Способ получения 4-дезокси-4-амино-эритромицина а

Сова Советских Социалистических РеспубликОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК ПАтЕНтУ оц 886749/2776608/23-04 (23) Приоритет 03.02.78 (32) 04,02. 77 Государственный комитет СССР оо делам изобретений и открытий(53) УДК 547 455 ,07(088.8) Иностранец Фрэнк Кристиан Сиаволино(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 4 -ДЕЗОКСИ-АИИНО-ЭРИТРОИИЦИНА А соеди не ни е фор мулы Ь фЬгу Ь-0 СОСКС де А ичес ли тст винс послст вии Исх ет бы седин(61) Дополнительный к патенту Изобретение относится к способуполучения новых производных эритромицина А, обладающих ценными фармакологическими свойствами.Известен синтез производных эритромицина А, основанный на реакции каталитического восстановления оксимов Г 1,Цель изобретения - получение новых, полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия наживой организм,Поставленная цель достигается тем,что в способе получения 4 л -дезокси-амино-эритромицина А формулы ацетил, подвергают каму восстановлению в приикеля Ренея в изопропандующим гидролизом в приметанола.дное соединение формулыь получено путем взаимодния формулы3 88с диметилсульфоксидом или трифторуксусным ангидридом с последующим контактированием реакционной смеси стриэтиламином, или с Й-хлорсукцинимидом и диметилсульфидом с последующимконтактированием реакционной смеси стриэтиламином.Продукт выделяют путем отфильтровывания отработанного катализатора иудаления растворителя в вакууме, Остаток последовательно обрабатываютводой и основной продукт отделяют отнеосновных путем экстракции из воды,изменяя величину рН.Катализатор (никель Ренея) можноиспользовать в различных количествах,в зависимости от быстроты проведенияреакции, например 10-200 вес.3 от веса исходного соединения .,На скорость реакции также влияетдавление газообразного водорода вреакторе гидрирования. Для обеспечения обычного времени протекания реакции предпочтительно давление 7,03 кг/смКроме того, восстановление удобнеепроводить при температуре окружающейсреды.Время реакции зависит от многочисленных факторов: температуры давле"ния, концентрации и характеристических вязкостей реагентов. При проведении в указанных выше условиях, реакция завершается в течение 12-24 ч. Гидролиз 2 -ацетильнбй группы из сост вет ст вующе го произ водного 2 - аце отил-дезокси-амино-эритромицина А можно осуще ст вит ь, если оставит ь раствор указанного соединения в метаноле выстаиваться при комнатной температуре в течение ночи.При выделении целевого 4 -дезокси1-амино-эритромицина А из неосновных, побочных продуктов или исходных соединений необходимо учитывать основную природу конечного продукта. Водный раствор продукта экстрагируют в интервале постепенно возрастающих величин рН, так что нейтральные или не- основные продукты экстрагируются при более низких значениях рН, а целевой продукт - при значениях рН, превышающих 5, Растворитель для экстракции (хлороформ) промывают солью и водой и сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя получают целевой продукт. В случае необходимости проводят дополнительную очистку с помощью колоночной хроматографии на 5 о 15 2 О 25 зо 35 4 О 45 5 О 55 силикагеле в соответствии с известными методиками.Амины формулы 1 обычно разделяют с помощью селективной кристаллизации иэ диэтилового эфира. Стереохимия исходных материалов, приводящих к получению антибактериального агента, такая же, как и у природных материалов. Окисление 4"-гидроксильных групп в кетоны и последующее превращение последних в 4-амины позволяет произво дить стереохимическое изменение 4- -заместителя по сравнению с природным . продуктом. Когда же соединение формулыпревращают в амины по вышеописанной методике, возможно образование двух эпимерных аминов. Оказывается, что оба эпимерных амина присутствуют в конечном продукте в различных соотношениях, которые зависят от выбранного способа синтеза. Если выделенный продукт содержит преимущественно один из эпимеров, то этот эпимер можно очистить путем повторной перекристаллизации из подходящего растворителя до постоянной точки плавления.Хотя указанную смесь эпимеров можно разделить с помощью известных способов, выгоднее использовать ее в том виде, в котором ее выделили из реакции. Однако часто предпочтительнее очистить смесь эпимеров с помощью по крайней мере одной перекристаллизации из соответствующего растворителя, а затем - с помощью колоночной хроматографии высокого давления, распределения между растворителями или растирания в соответствующем растворителе.Указанная очистка, если нет необходимости в разделении эпимеров, приводит к удалению исходных соединений и побочных нежелательных продуктов,Оба эпимера указанного соединения обладают одййм и тем же типом активности, т,е. активностью в- качестве антибактериальных агентов.И цПредлагаемый 4 -дезокси-амино-эритромицин А демонстрирует и ч 1 го активность против различных грамположительных микроорганизмов, например ЯСогру 1 ососсцэ ап гецэ и Ьй гер 1 ососсцэ апгецэ, и против некоторых грамотрицательных микроорганизмов, например сферической или эллипсоидальной формы (кокки) . Его активность подтверждается при и чСго испытаниях против различных микроорганизмов в сердечно-мозговой вытяжке в качестве86749 Ь 43 5 О 55 5 8 среды с помощью обычной методики двукратного серийного разбавления. Активность 1 и ч 1 сго делает его полезным при наружном применении в виде мазей, кремов и т,п., при стерилизации, например предметов в комнате больного, и в качестве промышленных антимикробных препаратов, например при обработке воды, слизистых поверхностей, для предохранения красок и де рева.При использовании 1 п ч 1 сго, например, для наружного применения желательно соединять выбранный продукт с т аким фар маце вти че ски приемлемым носителем, как растительное или минерал ное масло или мягчительные кремы, Его можно также растворить или диспергировать в жидких носителях или растворителях, таких, как вода, спирт, гликоли или их смеси, или в других фармацевтически приемлемых инертных средах, т. е. таких, которые не оказывают вредного воздействия на активные ингредиенты, Для этого используют концентрации активных ингредифентов в пределах от 0,01 до около 10 вес.3 в расчете на всю композицию.Кроме того, предлагаемое соединение является активным против грамположительных и некоторых грамотрицательных микроорганизмов, например Разйецге 1 1 ц щц 1 ос 1 е 1 о и Не 1 ззег 1 оз 1 сса 1 и ч 1 чо, при оральном и/или парэнтеральном приеме или при вве,дении животным и человеку, Их 1 п ч 1 чо активность более ограничена с точки зрения чувствительности организмов и ее определяют с помощью обычном методики, включающей инфицирование мышей одинакового веса тестовым организмом и соответственную обработку их при оральном или подкожном введении тестовых соединений. Например десяти мышам делают внутрибрюшинные прививки подходящих разбавленных культур, содержащих приблизительно от одной до десяти ЛД оо низшая концентрация организмов, приводящая к 100 Г-ному летальному исходу) . Одновременно проводят контрольные тесты, в которых мышам делают прививки более сильно разбавленных культур как проверку на возможные вариации в вирулентности тестовых организмов. Тестовое соединение вводят через полчаса после инокуляции и повторяют спустя 4, 24 и 48 ч. Выживших мышей выдерживают еще в течение четы 3 "е13 ь.го 23 3 О 35 ао рех дней после последней обработки и подсчитывают число выживших особей.При применении 1 л ч 1 чо предлагаемое соединение можно принимать орально или парэнтерально, например, при подкожных и внутримышечных инъекциях в дозах от около 1 до около 200 мг/кг живого веса в день, желательно от около 5 до около 100 мг/кг, но предпочтительно от около 5 до около 50 мг/кг живого веса в день.Растворителями, пригодными для парэнтеральных инъекций, являются такие водные среды, как вода, изотонический солевой раствор, изотоническая декстроза, раствор Рингера, или такие неводные среды,как жирные мас-. ла растительного происхождения (хлоп" ковое, земляного ореха, кукурузное кунжутное), диметилсульфоксид и другие неводные растворители, которые не влияют на терапевтическую эффективность препаратов и не оказывают токсическое действие в используемых объемах или пропорциях (глицерол, пр 8- пиленгликоль, сорбитол). Кроме того, с их помощью могут быть приготовлены композиции для импровизированного при. готовления растворов перед применением. Такие растворители могут включать жидкие разбавители, например пропиленгликоль, диэтилкарбонат, глицерол, сорбитол и т.д., буферные агенты, гиалуронидазу, местные анестезирующие средства и неорганические соли для того, чтобы получить желательные фармацевтические свойства. Предлагаемое соединение можно также соединять с различными фармацевтически приемлемыми инертными носителями, включая твердые разбавители, водные среды, нетоксичные органические растворители вформе капсул, таблеток, сухих смесей,суспензий, растворов, эликсиров ипарэнтеральных растворов или суспензий, Его используют в различных дозировках, причем уровень концентраций меняется от 0,05 до около 904 повесу от всей композиции,П р и м е р 1. А. 2 -Ацетило-дезоксио-амино-эритроми цин А.Смесь из 14,0 г 2 -ацетил"-де 11зокси-окси-эритромицин А о-ацетилоксима и 60 г промытого изопропанолом никеля Ренея в 400 мл изопропанола перемешивают в атмосфере водорода при первоначальном давлении 1000фунтов на кв. дюйм (примерно 70,3 атм)в течение ночи при комнатной темпера886749 го слоя доводят до 5 и хлороформовый слой отделяют. рН водной фазы последо вательно доводят до 5 5., б, 7, 8 и 9, и проводят экстракцию после каждого доведения рН с помощью 100 мл свежего хлороформа, Хлороформовые экстракты при рН 6, 7 и 8 смешивают, последовательно промывают водой и насыщенным солевым раствордм и высушивают над сульфатом натрия. Удаление раЧтворителя под пониженным давлением дает 2,9 г эпимерной смеси 4-дезокси 1(-4 -амино-эритромицина А. Образец смеси в количестве 1,9 г растирают с диэтиловым эфиром, вызывая кристаллизацию части нерастворенной пены. Твердое вещество отфильтровывают и высушивают, получая 67 мг единственного эпимера 4 -дезокси-эритромицина11 . ИА с тоцкой плавления 140-147 С. формула изобретения Н 01оНО 0/1 ХОСЯМий ся тем, что соотли чаю динение формул Жз) О где Ас - ацетил тическому восст пропанола в при с последующим г ствии метанола,Источни принятые во вни 1. Каррер П. химии. Л., 1960 Тираж 400 Пподвергают каталиановлению в среде изо сутствии никеля Ренея идролизом в присутки информ мание при Курс орг с. 161. одписноеии,кспертизеической туре. Катализатор отфильтровывают ифильтрат концентрируют до белой пены,Остаток повторно растворяют в 400 млизопропанола и смешивают с 50 г промытогоо и зопропа нолом с веже го ни келяРенея,Гидрогенизацию проводят в течениеночи при комнатной температуре и припервоначальном давлении водорода1000 фунтов на кв. дюйм. Катализатор 10отфильтровывают и фильтрат концентрируют под вакуумом досуха. Получают8,1 г целевого продукта.В. 4 -Дезокси-амино-эритроми 1/цин А. 5Раствор 2,17 г 21 -ацетил"-дезокси-амино-эритромицина А в 50 млметанола оставляют перемешиваться прикомнатной температуре в течение ночи,Растворитель отгоняют под пониженнымдавлением и остаточную пену обрабатывают смесью из 50 мл хлороформа и50 мл воды . рН водного слоя доводятдо 9,5 и отделяют органический слой.Хлороформовый слой обрабатывают свежей 5водой и рН доводят до 4,0, рН кислотного водного слоя, содержащего продукт, постепенно доводят до 5, б, 7,8 и 9 путем добавления основания, причем при каждом значении рН проводят3экстракцию свежим хлороформом. Экстракты при рН б и 7 содержат основнуючасть продукта, их смешивают и обрабатывают свежей водой при рН 4. Водный слой снова доводят до рН 5, б и7, причем при каждом значении рН про 35водят экстракцию свежим хлороформом.Хлороформовый экстракт при рН 6 высушивают над сульфатом натрия и концентрируют, получая 249 мг целевогопродукта в виде эпимерной смеси,40ЯМР-спектр (о СОС 1) ". (1 Н) 5 3,30,. П р и м е р 2. 4/1-Дезоксиц-амино-эритромицин А (единственный эпимер) .45Раствор 10,0 г эпимерной смесиг.11 12 -ацетил-дезокси-амино-эритромицина А в 150 мл метанола оставляют перемешиваться при комнатной температуре в атмосфере азота в течение72 ч. Растворитель отгоняют под вакуумом и остаток раствоояют в перемешиваемой смеси из 150 мл воды и 200 млхлороформа. Водный слой сливают и добавляют 150 мп свежей воды. рН водноВНИИПИ Заказ 10607/89 Способ получения 4 -дезокси11 -амино-эритромицина А формулы 1 о = (снз)НО