Способ диагностики опиомании

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик и 944545(51)М. Кд. А 61 В 10/00 евеударстеенный квинтет СССР но делам нзебретеннй н втхрытнй(088.8) Дата опубликования описания 23.07,82 Т.В.Чернобровкина, И.Н.Пятницкая, Н,Ии Н.Г.Найденова ежа;В-,И.; ИвановЬ 1.тК1 , ;т(72) Авторы изобретени ТЕХН:и" .МБЯВаицинский2-ой Московский ордена Ленина государ институт им. Н.И. Пирог(71) Заявител Й) СПОСОБ ДИАГНО ПИОМАНИИ Изобретение относится к медицине,а именно к наркологии,Известен способ диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови 1.Однако известный способ не обеспечивает выявление хронической формызаболевания, так как исследованиесыворотки крови не всегда позволяетвыявить отклонения биохимических идругих показателей от нормы.Цель изобретения - выявление хронической формы заболеваний.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови в сыворотке крови определяют общую активность гамма-глу".тамилтрансферазы и ее изоферментныйспектр и при отсутствии одной нор- .мальной изоферментной фракции и на"личин хотя бы одной из аномальныхфракций на Фоне нормальной общей активности фермента диагносцируютхроническую интоксикацию опиа 1 ами.Способ осуществляют следующимобразом.При осуществлении способа определяют в сыворотке крови общую активность гамма-глутамилтрансферазы( ГГТ) любым иэ известных методов,а также изоферменты ГГТ методомэлектрофареза в полиакриламидномгеле (ПААГ).Материалом биохимического исследования служит негемолиэированная сы-воротка крови (5-10 мл), взятая из 1 локтевой вены натощак, После образования сгустка(путем инкубации при37 оС в течение 15 мин ) сыворотку отделяют повторным центрифугированиемпри 3000 об/мин в течение 10 мин.Определение общей активности ГГТпроводится спектрофотометрическим методом, активность рассчитывают поскорости образования паранитроанали45 50Ь 3 94на (длина волны 410 нм) и выражают вМБ нв л сыворот ки,Определение изоферментов ГГТ всыворотке крови проводят с помощьюэлектрофореза в 7-ном ПЯАГ, приготовленном на 0,09 М трисборатномбуфере, рН=8,6. Этот буфер применяют в качестве электродного, Дляэлектрофореза используют вертикальную пластмассовую камеру (2 х 10 х 80 мм)с плоскими прямоугольными ячейками,удобными для денситометрии. На столбик геля наносят 0,1 мл сыворотки,плотность ко 1 орой увеличивают предварительным добавлением к образцу10 мг сахарозы. Электрофорез проводят при температуре тающего льда,при силе тока 2 щА на каждый гелевый столбик в первые 25 мин и 5 вАв последующие 1,5 ч. Электрофорезпрекращают через 30 мин после выходамаркерного красителя бромфеноловогосинего, наносимого одновременно ссыворотками на контрольную гелевуюдорожку для Фиксирования подвижностиионного Фронта, в нижнюю камеру сбуфером. По окончании электрофорезагели скеннируют при 410 нм .и полученные скеннограммы (без выявления областей ГГТ) служат контролем на присутствие билирубина и других примесей, поглощаощих в этой областиспектра. Для выявления изоферментовГГТ в гелях проводят ферментную реакцию. Инкубационная смесь при этомсодержит субстрат гамма- глутамилпаранитроанилид (4,4 мМ) и акцепторглицил- глициловый буфер (,0,55 М,рН 8,3). Через 60 мин инкубации гелевых полосок в указанной смеси при37 С развивается желтое окрашиваоние отдельных участков геля, свидетельствующее о локализации в нихпродукта реакции - паранитроанилина.После этого гелевые полоски повторно скеннируют при 410 нм и для выявления белковых Фракций сыворотки полоски окраиивают 0,23-ным растворомамидового черного в течение 20 мин.Отмытые в 7;-ной уксусной кислотегели скеннируют при 650 нм. Локализацию каждой изоферментной зоныГГТ для данного образца сыворотки определяют и обозначают соо 1 ветственно расположению белковых фракцийтого же образца сыворотки. Максималь,ное количество фракций ГГТ - пясть.1Относительные величины активностикаждой из них рассчитывают по соответствующим площадям под кривыми на скеннограммах.Полученные результаты сравнительного обследования 71 пациента сведены в таблицу. Образцы изоферментного профиля ГГТ в сыворотке 9 больных опиоманией сопоставлялись с образцами 30 нормальных, практически здоровых лиц аналогичной возрастной 10 группы и 32 больных хроническим алкоголизмом. Диагностика опиомании основывается на выявлении определенного сочетания признаков, а именноналичие нормальной общей активностиГГТ ( 20,2+1,6 Ед/л , обязательногоотсутствия ( Р 0,001) нормальной изо ,.ферментной фракции 3. и обязательного присутствия хотя бы одной из.изоферментных фракций А Л 4не присутствующих в нор,П р и м е р 1. Больной А-в, 32 года, задержан в аптеке при попыткеприобрести ампулы с морфием по поддельным, рецептам. На следствии отд 5 рицал употреблением опиатов, утверждая, что выполнял просьбу малознакомого человека получить ему какое-толекарство. Осмотр психиатра не привел к определенному суждению. Больной был направлен на стационарнуюэкспертизу. Исследования крови испытуемого обнаружило: общая активность ГГТ - 34,8 Ед/л. отсутствие Айи присутствием изоферментных фракций,., Ли ) , что позволяет диагностировать опиоманию. Узнав орезультатах исследования крови, указывающих на злоупотребление опиатами, больной дал исчерпывающиесведения о своей наркотизации.П р и м е р 2. Больной Н-й, 27лет, направлен на экспертизу в связис аварией, совервенной в состоянииопьянения неясного происхождения.При обследовании обнаружены следы недавних инъекций, облитерация вен. Наблюдение в,стационаре не выявило бесспорных признаков хронической интоксикации наркотиками (абстинентный синдром, влечение и др.),Обсле" дуемый категорически отрицал употребление наркотических средств, апоражение вен объяснял как следствиепродолжительного самолечения витамина. Исследование крови ( общая активность ГГТ " 20,2 Ед/л, отсутствиеизоферментных Фракцийс и Ли присутствие Фракций . , Ли Л)и вэтом случае подт вердило предположе5 9445ние психиатров с хронической наркотиэации препаратами опия.П р и м е р 3, Больной Б-н, 37влет, на экспертизу поступил гю собственной инциативетребуя пересмотреть ранее выставленный диагноз"морфинизм". В первую неделю наблюдения наркологами признаков зависимости выявить не удавалось, хотя картина крови общая активность ГГТ - 1 о23,0 Едал, отсутствие иэоферментныхфракций Л,.1,и ,1.и присутствиеФракций Ли Л) указывала на наличие хронической интоксикации опийны",ми препаратами. В дальнейием выяснилось, что, поступая в стационар,больной заранее обеспечил себя омнопоном, который хранился у его друзейнаркоманов, находящихся в отделении.Более строгая изоляция больногопривела к развитию остного расстройства здоровьяастинентный синдром),что обьяснило наличие в крови больного характерных для опиомании изменений. 15П р и м е р 4. Больной С-в, 18лет, направлен на экспертизу Военкоматом, так как при очередном выве заявил, что он наркоман,эад о том, что на протяжениирегулярно "колется", демонровал следы инъекций и т.Исследование крови (общая актГГТ - 16,0 Ед/л, отсутствие иментных фракций 3,.1, Л и Лсутствие Фракцийи Л) иисключить употреблейие препаропия заррасска- Таким образом, предлагаемый спо 2 лет зз соб существенно повыаает достоверстри- ность диагноза опиомании, выполне"и. - нии в амбулаторных условиях не треивность буст госпитализации больного, моэофер- жет быть использован в качест ве наи при" дежного теста на скрываемое элоупот 35озволяет ребление опиатами и позволяет выя-.атов вить опиоманию в начале формирования заболевания. Больные хроническим алкоголизмом и=32 Больныеопиоманиейп=9 Донорып=30 Фермент 50, 1+6,4 19,1 26, 313,2 10,8 0,001 сО,ГГТ Иэоферментная Фракция Р +4с 0,001 Изоферментныефракции1, .1,Л с 0,001 с 0,001 Р (0,0(5 Общая, Ифп 20,2+1,6акти вност ь 9,6 бП р и и е р 5. Больной И-в, 15 лет, доставлен в больницу в состоянии наркотического опьянения. Лабораторное обследование в стационаре не обнаружило хронической интокси" кации опиатами (общая активность ГГТ - 18,5 Бд/л), присутствие изоФерментной Фракции Л и отсутствие всех других фракций), Клинические данные и опрос близких подтвердил разовый прием больным наркотических средств, хотя сам больной давал сведения о имеввем место длительном употреблении опийных препаратов, Дальнейшее наблюдение психиатров дало основание для гюстановки диаг" ноэа "щизофрения".Приведенные примеры иллюстрируют то, как сложны для распознавания клиническими методами случаи опиомании и симуляции наркотизации могут быть диагностированы или, соответственно, опровергнуты с помощью предлагаемо" . го способа в амбулаторных условиях без необходимости не только содер-жать больного, но иотрывать его от работы.944545 Формула изобретения Составитель Л.Соловьев Техред М. Рейвес Корректор И,Муска Редактор Г,Волкова Заказ 5183/2 тираж 714 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Н, Раушская наб., д.4/5филиал ППП "Патент", г,ужгород, ул.Проектная,4 Способ диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью выявления хронической формы,заболевания, в сыворотке крови определяют общую активность гаммаглутамилтрансферазы и ее изоферментный спектр и при отсутствии одной 8нормальной изоферментной фракции иналичий хотя бы одной из аномальныхфракций на Фоне нормальной общей активности фермента диагносцируют хроническую интоксикацию опиатами.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Пятницкая И.Н. Клиническая наркология, И., "Медицина", 1975,с.208-210,