Полимерный гидрогель для обнаружения фосфорорганических соединений в растворе

СОЮЗ СОВЕТСКИХсО 1 иАлистическихРЕСПУГПИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и Институт В.Топчиева Л.И.Валуев Ковалентная в матрицах полимеров, - атериалы Ч 1 льнюс, 1988,е 11 Ь го и п Е., горегОез о 1 сЬ То зерЬагозе.9, чо 1. 191, М 2 ЧЧ 1 п 1 ег А ИпезТегазез - ВосЬегп , р, 478-481 ено ение чувстению к фос(21) 4663297/05(56) Андрианов А.К., Плате Н,А,иммобилиэация холинэстеразвысоконабухающих сшитых соИнженерная энзимология; МВсесоюзного симпозиума, Вич,1, с.56.Ахеп й НРгерага 11 оп апб рсочаепт 1 у ЬоопбВормуз. Аста, 196 Изобретение относится к химии полимеров и прикладной энзимологии, в частности к композициям, используемым для обнаружения в растворах фосфорорганич ских соединений, и может быть примене в различных аналитических приборах и устройствах.Цель изобретения - повышвительности гидрогеля по отношфорорганическим соединениям,П р и м е р 1. 15 мг бутирилхолинэстеразы сыворотки крови лощади растворяют в 15 мл 0,2 М бикарбонатного буфера (рН 8,2), добавляют при перемешивании 2 мг хлорангидрида акриловой кислоты и проводят реакцию при 0 С в течение 1 ч. Число введенных в молекулу холинэстеразы нена.БЦ 1705318 А 1(54) ПОЛИМЕРНЫЙ ГИДРОГЕЛЬ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ В РАСТВОРЕ (57) Изобретение относится к химии полимеров и прикладной энэимологии и может быть использовано в различных аналитических приборах и устройствах. Изобретение позволяет создать датчик, обладающий пониженным (в 3,3 - 3,7 раза) пределом обнаружения фосфорорганических соединений в растворе, Это достигается полученивм полимерного гидрогеля, включающего сшитый гидрофильный сополимер, содержащий ковалентно связанную с ним с помощью -С(О)- ИН-групп холинэстеразу, и воду при следующем соотношении компонентов, мас. 7 ь: сшитый сополимер 3,1-20.4: вода до 3 100. 1 табл. сыщенных углерод. углеродных связеи, рассчитанных по уменьшению числа титруемых тринитробензолсульфокислотой аминогрупп белка, равно 7. К полученному раствору добавляют при 0 С смесь мономеров, состоящую из 1,21 г акриламида, 0,14 г М,йметиленбисакриламида и 1,5 мл воды, а также 0,01 г 1 ч,1 ч Л,й-тетраметилэтилендиамина и продувают аргоном 15 мин. После этого добавляют 0,01 г персульфата аммония и смесь полимеризуют 1 ч при 0 С, Образовавшийся гель измельчают на нейлоновых ситах с диаметром 0,5 мм, промывают водой до полного экстрагирования несвязанной холинэстеразы и оставляют в бидистилляте для равновесного набухания, Содержание холинэстеразы в полимернойкомпозиции (гель), найденное по разности количество введенного в реакцию и экстрагированного из геля белка, составляет 0,1 мас.7 Содержание сшитого сополимера, определенное гравиметрически после высушивания образца до постоянной массы и учета содержания холинэстеразы, составляет 9 мас,7Для определения предела обнаружения фосфорорганического соединения навеску гранулы геля (0,25 г) инкубируют с растворами различной концентрации (10 - 10 г/л)-4 0,0-диметил-2,2-дихлорвинилфосфата (ДДВФ) 2,5 мин, после чего определяют ферментативную активность геля (в 7 ь от исходной), Активность датчика по а -нафтилацетату измеряют спектрофотометрически при 480 нм по реакции с и-нитрофенилдиаэонитборфторидом (прочным красным ГГ). Предел обнаружения ДДВФ, регистрируемый по снижению активности датчика на 107 ь, составляет 810 г/л,Данные по примерам 1 - 9 приведены в таблице,П р и м е р 10 (известный). 20 мг эритроцитарной ацетилхолинэстераэы крови лошади растворяют в 20 мл 0,1 М фосфатного3,1 - 20,4Остальное до 100. буфера (рН 1,8), добавляют при перемешивании 7 мг акролеина и проводят реакцию при 4 С в течение 5 ч, Число введенных в молекулу фермента ненасыщенных связей 5 равно 2. В остальном процесс аналогиченпримеру 1.Данные по примерам 1-10 приведены втаблице.Формула изобретения 10 Полимерный гидрогель для обнаружения фосфорорганических соединений в растворе, включающий содержащий холинэстеразу полимер и воду, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что. с целью повышения чувстви тельности гидрогеля по отношению к фосфорорганическим соединениям, в качестве содержащего холинэстеразу полимера, он включает сшитый гидрофильный сополимер, содержащий 0,5-19 мас, холинэсте разы, связанной с ним с помощью-С-МНю Огрупп, при следующем соотношении компонентов, мас, ;Содержащий25 холинэстераэуполимерВода1 с 1 1 11 с л1 Васс сч а 40Ю м Эв осч со в т зо о оо5з 6 з, м со счо О - лл со о 1 л со аф о ч0 Л Ч0 фо ам м счч ч л л о л м о а о м сч о оа оосо о о сч ч л о о Ф ае о а оо о о с о 1Ес1 з а ос о о о о о л о о мо о о со м о о а л а м оСЧ О и Ч, Й Ф1 О О сл1 10ЦО О О 0 О О1 1 ааВ О л О л1 Ф 1 З 11О--о м о со О1 1м л с 1 С 1 1 л 10-0. сче - --1 С 1 1 1йЗй1ОО 1 З МЧ СЧц11 Г -1азз аа л о о соц- воо а 0 оО Ззт 1 О СОоЭ 1 1СС С ОЧ О М11 1е 1101 З ЭФ 11 ХЗС1ф а1 СЦочеоава1 з ЯЙ 1 0- - сч сч оа о в со1 1. Ь 1 1 - м а о оо - о о о0О 0 0 0 0м мс Йсс Ац е зАззв О 1 Ф а 1зас з о а ооо вХ Ц 1 о о о о о1 1ус1лмамсч0 О М О1 3 1ет кхз"0 01 Л 000011з с 1цз 111сзаь Ф хосз ох к а м сч о1 111 1 11 З1 1110х1 1о 111 1. 1 01цхх х х л71 ЛЛО3 1 й ас ч оо а м о о1 0 ОСО1 3133м мвйаа1111111111111111111