я Г 1,20(ЗНт7 рц) 3,74(2 Н,н)4,04(ЗН,н), 4,50Й, широкая)088(ЗН,н), 1,31(16 Н,н), 1,65(1) Свае О ГНв220 НСН (СН ) н - нупатиплет, т - триплет, гц - герц, и - нетилфеиил - сииглет:, д - дублет,фенил Составитель В, НазинаТехред М.Моргентал Корректор М. Максимишинец Редактор Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 2901 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5