Способ оценки функционального состояния лейкоцитов

011,6500 О 5 Саюе Советских Социалистических Республик(45) Дата опубликования описания 28.02,79 1) М. Кл.з6 01 Я 33/16 Госудерствеинык камит СССР, Комиссаро ый московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им, И. М. Сеченова(71) Заявитель И ФУНКЦИОНАЛЪНОГО СОСТОЯЛ ЕЙ КОЦИТОВ СОБ О(54) термоста Изобретение относится к медицине, а именно гематологии,Известен способ оценки функционального состояния лейкоцитов путем инкубирования клеток крови, добавления препара та - декортилена и цитохимического определения ферментов в этих клетках.Однако известный способ является трудоемким.Целью изобретения является упрощение 10 способа.Эта цель достигается тем, что ин 1 кубирование лейкоцитарной взвеси производят при 37 - 38 С в течение 2 - 2,5 час.Способ осуществляют следующим обра зом.Венозную кровь соединяют в приборах с 3,8%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 7: 1. Цитрат натрия должен быть свежеприготовленным, не более 1,5 - 20 ,2-х недельной давности.Пробирку помещают в т при 37 - 38 С на 2,0 - 2,5 час.Затем после оседания эритроцитов отбирают лейкоцитарную взвесь и разливают в 25 лунки из органического стекла.После этого в лунки вводят растворы изучаемых веществ (фармакологические препараты), химические соединения, сыворотки, биологические жидкости в тех кон,центрациях или соотношениях, которые необходимы.Блок лунок прикрывают плотно пригнанным стеклом, края которого предварительно смачивают водой с целью предотвращения испарения жидкостей в процессе инкубации и изменения концентрации изучаемых веществ.Полученные таким образом системы взаимодействия помещают в тармостат при 37 - 38 С и проводят инкубацию, во время которой периодически из лунок отбирают пробы для определения обычными цитохимическими методами уровня активности интересующих ферментов.Пример 1. На фиг. 1 показана динамика изменения уровня активности дегидрогеназ в лимфоцитах больной С. Д. с диагнозом системная красная волчанка под влиянием декортилена в концентрации 6 10- мг/мл, что соответствует суточной дозе 400 кг данного препарата, рассчитанной по весу, Кривая 1 - сукцинатдегидрогеназа (СДГ); кривая 2 - митохондриальная альфа-глицерофосфатдегидропеназа (м-альфа-гфДГ),П р и м е р 2, На фиг. 2 показана динамика изменения уровня активности дегидрогеназ в лимфоцитах больной С. Д. с диагнозом системная красная волчанка под влиянием декортилена в концентрации40 45 6 10 -мг/мл, что соответствует суточной дозе 40 мг данного препарата, рассчитанной по весу (кривая 1-СДГ; кривая 2 - м- альфачгфДГ) .П р и м ер 3. На фиг. 3 показана динамика изменения уровня активности дегидрогеназ в лимфоцитах больной С, Д. с диагнозом системная красная волчанка под влиянием декортилена в концентрации 6 10- мг/мл, что соответствует суточной дозе 4 мг данного препарата, рассчитанной по весу (кривая 1 - СДГ, кривая 2 - м-альфа-гфДГ).Пример 4. На фиг. 4 показана динамика изменения уровня активности сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах больной С. Д, с диагнозом системная красная волчанка под влиянием,гидрокортизона в различных концентрациях: иривая 1 - концентрация пидрокортизона 4,3 10 -мг/мл, что соответствует суточной дозе 400 мг данного препарата, рассчитанной по весу; кривая 2 - концентрация гидрокортизона 4,3 10-" мг/мл, что соответствует суточной дозе 40 мг данного препарата, рассчитанной по ;весу; кривая 3 - концентрация гидрокортизона 4,3 10- мг/мл, что соответствует суточной дозе 4 мг данного препарата, рассчитанной по весу.Пример 5, На фиг. 5 показана динамика изменения уровня активности дегидрогеназ в лимфоцитах и миелопероксиддзы в нейтрофилах больной К, М. с диагнозом дизовариальная кардиопатия под влиянием хлористого калия в концентрации 7 10 в мг/мл, что соответствует одноразовой дозе 5 к данного препарата, рассчитанной по весу (кривая 1 - СДГ; кривая 2 - м-альфа-гфДГ; кривая 3 - миелопероксидаза (МП).Пример 6. На фиг, 6 показана динамика изменения активности дегидрогеназ в лимфоцитах и миелопероксидазы в нейтрофилах больной Х, П. с диагнозом дизовариальная кардиопатия под влиянием обзидана в концентрации 1,6 10 в мг/мл, что соответствует одноразовой дозе 80 мг дан 5 10 15 20 25 ЗО 35 ного препарата, рассчитанной по объему крови (кривая 1 - СДГ; кривая 2 - м-альфа-гфДГ; кривая 3 - МП).П р и м ер 7. На фиг. 7 показана динамика изменения уровня активности дегидрогеназ в лимфоцитах и миелопероксидазы нейтрофилах больной Х. П. с диагнозом дизовариальная кардиопатия под влиянием обзидина в концентрации 1,110 -мг/мл, что соответствует одноразовой дозе 20 мг данного препарата, рассчитанной по весу (кривая 1 - СДГ; кривая 2 - м-альфа- гфДГ; кривая 3 - МП).При воздействии на лейкоциты крови различными фармакологическими препаратами, а именно кортикосибероидами, происходит динамическое изменение уровней активности ферментов. Для лейкоцитов, полученных от больных с различными заболеваниями, характерна своя индивидуальная картина динамического изменения активности ферментов, Динамика изменения активности ферментов зависит как от структуры воздействующего препарата, так и от его концентрации, которые соответствуют дозировкам препарата, рассчитанным либо по весу, либо по объему крови.Предлагаемый способ позволяет уточнить механизмы действия любого инвертирующего препарата на различные звенья жизнеобеспечения лейкоцитов, Он позволяет конкретно, для каждого больного, подобрать более рациональную схему терапии, а также обнаружить в сыворотке те вещества, которые вызывают развитие того или иного патологического процесса. Формула изобретения Способ оценки функционального состояния лейкоцитов путем инкубирования клеток крови, добавления препарата - декортилена и цитохимического определения ферментов в этих клетках, о т л и ч а ю щ и йся тем, что, с целью упрощения способа, инкубирование лейкоцитарной взвеси производят при 37 - 38 С в течение 2 - 2,5 ч,у 100 700 уоао юоо уво у воо уюо йо Ууа650005 цоо ааааа аоо аа 5 5 ааа зоа 2 оо Врия /пии/ актор Е. Дайч Корректоры: Р. Берков н И. Позняковск аказ Я 4 НПИзд.188 Тираж 108 Я Подписноесударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 11303 б, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/б ипография, пр. Сапунова. 3 го ф н. Составитель С, Малютинехред А, Каммюникова