Способ получения белковой основы микробиологических питательных сред

ОП ИС АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(и 958499 Союз СоветскиаСоциалистическихРеспублик нительное к авт. саид-ву(53)М 54405/28 -С 12 20 дарстааиеИ комитет СССР делам изобретений и открытий(71) Заявитель сесоюзный научно - исследовательский биоте и петит 4) СПОС МИКРОБ ОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВОЙ ОСНОВЫОГИЧЕСКИХ ПИТАТЕЛЪНЫХ СРЕД Л, Г, Бендас, О, Н. Альб Т. И. Хвостенко и О Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получениябелковой основы для производства бактериальных питательных сред.Известен способ получения белковой осно 5вы микробиологических питательных сред путемферментативного гидролиза биомассы хлореллыс последующим отделением целевого продукта 11.Однако известный способ обеспечивает недостаточно высокий выход аминного азота(выход аминного азота составляет 5000 Мгна 1 кг хлореллы),Цель изобретения - повышение выходааминного азота. 35Указанная цель достигается тем, что приосуществлении способа получения белковойосновы микробиологических питательныхсред путем феряентативного гидролиза биомас.сы хлореллы с последующим отделением целевого продукта, биомассу хлореллы предвари.тельно разводят водой в соотношении 1;10,затем кипятят в течение 2 - 5 мин, а гидролиз ":проводят последовательно целлоконингинбм Г - 3 х в концентрации 5 - 7% в течение 3 - 4 ч и протосубтилином Г - 10 х в концентрации 0,8 - 1,6% хлореллы в течение 5 - 6 ч.Способ осуществляют следующим образом.Сухую биомассу хлореллы заливают водо.проводной водой в соотношении 1:10 с целью увеличения проницаемости клеточных оболочек и денатурации белка и кипятят в течение 2 - 5 мин. Затем полученную смесь охлаждают до 45-47 фС, доводят рН до 4,7-5,0 раствором соляной кислоты в соотношении с водой 1:1 для создания в среде условий:необходимых для оптимального действия. ферментов и вносят фермент целлоконингин Г - 3 х, из расчета 5 г фермента на 100 г хлореллы (активность фермента 300 ед/г) .Гидролиз проводя: в течение 3 - 4 ч при интенсивном перемешивании и температуре 47 - 50 С. Затем в реакционную смесь вводят фер мент протосубтилин Г - 10 х (из расчета 0,8- 1,6% и асв хлореллы, активность фермента 70 ед/г), предварительно доводя рН до 6,0 - 7,0 20% -ным раствором МаОН, гидролиз про. должают. при тех же условиях еще 5 - 6 ч.3 958499ЗатеМ отделяют осадок центрифугированием при 7000 об/мин в течение 20 мин. Приготовленный по предлагаемому способу жидкий ферментативный гидролизат высушивают в распылительной сушилке при 7015 С на выходе и 19015 С на входе.Комбинированное действие фермента цел. локонингина Г - 3 х, обладающего разнообразным ферментатйвным комплексом и высокой активностью в отношении разрушения компонентов, входящих в состав клеточных оболочек хлореллы, и протеолитического ферментного препарата протосубтилина Г - 10 х (нейтральной протеазы), приводит к более глубокому гидро- лизу белков хлореллы и, соответственно, более высокому. Йыходу аминного азота из клеток,Для определения степени гидролиза клеток смесь центрифутируют, высушивают и в сухом гидролизате определяют выход растворимого белка и аминный азот.26 Ванные исследований влияния ферментативного гидролиза на выход растворимого белка и аминного азота при обработке сухой хлореллы фферментами целлоконингином Гх и протосуб. тилином Г - 10 х показаны в таблице.В таблице приводятся сравнительные результаты определения выхода аминного азота при использовании для гйдролнза хлореллы одного, протеолитического фермента (протосубтилина Гх) и двух ферментов, последовательно гидролизуюших клеточные оболочки и белок хлореллы (протосубтилина Гхцеллоконингина Г - 3 х).Из таблицы видно, что с использованием только протосубтилина Г - 10 х выход аминного азота на 10 г хлореллы составляет 510 мг, с применением 2 - х ферментных препаратов (про. тосубтилина Г - 10 х + целлоконингина Г - 3 х) выход увеличивается почти в два раза и составляет на 100 г асв хлореллы 850 мг аминного. азота, в то время как при использовании из. вестного способа для получения основы для питательной среды выход амннного азота составляет всего 500 мг на 100 г асв хлореллы,Предложенный способ позволяет повысить выход аминного азота до 8500 мг на 1 кг хлореллы по сравнению с известным 5000 мг/кг.Составитель С. МалютинаТехред Т, Фанта Корректор Г. Огар Редактор М, Келемеш Тираж 505ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Заказ 6983/37 Подписное Филиал ПИП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 7 958499 8Формула изобретения 2 - 5 мин, а гидролиз проводят последовательноцеллоконингином Г - 3 х в концентрации 5 - 7 %Способ получения белковой основы микро. в течение 3 - 4 ч и протосубтилином Г - 10 хбиологических питательных сред путем фермен. в концентрации 0,8 - 1,6% хлореллы в течениетативного гидролиза биомассы хлореллы с по 5 - 6 ч,следующим отделением целевого продукта,. о т л и ч а ю щ н й с я тем, что, с целью Источники информации,повьппения выхода аминного азота, биомассу принятые во внимание при экспертизехлореллы предварительно разводят водой в 1, Авторское свидетельство СССР Х 147295,