Способ диагностики мастита
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК Ж 1772761 А 1 оз 6 О 1 й ЗЗ/68 4 с.,:.% ", . 11, -,ОБРЕТЕН И СВ АВТ олока обьемом 1 капли ом бромфеновового си 5-15 ОС, затем измеряю луоресценции рас ее величины в зеле 40 нм пос авнению азбавляют его, охлаж- интенсивора и по ой областисиней (470 убклиниченсивности, Примене- уществлять аст ность ф т разности н спектра (5 ) р с нм) на 20-30 диагностируют с ский мастит, при разности в инт более 30 диагностируют масти ние изобретения позволяет осресс-диагностику мастита обследованиях, а также оп чество молока, Точность .диагн этом до 100. 2 табл,сследова диатрии те ио гностикаойный и14-16,ИКИ МАласти медйти прити присть изо ТИТА ицины енени тсанэ ретен при массоределять ка. остики при средн оров с одно и им мас ямикр иты, о и цвета е, кото го колич одержит ле зрени титом - оскопа. О крашенн В после ые имею ества, Модо о от в среднем 0,2 лейя, от коров с суб,4 лейкоцитов в тдельно учитываые в зеленый и днем случае клетт место в молоке осится к области медиа также может найти ной п омышленности Изобретение отнцины и ветеринарии.применение в молоч рпри ветсанэкспертиэе молока.Прототипом заявляемого способа выбран способ диагностики сублинических маститов путем люминесцентно-микроскопических исследований, Его сущность заключается в следующем; каплю молока наносят на предметное стекло. добавляют равное количество индикатора - акридинаоранжевого в концентрации 10 , осторожно перемешивают и через 10 - 15 мин накрывают покровным стеклом и исследуют в сине-фиолетовых лучах под иммерсией - ваэелиновым маслом, Далее определяют в молоке лейкоциты, которые имеют интенсивное свечение, при этом ядра светятся ярко зеленым цветом, цитоплазма тускло зеленым, часто с ярко красными включениями. Количество лейкоцитов подсчитывают в 10 полях зрения с последующим опредевляются ни сть идлитед атком прототипть способа и сложсуществления.эобретения - рение точности нняя диагностидиагностики мастита,Новизна и прототипа зая том, что смесь раствором индсинего (БФС) до 5-15 ОС, а эа флуоресценции ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(46) 30.10.92. Бюл. Ф 40 (71) Ростовский научно- институт акушерства и и (72) В,П. Шабаев и А.А. К (56) Ю.Н. Полянцев, Диа мастита у коров в сухост теринария, 1982, ЬЬ 11, с (54) СПОСОБ ДИАГНОСТ (57) Использование: в об ветеринарии и может на молочной промышленно пертиэе молока, Сущно лением их здоровых к коцита на клиническ поле эрени ют аейкоц оранжевы ки мертвы при патоло Недос кая точнос ность его о Цель и ки и повысущественные отличия от вляемого способа состоят в исследуемой пробы молока с икатора - бромфенодового предварительно охлаждают ем измеряют интенсивность на длине волны 470 и 54010 15 20 30 35 50 55 нм, При увеличении интенсивности в зеленой области спектра (540 нм) по сравнению с синей (470 нм) на 20-30;6 ставят диагноз субклинического мастита, а при разности свыше 30 - диагностируют мастит.Подробное описание способа ипримеры его конкретноговыполнения.Пробу молока (от женщины или млекопитающего животного - коровы) объемом 1-2 капли добавляют к 1 мл 0,001 - 0,01- раствора БФС в пробирку, затем полученную смесь охлаждают до 5-15 ОС, охлажденную смесь переливают в кварцевую кювету и с помощью флуориметра измеряют интенсивность флуоресценции при длине волны 470 и 540 нм.Флуоресцентный анализ проводят на лабораторном флуореметре ФЭ - ЗМ, в котором показания микроамперметра пропорциональны интенсивности флуоресценции,Опытным путем было установлено, что предел концентрации БФС от 0,001 до 0,017 ь является оптимальным для исследования флуоресценции молока (табл. 1),Данным способом было установлено,что чистый раствор индикатора (без следов молока) не флуоресцирует, а с молоком дает три максимума флуоресценции: при 660, 540 и 470 нм. При этом в температурном интервале 1630 С разность в интенсивности флуоресценции при длине волн 540 нм и 470 нм незначительная по величине и недостоверна, а также не изменяется от качества молока (т.е. полученного от здорового млекопитающего или больного маститом). При охлаждении молока, а именно - в температурном интервале 5 - 15 С, оно дает с индикатором существенное различие в интенсивности флуоресценции при 540 и 470 нм в случае получения проб молока от больного животного или женщины с маститом, Причем при субклиническом мастите эта разность составляет 20 - ЗОО, при клиническом течении болезни - свыше 30;ь. 8 нор-. ме указанные различия недостоверны,Данные исследования 45 проб молока от кормящих женщин сведены в табл, 2,П р и м е р 1. К 1 мл раствора БФС (0,001 о) добавили 1 каплю молока от кормящей женщины. Полученную смесь перемешивали, путем встряхивания пробирки, и охладили в холодильнике до 10 С, Затем пробирку перенести в гнездо флуориметра и измерили интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм и 470 нм. Ее величина составила 60 и 49 отд. ед. соответственно. Разность в интенсивности флуоресценции равна 19. Женщина практически здорова, что подтверждено последующими анализами,П р и м е р 2. К 1 мл 0,001-ного раствора БФС добвили 1 каплю молока от другойженщины, кормящей грудью, После охлаждения смеси молока и индикатора до 10 -15 С измерили интенсивностьфлуоресценции в сине-зеленой областиспектра (470, 540 нм), которая составила,соответственно, 44 и 55 отн, ед, Разность ихравна 20. Через 3 дня женщина почувствовала боли в области правой молочной железы. При обследовании обнаруженонезначительное повышение температуры вэтой части тела. Интенсивность флуоресценции пробы молока и индикатора на длине волны 540.нм увеличилась до 65 отн. ед.и по сравнению с ее величиной при 470 нм(45 отн. ед.) разность составила 33,При люминесцентной микроскопиипробы молока с акридиноранжевым в этотпериод наблюдений выявлены лейкоцитыдо трех клеток на поле зрения, что имеетместо при клиническом мастите,Таким образом, первоначальные значения величины флуоресценции и разность винтенсивности флуоресценции при 540 и470 нм - 20, характеризовали субклинический мастит, а последующее увеличениеэтого показателя до 33;(, - клиническую стадию болезни.П р и м е р 3. Проводили флуоресцентный анализ пробы молока от кормящей женщины без каких-либо признаковзаболевания (мастита). Разбавили 1 каплюмолока 1 мл, 0,001-ного раствора БФС,полученную смесь молока и индикатора охладили до 10 С. При измерении интенсивности флуоресценции на длинах волн 540 и470 нм установили, что разность между ихзначениями (соответственно, 50 и 35 отн,ед,) равна 30;, Следовало предполагать,что ее величина соответствует субклиническому маститу, Действительно, через 2 дняженщина почувствовала недомогание и бо-ли в области молочных желез. Отмечена незначительная гиперемия груди. Диагноз -мастит.Повторный флуоресцентный анализ молока в растворе индикатора БФС позволилзарегистрировать увеличение сигнала флуоресценции в зеленой части спектра (при 540нм) на 1 - 2 отн. ед. Разность в интенсивности флуоресценции при 540 и 470 нм составила 31-32 ,На основании анализа данных уже этихтрех примеров видно, что предлагаемыйспособ позволяет за 2 - 3 дня диагностировать скрытую, т.е, субклиническую формумастита. На этой стадии мастита величина1772761 Таблица 1 Интенсивность флуоресценции молока и водного раствора бромфенолового синего в зависимости от концентрации индикатора при комнатной температуре 20 С(отн. ед,) разности в интенсивности флуоресценции на длине волны 540 нм и и 470 нм соответствует 20 - 30;, при ее значениях - 31-32 и более имеет место клинический мастит, а ниже 19 - норма, .П р и м е р 4, К 1 мл 0,001 ф-ного раствора БФС добавили 1 каплю молока от коровы, которое не дает реакции с бромтимоловым синим и другими известными индикаторами на мастит. Полученную смесь молока и БФС в течение 5 мин выдерживали в холодильнике в морозильной камере до температуры 10 - 15 С, затем провели измерение интенсивности флуоресценции при длине волны 470 и 540 нм. Величина ее равна 60 и 80 отн.сдсоответственно, Разность между их значениями составила 25 , что характеризует субклинический мастит. Через 3 - 4 дня было отмечено снижение надоев молока и болезненность отдельных долей вымени у коровы, Диагноз - мастит,П р и м е р 5, К 1 мл 0,001 ф-ного раствора БФС добавили 1 капле молока от коровы практически здоровой. После охлаждения смеси до 10 С исследовали интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм и 470 нм, которая была равна, соответственно, 70 и 60 отн,ед., Разность между ними составляет 14. Диагноз - норма. Таким образом, преимущества заявляемого способа диагностики мастита сводятсяк следующему:Способ позволяет с высокой точностью5 (до 100) диагностировать мастит на субклинической скрытой) стадии развития его,Способ прост в выполнении, осуществляется за 10 - 12 мин, что представляетсяважным для экспресс-диагностики мастита10 при массовых обследованиях, а также приопределении качества молока на предприятиях молочной промышленности и приемных пунктах молока в хозяйствах,Способ может широко использоваться в15 медицинской и ветеринарной клинике ипроводить дифференциальную диагностикумастита,Формула изобретенияСпособ диагностики мастита путем сме 20 шивания исследуемой пробы молока с индикатором с последующим его люминесцентнымисследованием, о т л и ч э ю щ и й с я тем, что,с целью ранней диагностики и повышенияточности способа, пробу молока смешивают25 с 0,001 - 0,01-ным водным раствором бромфенолового синего, охлаждают полученнуюсмесь до 5 - 15 С и измеряют интенсивностьфлуоресценции в области спектров 540 нм и470 нм, и при увеличении первого показателя30 относительно второго на 20 и более диагностируют мастит.1772761Таблица 2Интенсивность флуоресценции молока и 0,001раствораБФС (соотнощение 1:20) в сине-зеленой области спектрапри различной температуре среды и формах мастита ( и)Составитель А.Кожин Редактор В.Орлова Техред М.Моргентал Корректор М,КерецманЗаказ 3844 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС 113035, Москва, Ж, Раущская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул, Гагарина. 1
СмотретьЗаявка
4844723, 02.07.1990
РОСТОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ АКУШЕРСТВА И ПЕДИАТРИИ
ШАБАЕВ ВЛАДИМИР ПАВЛОВИЧ, КОЖИН АЛЕКСАНДР АЛЕКСЕЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/68
Метки: диагностики, мастита
Опубликовано: 30.10.1992
Код ссылки
<a href="https://patents.su/4-1772761-sposob-diagnostiki-mastita.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ диагностики мастита</a>
Предыдущий патент: Способ дифференциальной диагностики инфекционно-зависимой формы бронхиальной астмы от атопической формы бронхиальной астмы
Следующий патент: Способ прогнозирования течения язвенной болезни
Случайный патент: Хранилище сыпучих материалов