Способ выявления альтернариозной инфекции у семян пшеницы

-й"г"-А К АВТО МУ СВИДЕТЕ В(21) 4850347 (22) 12.07.90 (46) 15.02.93 (71) Целино ийститут (72) З.П;Кар (56) Хохряко лЕзней сель Колос, 1984 (54) СПОСО ОЗНОЙ ИН 5 в М.К. и д кохозяйс с.305. ВЫЯВЛФЕКЦИИ"Определитель бо нных культур", М,ИЯ АЛЬТЕРНАРИЕМЯН ПШЕНИЦЫ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) Бюл, Мбадский сельскохозяйственны Изобретение относится к сельскому хо зяйству, в частности к способам фитопатологической экспертизы предусматривающей выявление скрытой альтернариозной инфекции в зародышевой зоне семян пшеницы, что может быть использовано в получении здоровых проростков для использования их в селекционном и семеноводческом процессах выведения высокоурожайных сортов яровой пшеницы и повышения урожайности имеющихся сортов.Известен способ анализа семян зерновых культур на фузариоз и гельминтоспориоэ, принятый за прототип, предусматривающий дезинфекцию и раскладку их на питательные агаровые среды с последующим микроскопированием. Семена дезинфицируют сулемой (1;1000), формалином (1:300), марганцовокислым калием (0,5 6), хлорноватистым натрием (0,5), 10 раствором борной воды, 96 или 50 ф раствором спирта (семена погружают на 3 мин.вынимают, просушивают на фильтрах и рас. кладывают на питательные среды). Рекомендуемые питательные среды следующие: 42 1794.34 2при оценке селекционного материала на ус тойчивость к альтернариозной инфекции Сущность изобретения: семена аыдержива ют в спирте для деэинфицирования. Поме щают их на питательный субстрат из картофельного агара при рН 2 - 3 с добавле нием 3 0 сахара и выдерживают на нем в течение 3 суток. Альтернариоэную инфекцию выявляют путем микроскальпирования 4 табл,мальцпептонный агар, клевероглюкозный агар, овсяной агар, свекловичный агар, сусловый агар. Испол, зуют также картофельный агар. Очищают нарезают кубиками 200 г картофеля, зали.;ют 1 л воды, кипятят 40 мин. Жидкость о фильтровывают, добавляют 20 г агара, 1-2 капли 500-ного раствора лимонной кислоты на 10 мл среды, кипятят до растворения агара, разливают в пробирки, При приготовлении картофельно-глюкоэного агара все производят как в первом случае только еще добавляют 20 г глюкозы.Недостатком отмеченного способа является то, что он рекомендуется только для выделения грибов из рода фузариум и гельминтоспориум, Испытание предлагаемых сред для определения грибов из рода А 1 егпаг 1 а приводило к тому, что питательные среды зачастую зарастали грибами из рода Мцсог, что затрудняло выявление грибов из рода А 1 егпага, кроме того ни одна из отмеченных питательных средств и средства дезинфекции семенного материала не имели той высокой точности оценки выявления скрытой адьтернариоэной инфекции в зародышевой зоне пшеницы, Цель изобретения - разработка способаоценки селекционного и семеноводческогоматериала на устойчивость к альтернариозной инфекции, а также дающего возможность выделения здоровых проростковпшеницы для использования их в биотехнологии селекционного и семеноводческогопроцессов,Поставленная цель достигается тем, чтосемена пшеницы дезинфицируют в 96%- "0ном спирте, извлекают и переносят сквозьпламя спиртовки и раскладывают на подкисленный соляной кислотой картофельныйагар,оСпособ изучался на мягкой и твердой 15сортах пшеницы, имеющих различное экологическое происхождение и полученных сразличных агротехнических фонов, В анализ шли раздельно чеонозародышевые и белозародышевые семена. Полученные 20здоровые проростки и проростки с пораженной зародышевой зоной грибами родаАтегпага выращивались в вегетационных иполевых опытах на темно-каштановой почвев условиях сухой степи Северного Казахстана,П р и м е р, Отбирают 20-30 семян испытываемого сорта и переносят в чашкиПетри с 9 б% спиртом, сразу же извлекаютпинцетом каждое зерно и проносят его 30сквозь пламя спиртовки для полного сгорания спирта, прогрева и обеззараживанияповерхности семян, Раскладывают эти семена на подкисленный соляной кислой картофельный агар в чашки Петри. При высеве 35белозародышевых альтернариозных семян,через сутки сквозь лопнувший перикарпийвместе с ростом главного корешка наружупробивается пучок мицелия грибов родаАсегпага, Формирование колоний и спороношение гриба происходит на третьи сутки.Картофельный агар готовят следующим образом: 200 г очищенного, нарезанного кубиками картофеля заливают 1 л водопроводной воды, доводят до кипения, настаивают 1 ч, отжимают через марлю. В фильтрат добавляют 30 г сахара (3%), 15 г аар-агара (1,5%) и доводят водой объем до прежнего уровня. Затем стерилизуют 30 мин при 120 С. Перед анализом семян картофельный агар разогревают и добавляют фиксанал соляной кислоты в концентрации 0,1 г/экв (на 1 л среды - 5 мл НС),Разработанный способ позволил выявить высокую зараженность семян твердой и мягкой пшеницы грибами рода Атегпага в условиях сухой степи Северного Казахстана (табл. 1).Патогенную нагрузку грибов рода Атегпага в зоне зароша несут внешне здоровые белозародышевые семена пшеницы (табл. 2).Опасность представляют чернозародышевые альтернариозные семена пшеницы, несущие высокую нагрузку грибов, что обуславливает заметно большую поражаемость грибов структурных элементов колоса пшеницы. Патогенное действие грибов рода Атегпага негативно сказывается на полевой всхбжести и урожайности пшеницы,Период хранения семян пшеницы в течение трех лет способствует стопроцентному поражению зародышевой эоны грибами рода Атегпага. Это отрицательно влияет на жизнеспособность семян пшеницы и снижает урожайность этой культуры до 3,5 ц/га (табл, 3).Обработка белозародышевых альтернариозных семян химическими протравителями беномил, байтан слабо подавляет грибы рода Атегпага в зародышевой зоне пшеницы табл. 4),Использование предлагаемого способа анализа семян пшеницы на зараженность зародышевой зоны грибами рода Атегпага позволило выявить широкую распространенность и патогенность этого заболевания, резко снижающего полевую всхожесть, а также возможность отбора здоровых проростков для биотехнологических целей в селекции и семеноводстве, Формула изобретения Способ выявления альтернариозной ин-. фекцииусемян пшеницы, включающийдезинфекцию семян в спирте. выдерживание на питательном субстрате и микроскопирование, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повыше ия точности способа, после дезин фекции семян в спирте их обрабатывают пламенем, а в качестве питательного субстрата используют картофельный агар при рН 2-3 с добавлением 3% сахара, при этом выдерживание семян на субстрате ведут в течении 3 суток,179 343 Таблица 1 Интенсивность заражения грибами рода А 1 еглага зародышевой эоны различных сортов пшеницыДиаметр колоний грибов на пораженных ст уктурных элементах колоса, ммРастенияпшеницы; чешуйки зерно тержень из здоровых проростков от белозародышевых семян из проростков от бело- зародышевых альтернариозных семян из проростков от черно- зародышевых альтернариозных семян 16 19 9 2 35 Таблица личение количества альтернариозных семян в зависимости от срока хранен ы) анения семян т и здоровых альтерна- ри- озных ор Харьковская 46.Безенчукская 139Саратовская 9 о О 36 56 Средний диаметр колоний гриба Атегпага на структурных. элементах колоса пшеницы, мм1794343 Таблица 4 Действие протравителей на рост грибов рода АИегпага Составитель З.КарамщукТехред М;Моргентал Корректор М,Максимишинец Редактор Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 377 Тираж . : Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113 О 35, Москва, Ж-Зб, Раувекая наб 4/5