Способ получения лиофилизата

)я А 61 К 9/1 НТНОЕ СУДА Р СТВЕ ННОЕ ДОМСТВО СССР СПАТЕНТ СССР)ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯАТЕНТУ ИЗАико-фаркасается осфамикачества ный или мида, соида, с 0,1- ют при -ан 3 1300,ится к химико-фарленности и касается илизата ифосфамиИзобретение относ ацевтической промыш пособа получения лиоф а.Целью изобретени ие качества целевогоХимическое назван3-(2 я является повпродукта.ие активного веще-хлоротил)-2-(хлорзН,3,2-оксазафосфо тва ифосфамида -иламино)тетрагидр рин-оксид формул 0-1 -СН -Огй - СНгСН,г0 - СН2 1-Сй -СН -ИН 1) 4203570/14 2) 29.10.87 6) 23.08,93. Бюл. М 31 1) Р 3637089.4 2) 31.10.86 3) СЕ 1) Аста Фармв АГ(ОЕ) 2) Дитер Зауербир, Уве-Петер тто Исаак (ОЕ) 6) Заявка Рй М 2170893, кл, А 973. Ифосфамид, как и циклофосфамид, отосится к химической группе оксаэафосфоинов и терапевтически применяется для , ечения онкологических заболеваний.Ифосфамид представляет собой белый ристаллический порошок с температурой лавления 48-51 С и с сильными гигроскоическими свойствами. Ниже температуры лавления ифосфамид начинает спекаться, оэтому хранить его необходимо по возожности при низких температурах (при омнатной температуре и ниже). Кроме того,(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИОФ(57) Изобретение относится к химмацевтической промышленности испособа получения лиофилиэата и фда. Цель изобретения - повышениецелевого продукта. Смешивают водводно-зтанольный раствор ифосфадержащего 1-13 мас.0 ифосфам17 мас.ч. гексида и эаморажива700 С, 2 табл,по возможности необходимо избегать контакт с влажным воздухом.Ифосфамид растворяется, в воде приблизительно до 10 мас,6, однако в водном растворе он лишь ограниченно стоек: не более 3-4 ч при 20 - 22 С или 36 ч при 4 - 60 С,Ифосфамид применяют исключительно парентерально. Бутылки с препаратом для иньекции содержат 200 - 5000 мг ифосфамида в виде стерильного продукта кристаллизации, который перед аппликацией растворяют в воде для инъекционных целей, так что исключается превышение 40 концентрации. Этот раствор пригоден для внутривенной иньекции. Для быстрого внутривенного введения раствора ифосфамид разбавляют в 500 мл.раствора Рингера или в аналогичных жидкостях. предназначенных для внутривенного введения. Продолжительность вливания составляет приблизительно 30 мин, возможно 1-2 ч, При 24-часовом введении раствор ифосфамида разбавляют, например, в целом в 3 л 570-ного раствора поваренной соли в декстрозе.Получение и переработка ифосфамида связаны с целым рядом проблем, При получении стерильно кристаллиэуемого ифос 183 б 079фамида образуется продукт с переменными бутылок с ифосфзмидом для внутривенногофизическими свойствами. Из-за различной ведения, необходимо даже оставлять рассыпучести сильно нарушается, в частности, твор на несколько минут. Тем самым приточность дозировки при расфасовке. менение этого препарата в клиникеКроме того. переработка ифосфамида 5 затрудняется,затруднена из-за его гигроскопичности и 8 противоположность стерильномунизкой температуры плавления. При дли- продукту кристаллизации лиофилиэаттельном хранении стерильный продукт кри- ифосфамида и после хранения в течениесталлизации спекается и снижается нескольких лет обнаруживает еще оптискорость его растворения. Начало спекания "0 мальные свойства растворения, Кроме того,ифосфамида влечет за собой также сни- ифосфамид в сухой расфасовке (это значит,жение прозрачности и водородного пока- чистый продукт кристаллизации ифосфэмизателя раствора при одновременном да) является более чувствительным к влажокрашивании и в желтый цвет, в этом случае ности воздуха, чем лиофилизат. Так,терапевтическое применение раствора стэ- "5 например, ифосфамид в сухой расфасовкеновится вообще невозможным. разжижается уже при относительной влажПоэтому задачей изобретения является ности воздуха ниже 75, в то время какполучение ифосфзмида с улучшенными лиофилиэат даже при 100 относительнойсвойствами, например с улучшенной устой- влажности воздуха хотя и становится влажчивостью, способностью сохранять свои 20 ным, однако его внешняя форма сохраняетсвойства при хранении, с хорошими дозиру- ся,емостью и растворимостью, который легче Кроме того, при расфасовке стерильноприменять и который пригоден, в частности, го продукта кристаллизации опасность пардля приготовления растворов для внутри- тикулярного или микробного загрязнениявенного ведения, 25 для фосфамида существует в большей стеНеожиданно найдено, что вышеописан- пени, чем для лиофилизата ифосфамида,ные недостатки и трудности при примене- Напротив, при получении лиофилизатании и хранении ифосфамида можно ифосфамида стерильная фильтрация расустранить, используя определенный лиофи- твора осуществляется только непосредстлизат ифосфамида. В частности, неожидан венно перед расфасовкой в бутылки. Темным оказзлось то, что предложенный в самым в сравнении с рзСфасовкой стеизобретении лиофилизат ифосфамида рильного продукта кристаллизации обесобладает значительно большей термо- печивается значительно большаястойкостью, чем ранее применявшийся микробиологическая безопасность, Партиифосфамид в сухой расфасовке. 35 кулярных загрязнений, которые при расфаПри хранении ифосфамида в сухой рас- совке сухого препарата иногда дают поводфасовке при 40 С в течение 1 месяца проис- для предъявления претензий, можно избеходит его потемнение, через 2 месяца жать, осуществляя фильтрацию раствора схранения содержимое бутылки спекается и большей надежностью.окрашивается в желтый цвет, При темпера Однако лиофилиэация ифосфамидатуре хранения 55 ОС ифосфамид в сухой рас- приводит не только к улучшению продукфасовке плавится уже в течение 4 дней, та, но и к большей экономичности при полНапример, в получаемом согласно изо- учении продукта, чем при получениибретениюлиофилизате ифосфамида при стерильного продукта кристаллизации, Усуказанных условиях хранения не наблюда тановлено, что только предложенный споется изменения цвета и консистенции соб при применении гексита. например,ифосфамида. Скорость растворения лио- маннита, дате улучшенный лиофилизатфилизата ифосфамида в сравнении с ифос- ифосфамида, Например, при добавлениифамидом в сухой расфасовке также поваренной соли, которую применяют призначительно выше. В то время как лиофили сухой расфасовке других оксазафосфоризат при подаче растворителя растворяется нов, лиофилизат получить не смогли.сразу же назависимо от продолжитель- Согласно изобретению, например, водности его хранения, бутылки с сухим ный раствор ифосфзмида, содержащий 1 ифосфамидом, предназначенным для 13 мас.оь ифосфамида, а также 0,1-17 мзс,чвнутривенного введения, после впрыскива гексита относительно 1 мас.ч. ифосфамида,ния растворителя необходимо сильно сушат вымораживанием. Предпочтительновстряхивать в течение 0,5-3 мин, При этом, этот водный раствор содержит 5-12 масесли растворение сразу же осуществляется особенно 8 - 10 мас, ифосфэмида. 8 местоне до конца, а это случается при примене- чистого водного раствора можно также при. нии продолжительное время хранившихся менять этаноловодные растворы ифосфами 1836079а (содержание этанола в таком растворе оставляет до 450 от общей массы, наприер 1 - 20 этанола). В таких случаях по озможности сначала этанол удаляют в ваууме, прежде чем сублимировать оставийся лед. Условиями для удаления этанола вляются, например, давление 5 х 10 мбар, овышение температуры с -25 до -5 С в ечение 10 ч, затем повышение температуы до 220 С. В частности, эти условия завият также от высоты слоя просушиваемого атериала в бутылках, и их соответственно ожно изменять,Количество гексита в этом водном или одно-этаноловом растворе составляет е елом 1-17, предпочтительно 3-12, особено 5-9 мас,0. Если количество гексита отосится к 1 мас,ч, ифосфамида, то тогда оличестео гексита составляет 0,1-17, предочтительно 0,1-2,5, особенно 0,6-0,8 ас,ч. гексита на 1 мас.ч. ифосфамида. В ачестве гексита применяют; маннит, глюит (сорбит, например Ь -сорбит), дульцит, ллит, альтрит (например, О- и :альтрит), дит(например, О- и 1:идит), их оптически ктивныеформы(Ь- или .-формы), а также оответствующие рацематы. Применяют, в астности маннит, например О-маннит, 1- аннит, О.-маннит, сорбит и/или дульцит, з них предпочтительнее О-маннит, В качетве гексита можно применять также смеси ышеназванных гекситое, например смеси аннита и сорбита и/или дульцита. Так как ульцит менее растворим е воде, чем, наример, маннит, то содержание дульцита е одном растворе не должно превышать, апример, 3 мас Например,маннит и орбит можно смешивать в любых соотноениях.Наряду с гекситом можно добавять также и другие применяемые фарацевтические вспомогательные ещестеа, например глицин, лактозу, оливинилпирролидон, глюкозу, фруктозу, льбумин, и эквивалентные вещества, обраующие скелет, Общее количество таких вееств е растворе, применяемом для сушки ыморажиеанием, составляет, например,О,9 мас,ч, например 0;1-7 мас.ч. на 1 мас.ч. фосфамида. В готовом лиофилизате общее оличество таких вспомогательных веществ ожет составлять до 16,9 мас,ч на 1 мас.ч. ексита. В частности, количество таких . спомогательных веществ зависит от имеюегося количества гексита, однако общее оличество гексита и других таких вспомоательных веществ е готовом лиофилизате олжно составлять не более 17 мас.ч. на 1 , ас,ч. ифосфамида. Если е лиофилизате со 20 Полученный таким образом раствор25 ифосфамида стерилизуют, затем фильтруют 30 в случае небходимости, а также и после розлива е емкости можно, например, еще хранить до 36 ч, но при более низких температурах. например от -5 до+10 С, предпоч тительно при 4 - 6 С, прежде чем начнетсясушка вымораживанием.Полученный водный раствор ифосфами 45 50 55 5 10 15 держится только 0,1 мас,ч. гексита, то он может содержать до 16,9 мас.ч, других вспомогательных веществ, а если, например, в лиофилизате содержится 8,5 мас.ч. гексита, то количество других вспомогательных веществ может составлять, например, до 8.5 мас.ч. на 1 мас.ч. ифосфамида.Для получения раствора, применяемого для сушки вымораживанием, берут приблизительно 70 - 83%, предпочтительно 80 требуемого количества воды или этого же количества этанольной воды и при перемешивании или при постоянном движении последовательно растворяют соответствующее количество ифосфамида и маннита (это значит, сначала растворяют ифосфамид, а затем маннит). После полного растворения дополняютдо конечного объема и измеряют еодородный показатель, Водородный показатель этого раствора, например, после разбавления должен находиться в интервале между 4 и 7, Предпочтительно используют 4-ный раствор ифосфамида через применяемые для этих целей, непроницаемые для микроорганизмов фильтры, а затем разливают е соответствующие емкости, предназначенные для препаратов внутриеенного введения. Время хранения до розлива е емкости, включая время приготовления раствора, не должно превышать 3-4 ч при комнатной температуре(18-22 С). Если же последющую сушку вымораживанием нельзя осуществить сразу, то такой раствор да разливают е емкости, предназначенные для препаратов внутривенного введения, например в ампулы или другие стеклянные сосуды, и раствор сушат вымораживанием.Для стерилизации применяют обычные, непроницаемые для микроорганизмов фильтры, например обычные бактериальные фильтры с размером пор е 0,2 мкм. Применяемые стеклянные сосуды или ампулы стерилизуют предварительно обычнымспособом.Применяемый гексит (предпочтительноманнит, особенно О-маннит) должен отеечеть требованиям Британской фармакопеи за 1980 г.Применяемый гексит по воэможности не должен быть пирогенным (пирогенными являются вызывающие повышение темпе 1836079рэтурь тела зндотоксинь, образуемые бактериями). Сказанное относится и к применяемому ифосфамиду. удаление или разрушение пирогенов осуществляется Обычным способом (например, раствор действующего вашества перед стерилизацией ОбрэбэтываОт активировэнЫм углем). Применяемая Для инъекций Вода должна быть также стерильной и непирогенной, должна отвечать требованиям Фармакопеи ФРГ, 9-е издание зэ 1986 г, Б качестве сосудов для инъекций целесообразно применять сосуды из трубчатого стекла или из промышленного стекла И 1-го гидролитического класса(например, 10 й, 30 Б и 50 Н)(см, ФармакопеО ФРГ, 9-е издание за 1986 гс, 161-164 и Промышленный стандарт ФРГ М;. 58 366, ч, 1, 5),Кроме того, сосуды для иньекционных растворов, э также вспомогательные приспособления, например резиновые пробки и отбортовываемые колпачки, долкнь отвечать гребоаэниям промышленных стандартов ФРГ К. 58366, ч,2,3, э также г 58 367, ч, 1.Количество растворов ифосфамида, предусмотренных для диофилизации, в соответствующих погребностям емкостях (ампулах) или прочих емкостях, предназначенных для препаратов Внутривенного Вве,ценил, нэ одну емкость мокет составлять, например, 1-500 мл, предпочтительно 1- 250 мл, о.,обенно 2-50 мл. Каждая емкость долкна иметь такие размеры, чтобы содеркащийая В ней лиофилизат позже можно было растворить в достаточно большом количестве жидкости. Поэтому в целом они должны иметь такой объем, который был бы достаточньи для приготовления готового к употреблению раствора, который занимает 2-5-предпочтительно 2-4, особенно 2-5- кратный объем Относительно Обьеиэ первоначально находившегося в емкости раствора лиофилизата.Как было указано, предпочтительно каждую ампулу иги каждый стеклянный сосуд заполяют разовой дозой ифосфамида, при этом количество ифосфдмидэ на Один стеклянный сосуд составляет например, от 100 мг до 10 г, предпочтительно 200 мг - 5 г. Затем раствор В этом стеклянном сосуде или в ампуле сушат вымораживанием обычньм способом. Однако большие количества ифосфамида, т,е, значительно больший обьем раствора ифосфамида, можно также лиофилизировать в соответсгвенно значительно большем сосуде, а затем полученный лиофилизат распределять или расфасовывать на соответственно меньшие дозы, Для осуществления самой лиофилизации ампу 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 лы или стеклянные сосуды или прочие сосуды, содержащие раствор ифосфамида в гексите, устанавливают непосредственно на установочную плиту или в подставках для посуды на установочную плиту в камере для сушки вымораживанием, Закрыв камеру, ампулы или сосуды охлаждают до температуры ниже ОС, например до температуры в промежутке от -70 до 0, предпочтительно от -50 С до -30 С, особенно от -45 С до -35 С, Как только растворы полностью замерзнут, постепенно вакуумируют камеру для сушки вымораживанием и начинают сушку, Здесь сначала удаляется неадсорбированный растворитель. Осуществляется это удаление при температурах междуи+40 С, предпочтительно между 0 С и 30" С, особенно между 20 С и 30 С, при этом давление устанавливают в промежутке от 10 з до б мбар, предпочтительно от 10 до 2 мбар, особенно от 10 до 1 мбар, Это касается температур установочных плит. При этом управление процессом осуществляют таким образом, что подводимое через установочные плиты тепло полностью расходуется на сублимацию, а температура замерзшего ифосфамидсодержащего раствора всегда остается ниже его температуры звтектики. Необходимую каждый раз температуру установочных плит можно, например, программировать с помощью программных дисков или электронных вычислительных машин. Продолжительность удаления этого неадсорбировэнного растворителя зависит от размеров отдельных емкостей и составляет, например, 4- 10 ч при температуре плиты 25 С и давлении 0,8 мбэр,Г 1 олное удаление неадсорбированной воды осуществляется следующим образом. Неадсорбированная вода существует в виде льда, Путем измерения так называемого поВышения давления определяют, есть ли еще такая вода в лиофилизате. Для этого закрыВают клапан между сушильной камерой и полостью конденсатора. к которому подсоединен вакуумный насос, В этом случае имеющийся лед быстро бы сублимировал и вызвал бы повышение давления в сушильной камере, При замере повышения давле-. ния необходимо знать, что давление в камере через 15 мин при исходной величине, например, 0,8 мбар может повыситься не более, чем на 1 мбар, Большее повышение давления означало бы. что основная сушка еще не закончена.Имеющийся еще остаточный, адсорби. рованный растворитель удаляют затем дополнительно сушкой, Продолжительность последней составляет, например, 3-12 ч при-З 4Процесс лиофилиэации считается законченным, если остаточная влажность(определяется по К.фишеру) ниже 10(предпочтительно ниже 0,5,В частности, дополнительная сушкаосуществляется для удаления адсорбировэн ной воды и ри темпе ра турах 0 - 40 С.,предпочтительно при 10-35 С, особеннопри 20 - 30 С, и давлении 10 - 5 х 10 мбар,при этом продолжительность дополнительной сушки соСтавляет, например, 2-36 ч,предпочтительно 6 - 24 ч, особенно 3 - 12 ч,По окончании сушки вымораживаниемсосуды закрывают, Предложенный способна всех стадиях осуществляют в стерильныхусловиях,Затем, например после создания в сублимационной камере нормального давления путем подачи сухого стерильноговоздуха или азота, закрывают бутылки спрепаратом для инъекций специальнымисублимационными резиновыми пробками.которые смазывают силиконовым масломдля устранения истирания и с целью улучшения скольжения.П р и м е р. Для сушки вымораживаниемприменяют следующий раствор, мг:Ифосфамид 100О-Маннит 70Вода для инъекций дист.в. 1 мл,Плотность этого раствора составляет1,0563 гlмл при 16 С и 1,0527 г/мл при20 С. Количество, применяемого растворакаждый раз зависит от наличия сублимаци онного объема и от обьема сосудов для эа полнения раствором.Приготовление раствора, Берут при близительно 80 от взятого для раствораколичества воды и при постоянном перемешивании поочередно растворяют в воде соответствующее количество ифосфамида иманнита. После полного растворения доли вают до конечного обьема и измеряют водо, родный показатель. Готовый раствор стерилизуют фильтро ванием через применяемые для этих целей, 1 непроницаемые для микроорганизмовфильтры (например сорториус ЯМ 11107 или ЯМ 11307 с размером пор 0,2 мкм, Паллфильтр йВ (размер пор 0.2 мкм) и. не допу-скэя партикулярного и бактериального загрязнения, хранят до розлива, Хранение при комнатной температуре (20 - 22 С) не должно превышать 3-4 ч, включая время на приготовление раствора. Если сушка вымораживанием не осуществляется немедленно после приготовления раствора. то раствор можно еще хранить приблизительно 36 ч при 4-6 С,Для осуществления стерильного фильтрования с целью защиты стерильных фильтров можно дополнительно применять обычные фильтры для предварительнойочистки (например, сарториус ЯМ 13400 или Палл .РА),Очистка бутылок для инъекционных растворов, Бутылки для инъекционных растворов промывает в горячей и холодной деминерализованной воде и продувают воздухом. Все промывные воды фильтрованием освобождают от грубодисперсных примесей, Во избежание повторного загрязнения частицами иэ воздуха бутылки сушат и стерилизуют с помощью горячего воздуха (прерывно при температуре 180 С, 2 ч).Очистка резиновых пробок, которыми закрывают бутылки для инъекционных растворов, осуществляется с применением деминерализированной воды и, например, средства для очистки. состоящего из неионогенных поверхностно-активных веществ и эфиров ортофосфорной кислоты в водном растворе,Очищенные пробки промывают деминералиэированной водой или профильтрованной деминерализированной водой, освобождая их от волоков и шишек, Затем очищенные таким способом пробки стерилизуют с помощью пара. Очищенные и стерилизованные бутылки для иньекционных растворов асептически заполняют теперь раствором ифосфамида и снабжают резиновыми пробками (см. табл.1).Заполняемые объемы не должны превышать определенных пределов (см. табл. 2),Заполняемыми объемами необходимо осуществлять статистический надзор, при этом не реже, чем через каждые 30 мин, необходимо измерять эаполняемьй объем в каждой точке заполнения. Температуру заполненых бутылок как можно быстрее понижают до -40 С,Условия для осуществления сушки вымораживанием для отдельных размеров бутылок с инъекционным препаратом различны. Можно руководствоваться, например, следующими данными, Приблизительная продолжительность основной сушки при температуре плит 25 С и давлении 0,6 мбар:6-8 ч для сосудов с 200 мг ифосфамида 10-12 ч для сосудов с 500 мг ифосфамида10-14 ч для сосудов с 1000 мг ифосфа- мида1836079 Таблица 1 ля разбавления лиофилизата позднее. Таб ставитель А.Модльхред М,Моргентал Корректор Л,фил ая Реда кто каз 2990 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 10 20-28 ч для сосудов с 2000 мг ифосфамида34 ч для сосудов с 5000 мг ифосфамида.Продолжительность дополнительной сушки составляет приблизительно 3-4 ч под вакуумом с давлением 5 10 мбар, при температуре плиты 25 С,Остаточная влажность определенная по К,Фишеру) должна составлять менее 0,5%.По окончании сушки вымораживанием бутылки с иньекционным препаратом закрывают,Для фиксации резиновых пробок на последние надевают отбортованные колпачки и края закатывают. Готовые бутылки с иньекционным препаратом проверяют на отсутствие механических дефектов (трещины,неправильное закрытие и т.п.),5 Формула изобретенияСпособ получения лиофилизата путемзамораживания биологически активного ивспомогательных веществ с последующейсушкой,отличаюаийсятем,что,сцелью10 повышения качества, водный или водно-зтанольный раствор ифосфамида, содержащего 1-13 мас.% ифосфамида, смешивают с0,1-17 мас.ч. гексида в пересчете на 1 мас,ч,ифосфамида и замораживают при темпера 15 туре от -70 до 0 С,