Способ диагностики активного воспалительного процесса при урологических заболеваниях

(54) (57)ВОСПАЛИТЕЧЕСКИХ ЗАфункционо тлич бльский инст А.Ф.,Даре целью вы цесса.на дят оп ржинская И.И. ткообразующие и рани нии ееопределпроцес при остром и е, ИммунолоГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(56) Лопаткин Н.А., ДзеРанние и поздние Е-розенейтройилы и лимфоцитыхроническом пиелонефритгия, 1984,1, с68-7 СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АКТИВНОГО ЛЬНОГО ПРОЦЕССА ПРИ УРОЛОГИБОЛЕВАНИЯХ путем выявления альной активности лейкоцитов,а ю щ и й с я тем, что, с вления воспалительного продоклинической стадии, провоеление фагоцитарной активнох нейтрофилов и при увеличе-5 раз в сравнении с нормою т активнй воспалительный а доклинической стадии.13597Изобретение относится к медицинеи может быть использовано в клинической иммунологии для экспресс-диагностики выявления активного воспалитель 5ного процесса.Целью изобретения является выявление воспалительного процесса на доклинической стадии за счет определенияфагоцитарной активности ранних нейтро-Офилов.Способ осуществляется следующимобразом.У больного берут кровь, выделяютсубпопуляцию ранних нейтрофилов, приэтом разделение клеток крови производят наслаиванием цельной крови надвойной градиент фиколл-уротраста сплотностью 1,072-1,077 г/мл и1,092-1,099 г/мл, центрифугированиемовзвеси клеток при 0-4 С со скоростью1000-1500 об./мин в течение 10-15 мин.Получают две чистые популяции клеток:лимфоцитарную и нейтрофильную. Соеди 6няют О, 1 мл (310 в 1 мл) нейтрофилов с 0,1 млмлрд, взвеси бактерий(штамп .ер 1 п золотистого стафилококка)Смесь инкубируют в холодильнике прио0-4 С. в течение 15-20 мин, дополнительно перемешивают через 7-10 мин,Делают мазки на стекле, сушт фиксируют метанолом 3-5 мин, красят. азур -эозином 3-5 мин,В мазках просчитывают 50-100 нейтрофилов, вычисляя из них процентклеток с захваченными микробами (7. фагоцитоза), фагоцитарный индекс (ФИ) -среднее число фагоцитированных бактерий на клетку, абсолютное число фагоцитирующих нейтрофилов в 1 мкл, абсолютный фагоцитарный показатель (АФП) вабсолютное число поглощенных бактерий в 1 мкл. Определяют содержание лейкоцитов в 1 мкм (1 ), а также подсчитывают процентное содержание нейтрофилов (1). и ранних Е-РОН (а) среди всех лейкоцитов в мазке крови. Зная процентное содержание, вычисляют их абсолютное содержание в 1 мкл крови (М и М) 46 2Абсолютное содержание фагоцитируюших нейтрофилов (Р) вычисляют по формулебМГ100где б - процент фагоцитирующих нейтрофилов в препарате;М - абсолютное количество ранних Е-РОН (в 1 мкл периферической крови)Зная количество поглощенных бактерий (б) всеми клетками (а), вычислябют ФИ = . АФП = ФИфР,Смесь А содержит фиколл 11,2 г;уротраст 60% 20 мл; дистиллированнуюводу 100 мл. Плотность раствора1,092-1,099 г/мл.Смесь В содержит фиколл 7,2 г;уротраст 607, 20 мл; дистиллированнуюводу 100 мл, Плотность раствора1,072-1,077 г/мл. Аналоги: урографин,верографин.П р и м е р 1. Содержание лейкоцитов в 1 мкл крови 5150, процентноесодержание нейтрофилов в формуле крови 56. Подставив в формулу цифровыезначения, получаютЦ = 100 = 2884 вмкл 5150 56В иммерсионной системе микроскопа в 6-7 разных полях препаратаполучено 30 Х ранних (активных) розеткообразующих нейтрофилов, подставив в формулу цифровыми значения, получают2884 30М = ----= 865 2 в 1 мкл.100В иммерсионной системе микроскопа; в препаратеполучено 477 фагоцитирующих нейтрофилов. Подставив в формулу цифровые значения, получают47 8652 Р == 406,6 в 1 мкл.Количество поглощенных бактерий 207,следовательно207ФИ =-= 4 546.1 И аМ -М - 10010055Подсчитывают процент фагоцитирующих клеток на 50-100 нейтрофилов в препарате, т.е, относительное содержание фагоцитирующих клеток (б). АФП = 4,5 406,6 = 1829,7 в 1 мкл.В примере 1 определяли содержание ранних Е-розеткообразующих нейтрофилов (Е-РОНР) и показатели, характеризующие фагоцитарную активность данной субпопуляции клеток у практически здорового человека,46 4 3 13597П р и м е р 2. Больная С. 47 лет. Поступила с жалобами на наличие свища в левой поясничной области, тупые боли, температура тела 39,8 С с озноо бом.По данным экскреторной урографии функция почек сохранена. По данным радиоизотопной ренографии снижение очистительной способности почек спра- О ва на 42%, слева на 64%.Иммунологические исследования: содержание ранних Е-РОН 5840 в 1 мкл; Фагоцитирующих ранних Е-РОН 5787,4 в 1 мкл (99,1%); ФИ 11,5; АФП 66555,1 5 в 1 мкл, Произведено иссечение свища и назначена антибактериальная и стимулирующая терапия.У больной диагностирована атака пиелонефрита справа. 20Иммунологические исследования: содержание ранних Е-РОН 1824,5 вмкл (45%); фагоцитирующих ранних Е-РОН 939,6 в 1 мкл (51,5%); ФИ 6,3; АФП 5919,5 в,1 мкл. 25Таким образом, иммунологические показатели свидетельствовали об остром воспалительном процессе, иссечение свища и назначение мощной антибактериальной и стимулирующей терапии 30 сопровождалось положительной динамикой: уменьшением фагоцитирующих ранних Е-РОН в 6 раз; ФИ с 11,5 до 6,3; АФП с 66555,1 в 1 мкл до 5919,5в 1 мкл.В последующем показатели все нор 35 мализовались и больная в удовлетворительном состоянии выписана домой,П р и м е р 3. Больная К., 41 год, Поступила с жалобами на тупые боли по 40 ходу левого мочеточника, иррадиация в левый пах. Симптом Пастернадского отрицательный с обеих сторон.На уретропиелограмме определяется К-ген негативный камень левой почки. Болеет с 1980 г. Анализы крови в нор 45 ме. Анализ мочи : белок 0,165; лейкоциты 10-15 в поле зрения; соли мочевой кислоты в большом количестве. Анализ мочи по Нечипоренко: лейкоциты 750; эритроциты отсутствуют. /У больной острый левосторонний пиелонефрит. Произведена экстренная пиелолитотомия, нефростомия, интубация мочеточника, Камень удален пиело томическим и нефротомическим разрезом. Кровотечение во время операции умеренное, Операция средней травматичности. Иммунологические исследования: Е-РОНР 1320 в 1 мкл (50%); содержание Фагоцитирующих Е-РОН 620,6 в 1 мкл (47%); ФИ 4,1; АФП 2543,6 в 1 мкл; лейкоциты 4000 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофплы 40 в 1 мкл (1%); сегментоядерные нейтрофилы 2640 в 1 мкл (65%); лимфоциты 1040 в 1.мкл (26%); моноциты 320 в 1 мкл (8%)Состояние больной удовлетворительное. Жалоб нет. Повязка сухая, нефростома функционирует хорошо. Температура тела 36,8-36,7 С.Иммунологические исследования: Е-РОНР 3916 в 1 мкл (80%); содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН 1280,5 в 1 мкл (32,7%); ФИ 5,6; АФП 7170,8 в 1 мкл; лейкоциты 6800 в 1 мкл; сегментоядерные нейтрофилы 4895 в 1 мкл (72%); лимфоциты 1020 в 1 мкл (15%); моноциты 884 в 1 мкл (13%)Иммунологические исследования: Е-РОНР 2920,3 в 1 мкл (95%); фагоцитирующих ранних Е-РОН 2777,2 в 1 мкл (95,1%); ФИ 9,6; АФП 26661,1 в 1 мкл; лейкоциты 5300 вмкл, палочкоядерные нейтрофилы 10 б в 1 мкл (2%); сегментоядерные нейтрофилы 3074 в 1 м;л (56%); лимфоциты 1590 в 1 мкл (30%); моноциты 583 в 1 мкл (11%). Состояние больной расценено как атака пиелонефрита в оперированной почке. 20,11 отошли 2 мелких конкремента (0,1 0,2 и 0,2 . 0,2).Атака пиелонефрита купирована. Состояние больной удовлетворительное. Температура тела нормализовалась. Катетер Функционирует хорошо. Симптом Пастернацкого отрицательный с обеих сторон. Анализ крови в пределах нормы,Иммунологические исследования: содержание Е-РОНР 714 в 1 мкл (25%); Фагоцитируюших Е-РОН 33,4 ь 1 мкл;43,9 в 1 мкл, ФИ 4,7; АФП 1472,9 в 1 мкл; лейкоциты 4200 в 1 мкл; сегментоядерные нейтрофилы 2856 в 1 мкл (68%); лимфоциты 1050 в 1 мкл (25%); моноциты 210 в 1 мкл (5%) Больная выписана на амбулаторное долечивание.Таким образом, за 10 дней до клинических проявлений атаки пиелонефрита оперированной почки уменьшается процентное содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН, АФП повышается в 3 ра-.: за. На высоте воспаления процент ФаБ13597 гоцитирующих ранних Е-РОН увеличивается с 32,77. до 957., ФИ с 5,6 до 9,6, АФП с 7170,8 в 1 мкл до 26,661 в 1 мкл.В результате интенсивной Фагоцитарной аКтивности атака пиелонефрита 26.11 купирована. Уменьшение процента фагоцитирующих ранних Е-РОН до клинических проявлений, по-видимому, обусловлено блокадой рецепторов или гибелью этого пула клеток. П р и м е р 4. Больной С 53 лет, госпитализирован в урологическую больницу.1 Б Иммунологические показатели: Е-РОНР 2010,6 в 1 мкл (477,) количество фагоцитирующих ранних Е-РОН 2824 в 1 мкл (147); фагоцитарный индекс (ФИ) 3,1; абсолютный фагоцитар ный показатель 872,3 в 1 мкл.Лейкоциты 6200 в 1 мкл,. палочкоядерные нейтрофилы 124 в 1 мкл (27); сегментоядерные нейтрофилы 4030 в 1 мкл (65%); эозинофилы 124 вмкл 2 Б (2%); лимфоциты 1674 в 1 мкл (277.); мопоциты 248 в 1 мкл (4%)Болен в течение 2 лет. Получал лечение по поводу хронического проста- тита с положительным эффектом, Жалобы 30 на боли по ходу правой паховой складки, учащенное почеиспускание вялой струей, жжения, снижение потенции. Болезненность при пальпации правой подвздошной области. Правый придаток болезненный при палъпации. ПРостата склерозироваНная, плотная, туго эластичной консистенции. Функция почек своевременная с обеих сторон. Чашечнолоханочная система не расширена. На 40 нисходящей цистограмме контуры мочевого пузыря ровные, дефектов накопления не определяется. Радиоизотопная ренография. Снижение секреторной функции слева на 197. Справа дефицита нет.4 Б Эвакуация препарата удовлетворительная. Анализы крови и мочи без особенностей,Диагноз: у больного аденома простаты 1 степени, остаточные явления хронического простатита. БОТаким образом, у больного содержание ранних Е-РОН в периферической крови увеличено в 2 раза, однако, относительное и абсолютное содержание Фагоцитирующих Е-РОН и АФП на 507. ниже, чем в норме, Фи также достоверно ниже. Снижение этих показателей является результатом хронического воспалительного процесса с относительным 46 8эффектом в лечении. Больному назначено консервативное лечение.П р и м е р 5. Больной С., 84 года. Поступил в урологическую клинику, Жалобы на учащенное мочеиспускание, жажду, сухость во рту. Симптом Пастернацкого слева и справа отрицательный. Простата увеличена в 2,5 раза с четкими контурами, безболезненна, бороздка не выражена.Урограмма, На обзорном снимке теней конкрементов нет. Функция почки удовлетворительная, нарушения пассажа мочи и деформации чашечнолоханочной системы нет, Анализы крови и мочи без особенностей.Для восстановления нормального пассажа по нижним мочевым путям пока" зано оперативное лечение - аденомэктомия. Диагноз: аденома простаты, хронический пиелонефрит.Иммунологические исследования: лейкоциты 5700 в 1. мкл, палочкоядерные нейтрофилы 171 в 1 мкл (3%); сегментоядерные нейтрофилы 3135 в 1 мкл (557.); эозинофилы 285 в 1 мкл (57.); лимфоциты 1083 в 1 мкл (19%); монолиты 456 в 1 мкл (87.); Е-РОНР 969 в 1 мкл (17%); содержание фагоцитирующих Е-РОН. 416,6 в 1 мкл (43%); ФИ 4,1; АФП 1708,0 в 1 мкл.Одноэтапная аденомэктомия, Состояние больного соответствует тяжести перенесенной операции.9.07.84. Иммунологические исследования: Е-РОНР 4857,1 в 1 мкл (837); количество Фагоцитирующих ранних Е-РОН 1262,8 в 1 мкл (26%); ФИ 2,0; АФП 2525,6 в 1 мкл.По клиническим данным у больного острый правосторонний эпидидимит,отемпература тела 38 С.Иммунологические исследования: Е-РОНР 5179 в 1 мкл (547.); количество фагоцитируюгих Е-РОНР - 517,9 в 1 мкл (107); ФИ 2,8; АФП 1450,8 в 1 мкл.Лейкоциты 10900 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы 6546 вмкл (6%); сегментоядерные нейтрофилы 8829 в 1 мкл (817); эозинофилы 109 в 1 мкл (1%); лимфоциты 1199 в 1 мкл (117); моноциты 109 в 1 мкл (1%).Рекомендована стимулирующая тера-. пия. У больного состояние по клиническим и лабораторным данным с тенденцией к улучшению. Однако, рана 4 3 2 в области машонки с некроти9746 Составитель Н. ХрусталеваРедактор Т. Парфенова Техред Л.Сердюкова Корректор А.Обручар Заказ 651/48 Тираж 776 Подписное ВНИЮИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 7 135ческим дном. Рана 4 3 2 вяло гранулирует, Проведен курс стимулирующей1терапии декарисом.Иммунологические исследования:К-РОНР 4783,2 в 1 мкл (732); содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН2965,5 в 1 мкл (62 ); ФИ 4,3; АФП12757,6 в 1 мкл.Лейкоциты 9100 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы 546 в 1 мкл (б );сегментоядерные нейтрофилы 6006 в1 мкл (66 ); эозинофилы 819 в 1 мкл(9 .); лимфоциты 1274 в 1 мкл (14 );моноциты 546 в 1 мкл б .Состояние удовлетворительное,свищ закрывается, рана активно гранулирует 2 0,8 1,5.Иммунологические исследования:Е-РОНР 1560 в 1 мкл (1 З ); содержа-.ние фагоцитирующих ранних Е-РОН639,6 в 1 мкл (41 ); ФИ 4,3; АФП2750,2 в 1 мкл.Лейкоциты 12000 в 1 мкл; палочкоядерные нейтрофилы 120 в 1 мкл (1 );сегментоядерные нейтрофилы 6600 в1 мкл (55 ); эозинофилы 360 в 1 мкл(З ); лимфоциты 3600 в 1 мкл (30 );моноциты 1320 в 1 мкл (11 ).Свищ над лоном закрылся, рана вмащонке зажила. Больной выписан домой,Таким образому больного в результате осложнения - острого правостороннего эпидидимита потребовавпегогемикострации и длительно незаживающей раны (несмотря на высокое содержание ранних Е-РОН) имело место подавление их абсолютного и относительного числа фагоцитирующих клеток и 1 О ФИ, что потребовало проведения курсастимулирующей терапии. В результателечения увеличилось абсолютное и относительное содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН в 5,5 раза и ФИ 15 2 раза, АФП увеличилось в 8 раз.В результате активного фагоцитозарана стала интенсивно гранулировать,нормализовались клинические и иммунологические показатели и больной в 20 удовлетворительном состоянии выписандомой. Нормализация формулы крови, данные бактериологических исследований 25 и положительная клиническая динамикане всегда являются абсолютными критериями излечения. Содержание показателей, характеризующих функциюранних Е-РОН в периферической крови 30 больного, указывает на неполное излечение, что подтверждалось обострениемвоспалительного процесса.