Цис-хлордиаммин-1, 3-диметилксантинплатины (ii) хлорид дигидрат, проявляющий противоопухолевую активность

9019 О (1 З) А 00 А 61 К 31/295 19) ЗХЗ (11) 151) 6 С 07 Р рог) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк авторскому свидетельству 3-ДИМЕТИ ЛОРИД ДИ- ПРОТИВО- Ь(54) ЦИС-ХЛОРДИА ЛКСАНТИНПЛАТИН ГИДРАТ, ПРОЯВЛ ОПУХОЛЕВУЮ АК (57) Использование; обладающего против стью, Сущность изо хлордиаммин,3-дим (11), БФ С 7 Н 18 С 2 М200 С с р о дихлордиаммин плати метилксантин, Усло при рН 2, при нагре не, 3 табл,ММИН Ы (11) ЯЮЙЦИЙ ТИВНОСТ в качест оопухолев бретения; етилксант 604 Р 1, вы ением, Р на. Реаге вия реак ванин на Комитет Российской Федераципо патентам и това ным знакам(71) Ленинградский химико-фармацевтический институт, Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР(56) "С з-ра 1 и". Сштеп 1 з 1 а 1 цз Хев Вечеораеп 1 з. Ед. А. К, Ргпз 1 а 1 о, 8, Т. Сгоойе, Х. 3. К, СагЬоп, р, 317, Асад, Ргезз, 1980. Авторское свидетельство СССР Х 1085209, кл. С 07 Р 15/00, 1988. ве препарата, ой активнопродукт-цис инплатина ход 75%, т. еагент 1:циснт 2: 1,3-диции: в воде кипрей ба 1790190Изобретение касалеттся изыскания комп лексных соединений платины (И), обладающих противоопухолевой активностью, а именно препарата цис-хлордиаммин,3- диметилксантинплатины (И) хлорид дигидрат формулы МК ц С 1зГ : цнт Н С 12 зСН К известным противоопухолевым препаратамплатины относятся цис-дихлордиаминплатина(сзратпа, ра 1 с 1 ат,. раппо, пес рат и); цис-хлордиамийцитозинплатины (И) хлорид,Препарат цис-дихлордиаминплатина (И)относится к классу неэлектролитнцх ком.плексов платины. Недостатком этого пре"парата является невысокая воднаяраствбримость (0,1 оп), что осложняет клиническое применеййсе и технологйю "выделения" препарата методом лиофилизации.Недостатком препарата ци 6-хлодиэсминцитозинплатины (И) хлорид служит неустойчивость по отношению к кислороду воздуха вводном и физиологическом растворах, чтогриводист к образованию окрашейных примеСей, содержащих трехвалентную платину, и вызывает необходимость прйменятьйрепсасрнат сразу пОсле его растворения,Цель изобретения- синтез водорастворимого и устойчивого в водной среде, активного и малотоксич ного катион ногокохМплекса платины (П) триаминового типацис-рстроейия, содержащего молекулу. гетероцйклйчесского взотсодержащего лиганда,Отличие в строении и свойствах цисхлЬфнэмми н,3-дйметилкса нтин платины(1) иоридса дихгтихдх"ранта"от йеэлхехктролиптиыхкомЗЙксохв платины (И) заключается в следйщйй; комплекс содержит однозарядныйкатион платины (И); наличие в комйлексемолекулы липофильного лигандэ,3-дйме.йелксайтина (теофиллина, ТЬр)-способствус- Фст "ллирйхоп"фильн-ости комплекса и егоМбйбрйннотй проницаемости: наличие одноге а недвух, как в цис-дихлордиаминплатийец , ихойссах хлОра делает комплексС 46 бббйй К"ситному, чем у незлектролитов,Щ взаймодействия с ДНК, а именно кМбаофсунксцоиональному, а не бифункцио яФМНФй, как у неэлектролитов, связываййо. Различйе вмеханизме биохимического3 ИВтвиях катионных и неэлектролитныхкояеплькс сов перспективно е целях риффе. ренциации и возможного расширения противоопухолевого действия препаратов платины.К преимуществам изобретения в хими 5 ческом отношении следует отнести(по сравнению с прототипом), хорошую воднуюрастворимость (10); большую устойчивость по бтношению к окислению и при хранении в водной среде; больший выход в10 процессе синтеза (70 - 80 оь) и отсутствие вконечном продукте примесей трехвалентной платйны.Цис-хлордиаммин,3-диметилксантинплатиныхлорйд дигидрат получают вза 15 имодействием цис-(Рт(МНз)2 С 2) и 1,3-диметилксантина. Реакцию проводят всолянокислой среде (рН 2) при нагреваниина кипящей водяной бане взвеси в водеэквимолярных количеств реагирующих ве 20 ществ. Целевой продукт выделяют ацетоном в виде белого пЬрошка (пример 1).Состав и координсационная формула установлены элементным анализом и измерением молярной электропроводности (см. табл.25 1), Индивидуальность и чистота соединениядоказана методом тонкослойной хроматографии на пластинкаМ иСилуфол УФ" вдвух системах растворителей: 1 - этанол";ацетон:вода;уксусная кислота30 (конц,);аммиак (конц,)=50;40:10;10:10 (пообъему); 2 - пропанол:вода:уксусная кислота (конц,):аммиак (конц,)=70;30:10:10 (пообъему). Комплекс хроматографировался вобеих системахв виде одного пятна с35 Вг=0,62 (система 1) и 0,58 (система 2). Детекция пятен проводилась в парах иода и вУФ-излучении,Растворймость комплекса в воде 10.При нагревании до 200 ОС комплекс раэлага 40 ется до начала плавления. Для соединенияхарактерно наличие в УФ-спектре полосыпогхлощейия, характеристики которой приведены в табл. 1 Л пах и 9 я-длинаволны вмаксимуме полосы поглощения и логарифм45 коэффициента молярного погашения приэтой длйневолны.Ввиду йевозможности проведения рен-.тгеноструктурного анализа (из-за отсутствия монокристаллов) структура соединения50 определена методами МПР- и ИК-спектроскопии (табл, 2),Излучение спектров протонного маг-.нитного резонанса (ПМР) свободного теофиллина и предлагаемого соединения в55 дейтерированном диметилсульфоксиде(ДМСО-бб) показало, что в комплексе сигнал нелабильного протона Н(8) теофиллина(д =8,50 м. д.) сдвинут по сравнению со свободными лигандами (д =8,00 м, д,) в слабое."5 1 790 1 9 0 6поле на 0,50 м, д, В то же время в спектре СЕ 5 от, н, доза, вызывающая 50% тормоПМР комплекса наблюдается спин-спино- жения включения меченого тимидийавнвое взаимодействие протона Н(8) с магнит- клетки СаОЧ для ан ного соединенияым ядром изотопа Рт с константой составляет 6 10 М, для препарата1195 Р-н(8)=80 Гц, Полученные данные сви сравнения "(цисплатина) 5 10 6 М, Это свидетельствуют об участии к Н(8) атомов азота детельствует о меньшей молярной токсичимидазольного цикла в координационной ности полученного соедйнения.связи, что позволяет сделать однозначныйИзлучение противоопухолевой активновыводобобразованиисвязи Р 1 - й. сти йроведено на мышах линий СнВ 1,Как видно иэ табл,2, частоты полос по ВА 1 ЬС, гибридах первых ВОР, (С 5 тВ 1 Хглощения карбонильной группы .и(С=О) ДВА) и беспородных животных.практически не меняются при комплексооб- Использованы следующйе перевиваеразовании, чтосвидетельствует об отсутст- мые опухоли и лейкозы: лимфоидная лейкевии связи Р 1 - О, В то же время увеличение мия 1-1210, гемоцитобластоз 1 а, лейкозчастоты (С=С, С=К) на 17 см указывает на 15 Р - 388, плазмацитома МОРС - 406, асцитнаяобразование связи платины с гетероцикли- саркома 37, меланома В - 16, аденокарциноческим азотом лиганда, что подтверждает: ма молочной железы Са - 755, фибросаркомавыводы, сделаннЬе при изучении спектров МСи лимфогенно метастазирующая эмПМР, Наличие полосы поглощения Р(Рс - бриокарцинома(ЛМЭК),С) 334 см в ИК-спектре комплекса доказы Вещества вводили в физиологическомвает содержание в нем внутрисферного растворе хлористого натрия внутрибрюиона хлора.Пшинно. Схемы терапии различны: однократр и м е р. Навеску комплекса цис- ная ийьекция вмаксимально "переносимой,Рс(ИНз)2 С 2)(0,6 г,2 ммоль) и 1,3-диметилк- дозе (МПД), ежедневное введение в течесантина (0,35 г, 2 ммоль) помещают в стакан 25 ние 5 дней и с интервалами в 96 ч, Терапевс 50 мл дистиллированной воды, подкислен- . тический эффект оценивали по торможениюной до рН 2 соляной кислотой, закрывают роста солидных опухолей; увеличейию прочасовым стеклом и нагревают в течение 2 ч должительности жизни леченьях животнцхна кипящей водяной бане, поддерживая по сравнению с контролем (УПЖ) и излечеуровень воды в стакане, Далее смесь охлаж нию животных,дают при комнатной температуре, отфильт- Установлено,что терапевтические дозыровьвают от остатка непрореагировавшихв зависимости от штамма и линии животныхисходных веществ, испаряютпри комнат- находятсяв"йределах 80-120 мг/кг при 5 ной температуре до объема 3 мл и выделяют дневном"лечеййи, МПД при однократномконечный продукт добавлением 15-кратно введении 340 мг/кг.го избытка ацетона. Белый осадок конечногоРезультаты исследования, полученныепродукта отфильтровывают на воронке Гир-, при оптимальных дозах и режиме применеша, отсасывая досуха, промывают ацетономния препаратов, представлены в табл. 3,и высушивают на воздухе втечение 3 ч и далее Как видно из данных табл. 3, полученноедо постоянной массы при температуре 70 С. 40 соединение имеет широкий спектр противоод 0,85 г(75от теоретического), опухолевогодействия и проявляет высокуюИзучение биологической активности активность как при гемобластозах, так и напроведено "инвитро" и "ин вива" наразлич- асцитйых и плотных опухолях; на ряденых перевиваемых опухолях животных штаммов по эффективности значительно,Все исследования проведены в сравне превышаетсравниваемые аналоги (на 1:нии с близкими аналогами полученного со, Р, МОРС, МС - 11). На чувстединения: хлор-цис-диамминцитозинпла- вительных кпрепарату" опух 0 ляхтины (И) хлоридом и цис-дихлордиамминп- (МОРС - 406, С - 37) помимо увеличения пролатиной (11), получавшей название "циспла- должительности жйзни излечивает частЬтин" и широко применяемой в клинике для 50 животных (330). Цисплатин лишь увелйчилечения онкологических заболеваний, вает продолжительность"жизни животных СИсследование цитотоксической актив- плазмацитомой МОРС, без излечения.ости цис-хлордиаммин,3-диметилксан- В то же время вещество полностью неактиатинплатины (11) хлорида проведено на но на лейкозе 1 а, т, е. имеет определенныеклетках карциномы яичников человека 55 отличия по спектру противоопухолевого(СаОЧ) радиометрическим методом по влия- действия от сравниваемых препаратов.ток СаОЧ, Испю на включение Н-тимидина в ДНК кле- Полученное соединение характер э еиутСаОЧ, Использованы концентрации от сябольшойдлительностьюсохранени проятивоопухолевого.эффекта: на 17-е сутки7 . 1790190 8 Табл мца 1 а блица ТЗначение йекоторых основных характеристических частот в ИК-спектрах 1,3-диметина (теофиллина, Тпр) и цис-хлордиаммин,3-диметилксантинплатины. (И) хлорйда илксангидрат. вность кблица 3 Протйвоопухолевая лексных соединений йлатины И) после перевивки торможение роста Са. составляет 91, меланомы В81 , МС 11 66, и значительной широтой терапевтического действия (диапазоны доз от мийимально эффективной до максймально переносимой).Исследование токсикологических свойств изобретения проведено на мышах линии Ва 1 Ь/С массой 20-22 г и йакрысах линии Изтаг массой 120-200 г.Вещество растворяли в 0,9-ном растворе хлорида натрия и вводили животнымвнутрибрюшинно в виде 2-ного раствора. Определены дозы, характеризующиетоксичность препарата при однократном внутрибрюшинном применении. Они составляют соответственно для мышей МПД 5 340 мг/кг, ЯДА, 480 мг/кг; для крыс МПД180 мг/кг, ЯДА 250 мг/кг.Учитывая хорошую растворимость в воде,высокую противоопухолевую активность, проявленную при экспериментальном изу чении, малую токсичность, соединение мож но применять в медицине для лечениязлокачественных заболеваний.1790190 10 Продолжение табл, 3 одолжен Количество излеченных животных из числа взятых в группу.. "Торможение роста опухолей дано на 7-е и 17-е сутки посл прочерк (-) означает, что исследование не проводилось. еревивки опухо