Способ определения зараженности семян фитопатогенами

( 1/00, А 01 С 1/О БРЕТЕ у1 лГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИСАНИ А ВТОРСИОМУ СИИ(53) 634.0.232.3 18 (088.8) (56) Грисенко Г,В. и др. Фтоекспер тиза насхння соняшнику методом пророщування в рулонах. - В 1 сник с 1 ль Ф Ю ськогосподарсько 1 науки, - Кив, 1983, Р 5, 79-81..ЯВ 1401038(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ СЕМЯН ФИТОПАТОГЕНАМИ(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способу определения зараженности семян фитопатогенамии может быть использовано при подготовке семян к посеву, Целью изобретения является повышение достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения. Прора" щивают семена в рулоне иэ гигроскопического материала, затем внешне здоровые проростки отбирают и выращивают на свету в стерильной днсти лированной воде в течение 2-10 сут при гемпературе 20-23 С. 3 табл.Изсбретезнед стнссится к сельскому хсзяиству я именнос:псссбам Опре деления зараженности Геея фитспятс 1.енами и может быть использовано5 Йри подготовке семян к посеву с це Лью отбраковки инфицированных семян.Цель изобретения - повьппение доСтовернссти способа за счет Выявления скрытой формы заражения. 10П р и м е р 1, Установление степе- ИИ заряженности семян подсолнечника с учетом няличия скрытой фОрмы пятс 11 енов.Для Определения лабораторной Всхо1 х , ести и зараженности патогенями семе 1 я подсолнечника ряскладывяют ВдОль увлаженных дистиллированной Водой Полосок фильтровальной бумаги зародьщ 1 ем вниз, отступая от края на 2- 3 ,см, Расстояние между семенами 1,5-.2 см. Сверху их накрывают узкой полоской бумаги, Все это заворачиваютв, рулоны и устанавливают,в стеклянные сосуды, запопненные дистиллированной Б 1 одой на 2-3 см. Сосуды с рулонами Бь 1 дердивают В термостате да псявлеН 11 я боковых хоре 1 пков на центральном корне.,При температуре 25-26" Г они появляются на 4-5-Й день, после чего подсчитывают количество проросших СВмян здоровых и пораженных патсгена- МИ и устанавливают степень зараженБссти их наружной и внутренней инь4 Ькцией, Вид Бозбудитепя на больных сменах и проростках уточняеот м 1 крс сопическим просмотром, затем подсчитзвяют ксличедствс семян поряжедннь 1 х тм или иным возбудителем и выводят сфедний процент зараженности по отдельным видам. Полученные внепне здо ровые прсростки вынимают из рулонов, промывают в стерильной воде и продолжают выращиваеь Б условиях обеспечивающих им процесс фотосинтеза по уСтраняющих полностью минеральное 45 питание необходимое для дальнейшего рйзвития прсрсстксв сразу же после ИСПОЛЬЗОВЯНИЯ ЗЯПЯССВ ИМЕВЩИХСЯ Бсеменах,Во Внешне здоровых проростс;К 50содержащих патогены Б скрытой формек этому Времени уже устянявл 1 наютсяпСевдосимбиотические Взаимоотношения,и для выявления патогенов необходимонарушить их. ОсуПеств 11 яют это ус.траи е 1 н и е мВ е Г е т и р у ю ц и х и р О р с с т к с Б в с 1 д хэлеменгсв минерального питания, дляЧЯГО ПОГРУЖЯЮТ КСРНЕБЛС СИСТЕМУ ИЧЯСТЬ ГИПОКСТ 111 В ДНСТИЛЛИРОБЯННУ -ВОДУ И СС ТЯВЛЯЮТ ИХ РЯС ти В ТЕ.еЕдНИЕ2-10 дн. при комн;тнсй температурена свету. Комнатная температура 2023 С является оптимальной для ростаболь 1 их грибов. Образование у проростков углеводов - продукта фотосинтеза, но отсутствие минерального питания вынуждает пятогены, развивающиеся В них в скрытой форме, добыватьмиееральпсе питание для своего дальнейшего развития из тканей растения,для чего пятогены пускают в ход своюферментативную систему,Псявледние перетяжки или побурениятканей на гипскстиле Вьппе поверхности воды свидетельствует об этом, Ьачинается патологический процесс. Этот грсцесс у исследуемых проростков наступает не одновременно, у одних он гроявляется уже через 2 дн а у дру 1 х - через 8-10 дн, Максимальное количество проростков, имеющих патогенов н скрытой форме, погибают в течение б дн, Проростки, не содержащие патогенных организмов в скрытой форме, продолжают вегетировать в таких условиях свьппе 20 дн,Тяк как для проявления патологического процесса некоторым проросткам достаточно 2 днь то учет и удаление пораженных прсростков из сосуда проводят через каждые 2 дн. после размещения их В сосуды, При этом у оставшихся здоровых проростков промывают корневую систему и меняют дистиллированную воду в связи с тем, что бактерии, вышедшие из проростковводу используя продукты их обмена, Вызывают процесс брожения. Передача инфекции от пораженного проростка к здоровому В течение 2 дн, (интервал между проявлением заболевании и удалением пораженного проростка 3 не происходит, так как миделий патогенов и органы спорснощения формируются только через 3-4 дн, после проявления патологического процессалсвиях Блажной камеры, У некоторых прорсстков на семядольных листьях после снятия лузги имеются небольшие бурые пятка которые свидетельствуют о наличии патсгенов, еякие проростки размещают в сосудах свободно, чтобы не происходила ге.релача инфекции ст очного прорсстка к друг,ему через семядсльные листья при х сопритсссно- вениидДля оцре 1 елъ ця Г т.пе ц 1 э 11 ажц 1 яи ВидовоГо состава ца 1 ОГецоВ наховдящихся в семенах в скрытой форме,пораженный участок изцлечеццл 1 х цз5сосудов проростков разме 1 цают и чашкиПетри на увлажненную Фильтровальнуюбумагу так, чтобы оци не соприкасались друг с другом. Чашки Петри вьюдерживают в термостате при 22-24 Св течение 3-4 дн.,до проявления спороношения у патогеновВидовую принадлежность патогенов уточняют примикроскопическом просмотре, Общуюзараженность семян патогенами с уче 5том наличия их в скрытой форме устанавливают путем суммирования зараженности, обнаруженной при определениилабораторной всхожести, с зараженностью проростков скрытой формой патогенов.В табл, 1 представлены результатыопределения степени зараженности семян подсолнечника, сорт Харьковский101. урожай 1984 года, При определении лабораторной всхожести указаннойпартии семян установлено, что 117. ихпогибло от наличия наружной и внутренней инфекции патогенов. При дальнейшем росте полученных внешне здо-"ровых проростков на свету без доступа минерального питания через двадня после размещения их в сосудыудалено 3,257 проростков с перетяжкой на гипокотиле. Иаксимальное количество гибели внешне здоровых проростков (23,0 и 30,757.) отмечено на4-й и 6-й дни, На 8-й и 10-й деньстепень проявления заболеваний уменьшается до 7,5 и 2,257, В последующиедни (12-й и 14-й) гибели проростков 40не отмечают,Суммируя зараженность семян патогенами, обнаруженную при определениилабораторной вхожести (117.), и зараженность патогецами, развивающимися 45в скрытой Форме (66,57) устанавливаютобщую зараженность семян (77,57), Припосеве таких семян в прохладную ивлажную почву получают сильно изреженные всходы, что вызвано гибельюпроростков от скрытой инфекции еще довыхода их ца поверхность почвы, а увь 1 живших вегетирующих растений листьянижнего яруса суммируют уже в фазахфутонизации и цветения, Все это ока 5зывает отрицательное влияние ца урожай подсолнечника.В табл, 2 1 репстявлеы результатыобследования степени 1 аражеццости се 11 Ц 11.11(1,11 "П 1 1 Ц 1 ПЕЦЦ 1,1 Х:Ц 1 Ц 11 ЙФ Г 11 б 1)И.оц 11 (111 )1 де (ъяцв 1 ц 11 КЛ С уц тоь цц.11 11 я к 11 то 1 игорь 11. Условия и режимы црерашцвагия семяц, определецця заражеццо,:ти проростков скрь 1- той фор 1 ой патогецов такие же, как в примере 1, Прц определении лабораторной всхожести выяснилось, цто заражеццость па 1 огецами исследуемых партий семян разлицца ц составляет 3-207. Зараженность внешне здоровых проростков патогенами, находящимися в скрытой форме, значительно Выше (15- 647) . Суммируя пораженность семян подсолнечника наружной и внутренней инфекцией, обнаруженной при определении лабораторной всхожести, с пораженностью внешне здоровых проростков скрытой формой патогенов, получают общую зараженность семян, У исследуемых партий она составляет 22-847П р и м е р 2, Установление видового состава патогенов, находящихся в скрытой форме в семенах подсолнечника.Для анализа используют три партии семян подсолцецника (сорт Х, урожай 1985 года); кондиционнье семена, собранные из пораженных корзинок белой гнилью и пораженных корзинок серой гнилью. Условия и режимы проращивания семян, определение зараженности их патогецами, выявление скрытой формы патогенов в проростках такие же, как в примере 1. Лабораторная всхожесть кондиционных семян составляет 907, а собранных из пораженных корзинок белой и серой гнилями на 20-307. ниже, Полученные внешне здоровые проростки во всех трех вариантах помещают в сосуды с дистиллированной водой которые выдерживаютона свету при 20-23 С, Через каждые 2 дн, удаляют из сосудов проростки с проявлением заболевания. Пораженные участки из них вырезают и размещают в чашках Петри на увлажненную фильтровальцую бумагу в асептических условиях таким образом, чтобы они не соприкасались друг с другом. Чашки Петри выдерживают в термостате в теоцение 3-4 дц, при 22-24 С, Оставшиеся в сосудах еще здоровые проростки после каждого удаления пораженных промывают в листЙлированной воде и заменяют воду в сосудах, Иикроскопи(лредлагввиыЯ вавииоств свили вг чвФвв враил,вйт 6),0 75,0 . 2 а,О . 02,0 0,0 ЭЭ Ь,О 2,О . О Э,О Эб,оЭ 92,0 ЭЭ,О 9 0 20,0 22,00,0 50,0 67 25,0 16,У,о ф,о5,0 а,о 0 0 О,66,5 . 775 Срвдивввивъвиив 09,0; 11,0 5 2,25 0 блица раж ща названи ос сорта гибридалинии роро ов о т с н скрытоинфекци7 (прелагаемспособ цин,вест со Харь ский Харь ский ВНИИ 6540 .улуч ов 50 0 35,в 52,0 58,0 101.К ем 5 14 (.) 1 Оческому осмотру подвергают каждыйпораженный участок проросткон,Подсчитывают количество проростков пораженных тем или иным возбудив5телем, и выводят средний процент зараженности по отдельному виду, Прианализе выяснилось, что гибель проростков происходит не от одного патогена, а от комплекса их(2-5).10Видовая принадлежность и степеньзараженности проростков патогенами,выделенными с помощью предлагаемогоспособа, представлены в табл. 3,Внешне здоровые проростки во втором и третьем вариантах заражены патогенами в скрытой форме на 100%,Выделены возбудители белой, серой,сухой гнилей подсолнечника, ложноймучнистой росы, альтернариоэа и фуэа Ориоза. Проростки кондиционных семян(11 класс) также заражены патогенами 6в скрытой форме, но степень заражения их составлят 13,8 Е, что в 4-5 раэ меньше, чем во втором и третьем вариантаМ. Формула изобретения Способ определения зараженности семян фитопатогенами, предусматривающий проращивание семян в рулоне иэ гигроскопичного материала с последующей оценкой результатов и отбором внешне здоровых проростков, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения, внешне здоровые проростки выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут при 20-23 С.-514 Вк13,0 0-3 10,0 30,0 40,0 514" 772н 0-3 3,0 22 тО 25 еО Тбяна 9 Обола тлра- ненность сслн арапность сена врун ер)ненктьроростон серегой нсевей 2преяяагаВпоон состал патлгеое Вс 1 сго 1114с)егоогон рояуелг 1 е А 1 ег"ЛЛГ 4 1 е сг реннеЯ нелре ЯаестЯк об) ай оо)Воем Ю 1 оп 22 нявсс 2,6И. Иаксимишин оррект актор Н.Яцола Те Тираж 520 ИИПИ Государственно по делам иэобретений 5, Иосквае Же Ра Подписноеомитета СССР аэ 3633 открытий кая наб д