Способ ингибирования изомеризации грляс-диэтилстилббестрола в кормовых составахдля животных

р 1) 4285 И ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК йАТЕНТУ Союз Советских Социалистических Республик(33) СШАОпубликовано Государственнай кометеСовета Министров СССво делам изобретенийч открытий 3) УДК 636.085.57,05.74, Бюлле Дата опубликования описания 2.11.74 2) Автор изобретения Иностранец Нельсон Генри Людвиг(54) СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ИЗОМЕРИЗАЦИИ ТРАНС-ДИЭТИЛСТИЛЬБЕСТРОЛА В КОРМОВЫХ СОСТАВА ДЛЯ ЖИВОТНЫХибиро- бестроИзобретение относится к способу инг вания изомеризации транс-диэтилстиль ла в кормах,По предлагаемому способу превращение транс-диэтилстильбестрола в цис-изомер в составах кормов для животных можно в значительной степени ингибировать или в основном даже предотвращать и использовать его в качестве компонента корма для животных.11 редлагаемый способ отличается тем, что транс-диэтилстильбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и затем вводят в кормовые составы.Многие применяемые компоненты кормов для животных, например пшеничные зерна, соевая мука, ячменные зерна, гранулы из люцерны и другие подобные компоненты содержат вещества, растворяющие диэтилстильбестрол, например жиры растительного происхождения, ксантофиллы, спирты и т. п,По предлагаемому способу в составы кормов для животных избегают вводить остаточные растворители для диэтилстильбестрола и не придают значения выдерживанию диэтилстильбестрола в его природных растворителях, которые имеются в составе кормов для животных.Предлагаемый способ позволяет повыситьстойкость транс-диэтилстильбестрола в соста- Б вах кормов для животных, давая таким образом надежную гарантию того, что животным, принимающим корм, содержащий диэтилстильбестрол, попадает в основном транс-диэтилстильбестрол - физически активный изо мер. Таким образом, количество активноготранс-изомера в корме для животных повы- шаетсЯ от 65 оо от общего количества Усваигаемого диэтилстильбестрола, обычно содержащегося в корме для животных, до не менее 15 95%, т. е. повышается до максимального весового количества диэтилстильбестрола, вводимого в корм для животных.Преимущество способа в том, что сводит кминимуму опасность контакта рабочих с фи зиологически активным агентом, что обычнопроисходит при введении диэтилстильбестрола в составы для корма животных, Транс-диэтилстильбестрол является весьма сильнодействующим эстрагеном, который при попада нии на кожу и слизистую оболочку вызываетнежелательные вторичные женские половые признаки у лиц мужского пола. Поэтому необходимо принимать чрезвычайные меры пре5 1 О 15 го 25 зо 35 40 45 5 О 55 бо 65 3досторожности с целью защиты рабочих даже от незначительных количеств эстрагена. По предлагаемому способу перед употреблением диэтилстильбестрол рекомендуется смешивать с относительно крупными, сухими немаслянистыми частицами. Такие частицы меньше прилипают к одежде и коже рабочих, что значительно снижает опасность, связанную с работой с диэтилстильбестролом.По предлагаемому способу транс-диэтилстильбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, почти не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и используемого в качестве компонента кормов для животных. Рекомендуется, чтобы твердый носитель имел частицы такого размера, чтобы не менее 950/, их проходило через сито с размером отверстий 20 меш и чтобы не более 10 частиц проходило через сито с размером отверстий 60 меш, Эти размеры отверстий сит соответствуют размерам частиц 150 в 8 мк. Частицы такого размера могут содержаться и в негранулированном корче.Твердые инертные носители в виде частиц - минералы-носители содержат силикаты алюминия, кальция и магния, например слюду, гидробиотит, как в виде руды, так и чешуйчатый, тальк, пирофиллит, монтморилоноидные глины, каолинитную глину, аттапульгитную глину и т. п. В качестве инертного носителя особенно рекомендуется использовать чешуйчатый гидробиотит. Обычно такие минералы представляют собой смеси силикатов различных катионов, часто содержащие такие катионы, как катионы железа, титананатрия и калия, а также катионы алюминия, кальция и магния. Часто такие минералы содержат комплексы, имеющие более одного катиона внутри силикатной решетки, например гидробиотит (вермикулит). Однако более предпочтительным .катионом для силиката является катион кальция, магния или алюминия,Подходящими инертными носителями являются также диатомовые земли, как неиспользованные, так и в виде водных солей, Эти минералы в основном представляют собой кремнезем. Аморфная структура диатомовых земель является причиной неоднородности поверхности частиц, что позволяет этим минералам быть особенно пригодными для осаждения на них транс-диэтилстильбестрола, поскольку между неровной поверхностью и осажденным веществом образуется более надежная связь.Для инертных носителей пригодны также известняк, в том числе кальцит и доломит, и гипс, Другими минеральными материалами, подходящими для твердых носителей, являются карбонаты, хлориды, фосфаты и сульфаты натрия, калия, магния и кальция. Из этих соединений наиболее рекомендуемыми являются дикальцийфосфат, хлорид натрия и карбонат натрия, поскольку они обычно входят в сос;.ав корма для животных. 4В качестве инертных носителей для трансдиэтилстильбестрола можно также применять природные органические материалы, почти не содержащие веществ, которые растворяют диэтилстильбестрол. Такими материалами являются грубые корма, содержащие целлюлозу, например кукурузные кочерыжки, багасса сахарного тростника, высушенная измельченная меласса сахарной свеклы, высушенная шелуха от гороха, высушенная картофельная масса и т, п, Грубые корма, например приведенные выше, жвачным часто дают в пищу для стимулирования активности рубца, Эти сравнительно непитательные грубые вещества являются особенно рекомендуемыми носителями для транс-диэтилстильбестрола. В качестве твердых носителей можно также использовать, например экстрагированные растворителем и пропариванием костной муки крупяное зерно, полированный рис и т. п. Для стабилизации транс-изомера корма должны содержать менее 0,5 жиров, В том случае, когда корма содержат такие вещества, как сухие остатки после перегонки, рис, применяемый при пивоварении, высушенную лимонную мякоть, скорлупу от арахиса, рисовые отруби; их также можно использовать в качестве твердых носителей для транс-диэтилстил- ьбестро.Отложение транс-диэтилстильбестрола на твердых частицах инертного носителя, например приведенного выше, рекомендуется производить раствором транс-диэтилстильбестрола в подходящем растворителе путем разбрызгивания с последующим удалением растворителя выпариванием. Превращение в аисизомер происходит более медленно в одно- атомном С 1 - С-спирте или ацетоне, которые считаются наиболее рекомендуемыми растворителями. Скорость изомеризации возрастает с повышением температуры растворителя, поэтому .раствор рекомендуется выдерживать при комнатной температуре, В любом случае при нанесении транс-диэтилстильбестрола на носитель из жидкого связующего, в котором он хорошо растворим, в качестве такого связующего рекомендуется использовать летучий растворитель, который можно легко удалять.Транс - диэтилстильбестрол .рекомендуется растворять в метаноле, этаноле, н-пропаноле, изопропаноле или ацетоне при температуре окружающего воздуха в количестве 5 - 50 г на 100 мл растворителя. Этот раствор должен содержать 30 - 40 г транс-диэтилстильоестрола в 100 мл 95-ного этанола.Транс-диэтилстильбестрол смешивают с жидким связующим, например, диэтиловым, н-пропиловым, изопропиловым эфирами, С 5 - С 7-алканами, бензолом, водой и водными дисперсиями, содержащими 0,1 - 5/о метилцеллюлозы, натриевой карбоксиметилцеллюлозы, оксипропилцеллюлозы или поливинилпирролидона, и полученную суспензию диэтилстильбестрола наносят на любой из инертных носителей. При использовании жидкого связующе.428591 Отложение транс-диэтилстильбестрола из жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, приводит к образованию стабилизированной формы транс-диэтилсгильбестрола, который подмешивают в состав корма для животных, что позволяет эффекгивно задерживать превращение транс-диэтилстильбестрола в неактивный иис-изомер или значительно снижать скорость указанного превращения. Составы корма для животных, указанные выше, относятся к обычно применяемым составам твердых, предварительно смешанных кормов, кормовых концентратов, добавок к кормам, готовых кормов, комплексных рационов и т. п. Поскольку диэтилстильбестрол, вводимый в составы кормов .для животных, широко применяются в качестве стимулятора роста жвачных животных, большое значение придается тому, чтобы в указанных составах Таблица 1 Содержание цис.диэтилстильбестрола в люцеряовых смесях, содержащих 2 г диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси, выдержанных при темнературе 37 С в различные сроки времениСодержание иис-изомера в смесях, о,Инертный носитель для отложения трансдиэтилстильбестролаИсходнаясмесь 3 месяца 6 месяцев 2 месяца 1 месяц Диатомовая земляХлористый натрийКарбонат кальцияДикальцийфосфатОтслоения гидробиотитаОтслоения гидробиотитаТранс-диэтилстильбестрол в пропилекгликолеТранс-циэтилстильбестрол в пропилепгликоле,разбрызгиваемый на гранулы люцерны 9 7 3 2 5 10 13 7 3 .6 2 4 10 3 1 1 1 2 4 2 26 26 13 10Контрольная смесь - смесь, приготовленная по известному способу. По предлагаемому способу смесь транс-диэтилстильбестрола и инертного носителя, содержащую 0,22 - 22% транс-диэтилстильбест рола можно вводить в состав корма для животных в качестве компонента в количестве 0,1 - 5%. го, не являющегося растворителем, остаточный растворитель является менее подходящим, так что можно применять более стойкий растворитель. Для примера, 2 г метилцеллюлозы растворяют в 100 мл воды и при тщательном перемешивании в этот раствор добавляют тонкоизмельченный транс-диэтилсгильбестрол,Раствор или суспензию транс-диэтилстильбестрола, полученные как уже было указано выше, разбрызгивают на инертный носитель в виде частиц при перемешивании, что вызывает отложение транс-диэтилстилъбестропа в количестве 1 - 100 г на 453,6 г смеси инертного носителя и транс-диэтилстильбестрола. После нанесения транс-диэтилстильбестрола из летучего жидкого связующее выпаривают при 50 С под вакуумом. При использовании нелетучего жидкого связующего, например минерального масла, остаточная жидкость удерживается транс-диэтилстильбестролом и инертным носителем. 5 10 15 20 25 30 35 40 6можно было инги бировать превращение транс-диэтилстильбестрола в иис-изомер.Содержание иис- и транс-диэтилстильбесгрола в различных составах можно определять с помощью газо-жидкостной хроматографии производных бис-триметилсилилового эфира. Изомеры, содержащиеся в образце вступают в реакцию с избытком 9-бис- (триметилсилил)ацетамида в течение -20 мин и бисэфирное производное извлекают хлороформом. Хлороформный раствор вводят в газовый хроматограф и проводят определение при 220 С. Соотношение иис- и транс-изомеров определяют путем подсчета площади пиков соответствующих изомеров, очерченных самописцем. При работе с жидкими препаратами берут 3 капли образца и 0,5 мл О-бис-(триметилсилил) ацетамида. Реакция идет в течение -20 мин. Затем реакционный раствор разбавляют хлороформом до 5 мл и вводят в хроматограф. Для анализа твердых образцов берут 1 г препарата и избыток О-бис-(триметилсилил) ацетамид. Производное бис-триметилстилилового эфира экстрагируют хлороформом, разбавляют и вводят в хроматограф.Транс-диэтилстильбестрол осаждают из жидкого связующего на различные инертные носители в виде частиц в количестве 20 г на 453,6 г смеси. Полученный материал смешивают с гранулами люцерны и получают твердую смесь, содержащую 2 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси. Осаждение проводят из раствора 95%-ного этанола при 25 С, этанол упаривают под вакуумом при 50 С. Люцерновую смесь готовят обычным способом путем растворения транс-диэтилстильбестрола в пропиленгликоле при температуре 80 - 100 С, Полученный горячий раствор разбрызгивают на гранулы люцерны с получением 2 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси. Эту смесь также подвергают испытанию для сравнения.Компоненты 5 55106181428123 78926 20 4989 45360 3628 5443 2721262 635 635 25 Заказ 3301,/2 Изд.1686 Тираж 456 Подписное Сапунова, 2 Типография, пр. Обычная концентрация транс-диэтилстильбестрола, допустимая для животных, 0,5 - 20 мг на 453,6 г смеси с высоким содержанием питательных веществ. Носитель, инертный к транс-диэтилстильбестролу, смешивают с 5 гранулами люцерны, соевой муки или других продуктов и получают твердую смесь, содержащую 1 - 50 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г. Ее смешивают с кормовыми концентратами, добавками к кормам, готовым кор мом или полным пищевым рационам перед скармливанием животным. Полный высококалорийный рацион для крупногоскота 15 Желтая кукурузаКукурузные кочерыжкиЛюцерновая мука, влажность 17%Соевая мука после экстрагированиярастворителем, без отрубейМочевинаМеласса тростниковаяДикальцийфосфат пищевойКарбонат кальцияСольМикроэлементыВитамин А и Д, (смесь)аВитамин ЕСмесь микроэлементов содержит; 2,50% марганца в виде окиси марганца, 0,07% иода в виде иодистого калия, 0,30% кобальта в виде карбоната кобальта, 0,50"; меди в виде окиси меди и 20,00% цинка в виде сульфата цинка,а Каждые 45,6 г смеси содержат 2000000 ед. на 453,6 г витамина А и 227200 ед. на 453,6 г витамина на Д,П р и м е р, 100 г транс-диэтилстильбесгрола 40 растворяют в 350 мл 95%-ного этанола при 25 С. Раствор транс-диэтилстильбестрола разбрызгивают на 453,6 г отслоенного гидробиотита с величиной частиц 20 - 60 меш. Разбрызгивание производят с определенной ско ростью на взрывобезопасном месте, приспособленном для манипулирования с горячими растворителями. После окончания разбрызгивания спиртового раствора полученный препарат переносят на сушильные противни и 50 помещают в вакуумную печь с приспособлением для удаления горючих паров, затем упаривают этанол при 50 С. Через 1 час спирт полностью удаляется; 453,6 г сухого препарата содержат 100 г транс-диэтилстильбестро ла, В смеситель с ленточной лопастью загружают 22226 г гранул люцерны. При работающей мешалке в смеситель загружают 453,6 г смеси транс-диэтилстильбестрола и отслоенного гидробиотита, и смесь перемешивают в 60 течение 5 - 15 мин, Полученная таким образом смесь содержит 2 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси,Для получения полного кормового рациона, содержащего 0,5 мг транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси его с носителем, одну тонну полного рациона с компонентами, приведенными в табл. 2, загружают в подходящий смеситель, например в вертикальный смеси- тель, обычно применяемый для этой цели, и начинают операцию смешения, Добавляют 680,46 г люцерновой смеси, содержащей 2 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси его с носителем и смешивают в течение 5 - 15 мин. Полученный полный кормовой рацион, содержащий транс-диэтилстильбестрол. подают на форму для скармливания мясному крупному рогатому скоту в количестве 9072 г в день. В среднем на одну голову крупного рогатого скота приходится примерно 10 мг транс-диэтилстильбестрола в день. Предмет изобретения1. Способ ингибирования изомеризации транс-диэтилстильбестрола в кормовых составах для животных, отличающийся тем, что транс-диэтилстильбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, почти не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и затем вводят в кормовые составы,2. Способ по п, 1, отличающийся тем, что транс-диэтилстильбестрол осаждают в количестве 1 - 100 г на 453,6 г смеси инертного носителя и транс-диэтилстильбестрола.3. Способ по пп, 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является минерал, содержащий силикат магния, кальция или алюминия.4. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является диатомовая земля.5. Способ по пп, 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является карбонат, хлорид, фосфат или сульфат натрия, калия,магния или кальция.6. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является пищевое вещество, выбранное из измельченной кукурузной кочерыжки, багассы сахарного тростника, высушенной мелассы сахарной свеклы, кукурузной крупы, костной муки после экстрагирования растворителем, высушенной гороховой шелухи, высушенного картофеля и полированного риса,7. Способ по п. 3, отличающийся тем, что инертным носителем является отслоенный гидробиотит или аттапульгитная глина.8. Способ по п. 4, отличающийся тем, что инертным носителем является дикальцийфосфат,