Способ получения 4 -галоид-антрациклингликозидов

Поставленная цель достигается путем взаимодействия 4 -эпи-0-трис сфторметансульфонил-И-замещенного даунорубицина в водном метиленхлоридеэс тетра (н-бутил)аммоний бромидом илитетра (н-бутил)аммоний хлоридом с получением соответствующих 4 "бром- или4 -хлорпроизводных, которые подвергают мягкому щелочному гидролизу с целью снятия защитных групп, и полученный 4 -галоиддаунорубицин в случаенеобходимости переводят в соответствующее 4 С -галоидпроизводное доксорубицина.с15П р и м е р 1. 4 -Деокси-бромдаунорубицин (Х-Н, К,-ОСН, К-Вг).2 г бромида тетра (н-бутил) аммосния вводят в раствор 4,0. г. 4 -эпн-.К-СОСР) в 80 мл водного метиленхлорида. Через 1.ч при комнатной температуре реакционную смесь промываютводой и органическую фазу выпариваютв вакууме. Остаточный продукт выпаривания очищают на силикагеле, используя смесь метиленхлорид: ацетон вкачестве элюента в результате чегополучают 3 5 г 4 -деокси-бром-ИФ ЗО-трифторацетилдаунорубицина с т.пл,130 С; РВ,. МБ 685 (М ). Тонкослойнаяхроматография на пластинках К 1 езе 1 яе 1 (Мегс 1 Р 254) с использованиемсистемы растворителя метиленхлорид:ацетон (в объемном отношении 10: 1),КГ 0,5,сБ раствор 3 г 4 -деокси-бром-И-.трифторацетилдаунорубицина в 20 млацетона вводят 160 мл 0,1 Н водногораствора гидрата окиси, натрия. Через4 ч при комнатной температуре величи-.ну рН раствора доводят до 8,6 посредством О, 1 И кислоты и экстрагируютраствор метиленхлоридом, Растворительвыпаривают и остаточный продукт выпаривания подвергают обработке метанольным- раствором хлористого водорода, в результате чего получают хлоргидрат целевого продукта (2,2 г,.т.пл. 180 С с одновременным разложеонием); тонкослойная хроматография напластинках К 1 езе 18 е 1 (МегсК Р 254) сиспользованием системы растворителейметиленхлорид: метанол: вода". уксусная кислота в обьемном отношении 80: 55:20:7:3, КГ = 0,32.П р и м е р 24 -Деокси-бром, доксорубицин (Х-ОН Н -Вг). 2 г 4 с-деоксис-бромдаунорубицина, полученного как описано в примере 1, растворяют в смеси метанола с диоксаном, Раствор подвергают обработке обычным образом сначала бромом, в результате чего получается 14-бром- производное, а затем - водным раствором формиата натрия, в результате чего получают 4 -деокси-бромдоксорусбицин. Это соединение превращают в его хлоргидрат путем обработки метанольным раствором хлористого водорода, Т.пл. этого продукта составляет 170 С (с разложением), РР, МЯ 605 (М+), тонкослойная хроматография на пластинках К 1 езе 18 е 1 (Мегс 1 с Р 254) с использованием системы растворителя метиленхлорид; метанол: вода: уксусная кислота в объемном отношении 80:20:7:3, КГ = 0,20.П р и м е р 3. 4 С.-Леокси-хлордаунорубицин (Х-Н, К -С 1).В результате обработки 4 -эпи- -0-трифторметансульфонил-сс-трифторацетилдаунорубицина (2, К-ОСНОВ, К -СОСР) хлоридом тетра (н-бутил)аммония, как описано в примере 1, получают 4 с -деокси-хлордаунорубицин, т.пл, 175 С с разложением, Р 0, МЯ 545 (М+), тонкослойная хроматография на пластинках К 1 еее 18 е 1 (Мегс; Р 254) с использованием системы растворителя метиленхлорид: метанол: вода: уксусная кислота в объемном отношении 8.20:7:3, КЕ = 0,32.П р и м е р 44 с-Леокси-хлордоксорубицин (Х - ОН, К - С 1),ф 1По методике примера 2 4-деокси- -хлордаунорубицин превращают в 4 -деокси-хлордоксорубицин и выделяют его в виде хлоргидрата: т.пл. 180 Со с разложением; РС,масс-спектр 551 (М ). Тонкослойная хроматография на пластинках Кдезе 18 е 1 (МегсЕ Р 254) с использованием системы растворителя хлористый метилен: метанол: вода: уксусная кислота в объемном отношении 80:20:7:3 КХ = 0,2.Испытания на биологическую активностьСоединения примеров 1,2 и 3 подвергались испытанию в условиях "хп1с 1 его в сопоставлении с даунсрубицином (ПИК) и доксорубицином (с.сХ) на действие против клеток НеЬа, клеток Р 388 чувствительных и стойких и пУ (Р 388(ПХ) .9465лога - 4 -иодоксорубицина, в то времякак действие "1 п т 1 сго" против Р 388Уопухолевых клеток, 4 -бромдоксорубицин намного более активно (0,2 нг/мл)по сравнению со структурным аналогом(5+2 нг/мл).Аналогичным образом (по отношениюк действию,н 1 п чиччо 1 против Гросслейкемии) бып найден показатель Т/С == 2582 для 4 -бромдоксорубицина придозе 5,27 мг/кг; 4 - иодоксорубицинимеет показатель Т/С =. 150-183 Х придозе 6,0 мг/кг,Кроме того, смертельные случаи ототравления составляют 2/17 для 4 -иоддоксорубицина и О/20 для аналогичногобромпроизводного.н сосн,. гидроксильная де Х - во Уя тем, чтотансульфонил-Нцин общей форму л-за О К - трифторацетил, воренный в водном метнленхлориде, комнатной температуре подвергают модействию с тетра 1 н-бутил)аммобромидом или тетра (н-бутил)аммохлоридом, получая, И-защищенный озид общей формулы рас при за ическое действие на авимо (3 нг/мл) для убицина и структурно и ЦиНеЬб окс а лик 157Результаты цитотоксической активности соединений примеров 4,3 и 2 представлены в табл. 1.Все новые производные показали себя более цитотоксичными, чем их родоначальные соединения против клеток НеЬа и Р 388, чувствительных к ДХ. Однако эта повышенная цитотоксичность является более явно выраженной, если рассматривать активность данных соединений против Р 388 10У В данном случае эти новые производные показывают 100-250-кратное увеличение цитотоксичности по сравнению с родоначальным препаратом. Данные соединения подвергались испытанию в условиях "1 п чиччо против трех различных видов экспериментальной лейкемии,Противоопухолевое действие на ас ф о р м у л а и з о б р е т е н и я цитическую лейкемию Р 388 приведено в( табл. 2, Способ .получения 4 -галоид-антраКак видно из табл. 2, активность циклингликозидов общей формулы действия, проявленная соединениями примера 3 равна активности ПИК, в то 25 время как другое производное ПИК (со- .ОН единение примера 1) проявляет активность противоопухолевого действия н со О онявно более высокую, чем ПИК.3Соединение примера 2 при макси . НЗС О мально допустимой дозе (4,15 мг/кг) имеет примерно такую же активностьюн действия, как и ВХ. Все эти новые соединения проявляют активность дей- г дород МН или ствия против лейкемии Р 388/0 Х (см. группа; табл. 3), в то время как ПИК и ВХ К 1 - бром или хлор неэффективны. о т и ч а ю щ и й сЭти три новых соединения подверга -эпи-0-трифторме ли испытанию после их внутривенной мещенный дауноруби инъекции на действие их против рассе лы янной общей лейкемии (Сгозв Ьеикев 1 а), результаты испытания приведеОН ны в табл, 4.В данной системе соединение 3 яв- ОН ляется таким же активным, как и 0 ИК, 45 в то время как соединение примера 1 НЕСО О ОН 1 является более активным, чем родона- с чальное соединение. Соединение примеН 3 ра 2 показывает примерно такую же эффективность, как и соединение ЭХ. 50 С 3 Ж. Я Оба эти соединения подвергались испытанию после ввода в организм через рот и показали значительную активность где действия, в то время как ВИК и БХ т не были активны при вводе таким же 55 образом. в итотокс клетки ниа сопост 4 - ний15794 б 5 О ОН ющее 14-бромпроизводное гидролизуют водным раствором Ьормиата натрия с последующим выделением целевого продукта, где Х-ОН, в виде хлоргидрата.Таблица 1 О НОнг/мп Соединение 1 щ.ц е а Р 38 388/ где К 1 и К имеют указанные значения,который подвергают снятию защитныхгрупп путем мягкого щелочного гидролиза водным раствором 0,1 И гидроксиданатрия с последующим выделением целевого продукта, где Х - водород, в виде хлоргидрата и в случае необходимости полученное соединение подвергаютвзаимодействию с раствором брома вхлороформе, полученное соответству,8 РМКПримерПримерВХПример 6,52,3 1250 7бирование послеа в течение 24 ч.определяемая поа в течение 48 ч.х.экспериментов). 4.Испытание на ингдействия лекарст, чкТБ Токсичныйсмертельикмныйоза единен м О/20 О/18 2/20 О/1 О О/10 О/10 О/10 165,155 170, 135 130, 115 145 1602,9 4,4 б,б 0 2,9 мер рим 6,6 10 4,4 б,б 10 Х,8 3,4 4 1 енты осуществлялись на мышах СОЕ,иноннь 1 х клетками (10 ) лейкемии, путемюшинной инъекции. путем внутрибрюшинле ввода опухолевовремя выживания подреднее время выжив100) . й инъекции черезинокулума.ергнутых лечению ия контрольных ение длительного времени ор в т ) 60 змерен о па аутоптиче ЭксперимкулированнутрибрО 1579465 Та блица 3 Активность действия против асцитической лейкемии Р 388/Х Доза , . Т/С , Токсичный смер+ Х -мг/кг Е тельныйфффф Соединение 0 Ш Пример 1 Пример 3 ПХ Пример 2 Эксперименты проводились на мышах ВОР, инокулированных клетками (1 О ), введенными путем внутрибрюшинной инъекции.4 М.Лечение путем внутрибрюшинной инъекции черезодин день после ввода опухолевого инокулума. ФМСреднее время выживания подвергнутых лечению. мышей (среднее время выживания контрольныхмышей х 100).+%4%Определено по утоптическим измерениям. Таблица 4Эффективность действия против общей лейкемии 10 15 нутривен 2/18 1/18 9/8 О/10 6/9 22,10 1 ример 1 Так же 9/9О/107/10О/10 имер 3 -Через рот Внутривенно 183 225 242 233 258 ример 2 Так же 4,4 6,64,410 6,6 .10 б,б10 2,88 3,46 4, 15 22,5 б,б 10 15 6,6 10 15 10 13 16,9 4,05 5,2712 1579465 Продолжение табл 4 6,85 242Э/10 4 05 114 О/10 5,27 157 О/10 Через ро мышах С Б(2 х 10 ),Эксперименты осуществляли налированных клетками лейкемии пуА+внутривенной инъекции.Лечение путем ввода препарата путем внутной инъекции или через рот через день поввода опухолевого инокулума,Среднее время выживания подвергнутых лечФ%Фмышей (среднее время выживания контрольнмьппей х 100).Определено по аутоптическим измерениям. иноку емивенле н Составитель Г. Конноваактор М. Келемеш Техред Л.Олийнык Корректор В, Гири Заказ 1925ВНИИПИ Государственного ко113035, Ио Тираж 30 Подписи тета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССРва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101