Штамм бактерий pseudomonas aureofaciens для получения стимулятора роста растений

чИзобретение относится к микробиологическим средствам, стимулирующим рост и повышение урожая растениЯ, и касается нового штамма бактерий Рзецбоаопаз ацгео 1 ас 1 епз, предназначенного для производства биопрепарэта БПМ-Агат, способствующего повышению урожая растениЯ,В специальной научной литературе показано, что некоторые штаммы бактерий, в частности Рзецбоаопаз, обладают комплексом полезных для растений своЯств - стимуляция роста и развития растений, зэщита растений от различных фитопатогенов, улучшение минерального и водного питания растений, повышение урожая.Известен штамм Рзецбоаопэз зр ВПКМ 8-34481, способный повышать урожай ячменя на 17,4 по сравнению с контролем.В патентной и научно-технической литературе не известно штаммов Рзещ(оаопэз с широким кругом действия по способности повышать урожай растений.Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является получение нового штамма бактерий Рзецбоаопаз ацгеоГас 1 епз, обладающего способностью в составе биопредаратв стимулировать рост растений и повышать урожай,Штамм Рзецбеаопаз ацгеоФас 1 епз Н 16 выделен из ризоплана корневищ пырея ползучего с использованием селективной среды Кинга 8, Критериями отбора служили следующие свойстваспособность угнетать рост грибов, способность стимулировать прорастание семян растений, способность обеспечивать здоровое развитие растений и повышение урожая их при выращивании в условиях нативной почвы.Состав среды Кинга В, г/л:Пептон 20Глицерин 15МАЗО х 7 Н 20 1,5Агар 15Штамм Рзецбоаопаз ацгео 1 эсепз Н 16 депонировэн во Всесоюзной коллекциимикроорганизмов при ИБФМ АН СССР подномером ВД и хранится в коллекции Центра биозэщиты и биостимуляции растений СП Агат-кредит под Й 1.Штамм Рзецбоаопаз ацгеоГас 1 епз ВКМ ВЗД обладает следующими свойствами.Культурально-морфологические признаки,Грамм-отрицательные бактерии с размером (0,7-0,8) х (2,0-3,0) мкм, слабо подвижные, имеют один жгутик, аэробы, спор не образуют, Клетки прямые или слабо изогнутые, одиночные и в парах. Размеры клеток даны для односуточной культуры, выращенной на среде .8 при 30 С.Штамм хорошо растет как на твердых, 5 так и в жидких средах 1.8 следующего состава: 5 г дрожжевого экстракта, 10 г 1 чаС 1, 10 г бактотриптона нэ 1 л воды, для твердых сред добавляют 15 г эгера.Кроме этого, штамм хорошо растет на 10 среде Кинга В, как на твердой с добавлением агэрэ, так и в жидкой. Состав среды Кинга 8 г/л: пептон 20; глицерин 15; М 9301 х 7 Н 20 1,5.Штамм может расти на синтетической 15 соленой среде М 9, как на твердоЯ, так и вжидкой с добавлением глюкозы.Состав среды М 9:йэ 2 НР 04 беэв., г 6КН 2 Р 04, г 320 йаС 1, г 0,5МН 4 С 1, г 1Глюкоза 40, мл 50,1 М М 9504, мл 100,1 м СаС 12, мл 125 Тиамин, мкг/мл 5рН 68Также для выращивания штамма можетбыть использована жидкая или агаризованная мясопептонная среда и среда Альбит.30 Состав среды Альбит:. Отвар иэ проростковрастений, мл 100Спиртовой экстрактпроростков семян, мл 535 йаС 1, г 0,5Гидролизатказеина, г 10Н 20, л До 1рн 6,540 Колонии на МПА 2-3 мм в диаметре,круглые. гадкие, блестящие, пастообразной консистенции, желтовато-серые, среда вокруг колоний окрашена в желто-зеленый цвет эа счет диффузии флуоресцирующего пиг мента (пиовердина). При культивированиина некоторых средах (молоко, триптоэный агар, селективная среда с иргаэаном) в среду ваделяется желто-оранжевый феназино- выЯ пигмент, растворяемый в хлороформе.50 Культивирование на твердых средах осуществляют на чашках Петри или косяках в течение 24 ч при 28 - 32 С. Культивирование в жидких средах проводят в колбах при аэрации (качалка 160 об/мин) в течение 24 - 30 ч, 55 Физиолого-биохимические. признаки.Строгий азроб оптимум температурыроста 28-32 С, растет при 42 С, рН 4,7-9,0,оптимум 7,0.Отношение к источникам углерода. Активно ассимилирует сахарозу, сорбит, дуль2001950 цит, арабинозу, рафиноэу. глюкозу, Иэ глюкозы может образовывать желатин, индол не образуют.Метаболиэирует органические кислоты, эта нол.Нитраты редуцирует.Ассимилирует нитратный и аммонийный азот.В тесте Хью и Лейфсона проявляет окислительный метаболизм глюкозы, положительные реакции обнаруживает в тестах на каталаэу, оксидазу, 1:аргининдигидролазу, разжижение желатина и пептонизацию молока, образование левана иэ сахарозы, рост в средах с пропионатом, ацетатом, сукцинатом, образование кислоты из глюкозы, :арабиноэы, галактозы, б-фруктозы, рибоэы, глицерина, мезоинозита, восстановление нитратов до нитритов; отрицательные - на гидролиз крахмала. рост при 39 С и в среде с оксалатом, образование кислоты из мальтоэы, б-ксилозы, рамнозы, раффинозы, этанола. сорбита, адонита.Отношение к антибиотикам:Рост бактериальных колоний на агариэованных средах не угнетается в присутствии стрептомицина (50 мкг/мл), гентамицина (20), ампициллина(300), карбеницилина(50), триметоприма (100). хлорамфеникола (10), рифампицина (10).Штамм бактерий Рзецбопопаз ацгео 1 асепз ВКМ ВД хранят в 25,ф-ном 45 50 55 глицерине при (-20)+70) С в лиофильно-высушенном состоянии с сахароэо-желатиновым агаромШтамм Рзецбогпопаз ацгео 1 асепз ВКМ ВД непатогенен.Испытание штамма Рзецбощопаз ацгеоГасепз ВКМ ВД на способность повышать урожай растений было проверено при использовании его в составе биопрепарата БПМ-Агат, представляющего из себя свежую культуру данного штамма бактерий.П р и м е р 1. Получение биопрепарата БП М-Агат,Штамм Рзецботпопаз ацгео 1 асепз ВКМ ВД выращивают в жидкой среде Альбит, состав которой приведен выше. Штамм бактерий культивируют в течение 24-30 ч при 28-30 С с аэрацией до титра 2-4 х 10 кйlмл,Биопрепаратом БПМ-Агатобрабатывают семена растений перед посевом, При этом биопрепарат разводят водой 1;100(для зерновых и зернобобовых растений) или 1:50 (для овощных растений) и наносят на семена до полного смачивания их поверхности. Обработка гарантирует попадание на каждое семя 0.5-2,0 х 105 бактерий 5 10 15 20 25 30 35 40 Рзецботопаз ацгво 1 асепз ВКМ ВД.Обработанные семена высевают в течение10 - 30 ч, оберегая от высуоивания на солнце.П р и м е р ы 2-6 демонстрируют эффектштамма Рзецбогпопаз ацгестасепз ВКМ В 1973 Д на урожай зерновых и зернобобовыхрастений.П р и м е р 2, Семена ячменя сорта"Подольский" обрабатывают биопрепаратом БПМ-Агатв разведении 1:100 и высевают в открытом грунте по 100 семян наделянку размером 1 м (опыт). Параллельновысевают семена ячменя, обработанные водой(контроль). В контроле и опыте по шестьделянок. Урожай сравнивают по весу зернана делянку. В опыте получают урожай, равный 250,5 г, в контроле 185,6 г. Разницамежду опытом и контролем достоверна свероятностью Р=0,05 и составляет 65,9 г(превышение на 35%).П р и и е р 3, Семена овса сорта "Скакун"обрабатывают и высевают, как в примере 1.В опыте получают урожай, равный 186,4 г наделянку, в контроле - 153,0 г. Разница между опытом и контролем достоверна с вероятностью Р=0,05 и составляет 33,4 г(превышение на 220 )П р и м е р 4. Семена пшеницы сорта"Мироновская" обрабатывают и высевают, как в примере 1, также учитывают урожай зерна. В опыте получают урожай,равный 218,9 г на делянку, в контроле -174,1 г, Разница между опытом и контролемдостоверна с вероятностью Р=,0,05 и составляет 44.8 г (превышение на 260 ),П р и м е р 5, Семена гороха сорта"Уладовский" обрабатывают и высевают,как в примере 1, также учитывают урожайзерен гороха. В опыте получают урожай,равный 141,8 г на делянку, в контроле -123,3 г. Разница между опытом и контролем достоверна с вероятностью Р=0,05 и составляет 18,5 г (превышение на 15).П р и м е р 6. Семена сои сорта "Висконсин" обрабатывают и высевают, как в примере 1. В опыте получают урожай, равный 120,5 г зерен на делянку, в контроле - 102,9 г. Разница между опытом и контролем достоверна с вероятностью Р=0,05 и составляет 17,6 г (превышение на 177 ь),П р и м е р ы 7 - 9 демонстрируют эффект штамма Рзецбоаопаз ацгео 1 асепз ВКМ ВД на урожай овощных культур,П р и м е р 7. Семена капусты сорта "Ранняя-июньская" обрабатывают биопрепаратом БПМ-Агатв разведении 1. О, получают из ник рассаду, которую затем высажиоают в открытом грунте рядами по 10 шт. расстояние между растениями 50 см,2001950 Влияние инокуляции семян растений биопрепаратов БПМ-Агат,содержащим штамм Рзеибощопаз аогеоФас епз +16.формула изобреШтамм бактерий обогп оставитель А. Злотехред М.Моргентал Л. Павло Реда орректор атруше Подписное 3 315 Тираж НПО "Поиск" Роспатен113035, Москва. Ж. Раушс наб.,роизводственно-издательский комбинат "П,Гагарина,между рядами 100 см, рядков десять (опыт), Параллельно высевают семена. обработанные водой (контроль), Урожай сравнивают по среднему весу кочана капусты в рядке. В опыте получают урожай, равный 2787 г, в контроле - 2015 г. Разница между опытом и контролем достоверна с вероятностью Р,05 и составляет 772 г ,(превышение на 38),П р и м е р 8. Семена огурцов сорта "Либелла" обрабатывают, как в примере 6, и высевают в открытом грунте на расстоянии 50 см друг от друга, В опыте и контроле по 60 растений. Урожай сравнивают по весу огурцов на одно растение, собранных в течение 10 дней с момента появления на растении огурца длиной 12 см. В опыте получают урожай огурцов, равный 1127 г. Разница между опытом и контролем достоверна с вероятностью Р,05 и составляет 247 г(превышение на 28 ф).П р и м е р 9. Семена помидоров сорта "Грибовский" обрабатывают, как в примере 6, биопрепаратом, получают из них рассаду, которую затем высаживают в открытом грунте, В опыте и контроле по 30 растений,Урожай сравнивают по весу помидоров на одно растение, В опыте получают урожай помидоров. равный 2003 , в контроле - 1627 г. Разница между опытом и контролем 5 достоверна с вероятностью Р,05 и составляет 376 г (превышение на 23 ф).Таким образом, предлагаемый штаммРзеобоглопаз аогео 1 азепз ВКМ ВЗД в составе биопрепарата БПМ-Агатоблада ет способностью повышать урожай зерновых (пшеница. ячмень, овес), зернобобовых (горох, соя) и овощных культур (капуста, огурцы, помидоры) после обработки семян этих растений биопрепаратом в среднем на 25 15 по сравнению с необработанным контролем,Штамм Рзеидощопаз ацгео 1 азепз ВКМ В 1973 Д является биологическим срш,сгвом повышения урожая и может быть рекомендован для получения биопрепарата, использу емого для стимуляции роста растений.Средние данные по урожаю зерновых,зернобобовых и овощных растений приведены в таблице. 25 (56) Авторское свидетельство СССР М 275600, кл, А О 1 М 63/00, 1970,геоУасепз ВКМ ВД для полученияимулятора роста растений.