Способ определения келлина

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЕЛЛИН Недостаток извес остоит в его невыс ельности 6 мкг/мл ости. Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения лекарственного препара) . ( та-метил,3-диметоксифуро. 4,56,7"1 хромон-келлина, и может быть применено для анализа этого соединения в различном материале, необходимом для клинических исследований и лекарственных форм.Известен способ определения келлина, основанный на использовании полярографии 1,ого способаой чувствии неизбиратель е вит ба. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения келлина путем растворения анали" зируемого вещества в хлороформе с последующим измерением интенсивности флуоресценции полученного раствора в качестве органического растворителя используют хлороформ и после растворения измеряют интенсивность флуоресценаии полученного раствора.Предлагаемый способ позволяет без отделения от сопутствующих ингредиентов проводить количественное определение келлина в сложных лекарственных формах, а выСокая чувствительностьО, 1 мкг/мл ) и избираого сп вствит статком д невысокая соба явльность длагаемому достигаспособ растворе- а в этаием оптиго растора 1 21. ляется чу 25 мкг/мл,.Наиболее близким к пре по технической сущности и емым результатам является определения келлина путем ния анализируемого вещест ноле с последующим измере ческой плотности полученн зобретения - повышение чув.ости и избирательности спо.968714 Установлено, что интенсивность Флуоресценции келлина в хлороформе не изменяется 2 ч, Показано, что зависимость интенсивности флуоресценции келлина в хлороформе ( с=10 мкг/мл ) от рН остается посто о янной в интервале рНа 3-7, Спектр возбуждения флуоресценции лежит в области от 320 до 380 нм с максимумом 350 нм, и спектр излучения Флуоресценции - от 375 до 520 нм с максимумом 460 нм. Прямолинейная зависимость между интенсивностью Флуоресценции и концентрации келлина соответствует 0,1-70 мкг/мл келлина,20 Табли ца 1 Найдено келлина Навеска мелкоизмельченных таблеИетрологическиехарактеристики по калибровочному графику,мкг/мл в таблетках, г ток, г Х = 0,0208 0 0213 0,0206 0,0221 0,0214 0,02110,0212 . 0,0209 0,0212 0,0212 0,0193+16 9 10-4 Е =+12,7 10 40,9 32 а = 0,0208+12,710 31 27 0,020,020,00025 тельность позволяет использоватьего для количественного определениякеллина в биожидкостях./ П р и м е р 1. Количественноеопределение келлина. 0,0591 0,0584 О, 0561 0,0563 0,0540 0,0517 0,0503 0,0491 0,04760,0450 П р и м е р 2. Определение келлина в таблетках келлатрина следующего состава; КеллинПапаверина гидрохлоридАтропина сульфат Тбмную навеску мелкоизмельченной таблетки ( 0,05 г/ помещают в мерную колбу на 100 мл, Прибавляют 80 мл хлороформа и энергично встряхивают 5- 1 О мин, добавляют хлороформ и перемешивают, К 3 мл данного раствора прибавляют 7 мл хлороформа, встряхи" вают и измеряют интенсивность Флуоресценции, Содержание келлина рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 1,0; 3,0; 5,0; 7,0 и 10 мл стандартного раствора келлина в хлороформе с содержанием 100 мкг/мл, доводят все растворы до 10 мл хлороформом., взбалтывают и флуориметрируют одновременно с раствором исследуемых образцов, По результатам этих измерений строят калибровочный график. Результаты количественного флуориметрического определения келлина в таблетках по 0,02 г представлены в табл,1. Точную навеску (0,05 г ) мелкоиз- .мельченной таблетки помещают в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 30- ф 50 мл хлороформа, энергично встря- Ихивают 5 мин, добавляют хлороформа до метки, перемешивают, К 3 мл данного раствора прибавляют 7 мл хлоро.5 968714 фФорма и измеряют интенсивность флуо Результаты количественного флуоресценции. Содержание келлина рассчи- риметрического определения келлина тывают по калибровочному графику в таблетках келлатрина представленысм.пример 1 ). в табл.2. Таблица 2 Навеска мелкоизмельченных табпеток, г Найдено келлина Метрологические характеристики по калибро.вочному граФику, мкг/мл в таблетках, г Ютт тШВ Х = 0,0201 О, 0621 О, 0196 О, 0216 0,0197 0,0202 0,0201 0,0207 0,0205 0,0190 0,0594 0,0581 б =+14 7" 10-4 Е =+11,1 1 О 4 09630 28 0,0202 0,0195 27 П р и м е р 3. Определение келлина в таблетках викалин следующего состава:Висмут основной 0,35Магния карбонатосновнойНатрия гидрокарбонатПорошок аира и корыкрушины 0,025Рутин и келлин 0,005Точную навеску ( 0,1 г) мелкоизмельченной таблетки прмещают в мернуюфф 0,4 0,2 Т а б л и ц а 3 Навеска мелкоизмельченных таблеток,г Найдено келлина Метрологическиехарактеристики по калибровочномуграфику,мкг/мл в таблетках,г.0,0049 0,0046 12 О, 1219 0,1173 Х = 0,0047 0;0534 а,а 511 О,О 504 0,0492 0,0473 О, 0451 0,0449 колбу емкостью 50 мл, прибавляют 30 мл хлороФорма и энергично встряхивают 5 мин, добавляют хлороформа до метки, перемешивают. 1 О мл данного раствора переносят в кювету и измеряют интенсивность Флуоресценции.Содержание келлина расчитывают по калибровочному графику ( см.пример 1Результаты количественного Флуориметрического определения келлина в таблетках викалин представлены в табл.3.968714 Продолжение табл. 3 Найдено келлина Навеска Иетрологические.характеристики мелкоизмельченных таблеток, г по калибро вочному графику, мкг/млееФ 4 ФюЮЮ Ю в таблетках,г0,1144 0,0043 10 0,0044 б =ф 28,210 10 О, 1121ЪО, 1118 10 0,0044 0,0051 0,0052 0,0051 0,0044 0,0047 Е = 21,210 В О 1075 0,1051 0,0978 0,1009 0,0957 а = 0,0047+21,2 10 10 9 формула изобретения Способ определения келлина путемрастворения анализируемого веществаи в органическом растворителе, о т л ич а ю щ и й с я тем, что,с цельюповышения чувствительности и избирательности способа, в качестве органического растворителя используют4 в хлороформ и после растворения измеряют интенсивность Флуоресценцииполученного раствора.Источники информации,принятые во внимание при экспертизеаэ 1. Орлов Ю.Е., Дзюба П.П. Опре"деление келлина полярографическимметодом. -" Аптечное дело", 1965,с.52-53,2. Келлин - стандарт, ФС 42-956-75(прототип).тель А.ЖидиковаИ, Тепер Корректор О.Билак Предложенный способ в 60 раз чувствительнее известного, что дает возможность эффективно использовать его при биофармацевтических и других биохимических исследованиях для разработки оптимальнойСоставиРедактор П.Коссей Техред Заказ 8157/72 Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Иосква, 3-35, Раушская наб д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,П р и м е р 4. Определение келлина в крови и мочеискусственная смесь).К 1 мл плазмы крови или мочи, содержащей 30 мкг келлина, прибавляют5 мл Фосфатного буферного раствора с рН 6-7, 10 мл хлороформа, перемешивают 5 мин. Центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин. Хлороформный слой сливают в выпарительную чашку, экстрагирование повторяют, выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют 10 мл хлороформа,флуориметрируют одновременно со стандарт ными растворами келлина с содержанием 1,0; 3,0; 5,0; 7,0 и10,0 мкг/мл в хлороформе. лекарственной дозы .и ритмах их назначения.