Способ определения концентрации витамина а

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 16706 А 01 ИЗЗО ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ АВТОРСКОМ ИДЕТЕЛЬС(57) Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано при определении концентрации витамина А в пищевых продуктах, а также при контроле производства витамина А. Омыляют анэлизируемую пробу спиртовым раствором щелочи, экстрагируют неомыляемую фракцию гексаном, удаляют органический раствори- тель путем выпаривания, сухой остаток растворяют в этиловом спирте, затем проводят дегидратацию путем добавления соляной кислоты в конечной концентрации 0,2 - 0,5 н, а количественное определение витамина А ведут по приросту оптической плотности в течение 4 - 5 мин при длине волны 390 - 392 нм. 2 ил. 3 табл.. МЗОнный пррыбопро ектно-конструкм ыслс г ого флг га нов. П,Ф Сурай,а, И.А,ИБидюги8,8): Агропро ление вита;дина ругих объектах. издат, 1987, Ьг ИЯ КОНЦЕНТ 54) СПОСОБ ОПРЕДЕАЦИИ 8 ИТАМИНА А ней 0,2 - 0,5 иэмплотности причерез 30 с послеты, а затем чероптической пловремени опредмина А по прекалиброванномусэл 1 цм фиксаци яю ин ер т велич дл е волны добавления ез 4 - 6 мин ности за эт ляют конце варительно графику, об ю нулевой точДля более полного и избирательного извлечения витамина А из неомыляемой фракции используется гексан, Для предотвращения появления эмульсии в пробе, что делает невозможным ее прямое спектрофотометрирование, а также исключения операций нейтрализации, отмывки и центрифугирования перед дегидратацией проводят удаление гексана путем упаривания с последующим растьсрением сухого остатка в этаноле, Дегидратацию витамина осуществляют соляной кислотой с конечной концентрацией 0,2 Для осуществле отобранную пробу а та омыляют спиртов экстрагируют неомыг ном, удаляют гексан творяют сухой остат дегидратацию путем кислоты с конечной кспособа о продукщелочи, ию гексания, распроводят соляной й последния данного нализируемог ым раствором яемую фракц путем упарива ок в этаноле, добавления онцентрацие(53) 577,161.11 (О Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано при определении концентрации витамина А в различных пищевых продуктах, а также при контроле производства витамина А,Целью изобретения является повышегние точности путел 1 фиксации нулевой точки измерения.На фиг.1 показана зависимость прироста оптчиеской плотности от времени дегидратации; на фиг,2 - зависимость между приростом оптической плотности с концентрацией витамина А в анализируемой про- бе инуоптическои 390 - 392 нм соляной кисло- , По приросту от промежуток нтрацию витапостроенному еспечивая тем ки измерения.0.5 н в растворе этанола, В табл, 1 представлены результаты опытов по определению оптимальных концентраций соляной кислоты для дегидратации витамина А, исходя иэ которых выбирают диапазон концентрации соляной кислоты, укаэаной выше.Измерение прироста оптической плотности проводят при длине волны 390 - 392 нм, которая соответствует вершине пика спектра дегидратированного витамина А.Данный способ позволяет строго контролировать проведение дегидратации по времени, так как соляная кислота добавляется непосредственно перед измерением оптической плотности. Первое измерение оптической плотности проводят через ЗО с, после добавления соляной кислоты. Второе измерение проводят через 4 - 5 мин после первого. Как видно из фиг.1, на котором представлена зависимость прироста оптической плотности между вторым и первым измерениями, в течение указанного промежутка времени между первым и вторым измерением (4 - 5 мин) наиболее активно происходит дегидратация и наблюдается линейная зависимость между приростом оптической плотности и временем дегидратации. Увеличение времени дегидратации более 4 - 5 мин может привести к завышению результатов определения витамина вследствие дегидратации примесей липидной природы, которые как правило присутствуют в анализируемых продуктах.В табл.2 и 3 приведены результаты определения витамина А в печени трески, а также в смеси витаминов и антиоксиданта по данному способу и по прототипу, согласно которому дегидратацию проводят в течение 15 мин, Определение витамина А по прототипу приводит к завышению результатов измерений.П р и м е р, Навеску гомогенизированного образца тресковой печени в томатном соусе (200 - 400 мг) вносили в колбочку для омыления. В нее добавляют 20 мл этанола, 100 мг гидрохинона и 3 мл 500 ь гидроксида натрия, Далее присоединяют обратный холодильник и проводят щелочное омыление на водяной бане в течение 30 мин при 100 С, периодически встряхивая колбу. По 10 15 20 25 Формула изобретения Способ определения концентрации витамина А, предусматривающий отбор анализируемой пробы, омыление спиртовым раствором щелочи, экстракцию неомыляемой фракции органическим растворителем, дегидратацию в присутствии соляной кислоты и измерение величины оптической плотности дегидратированной. анализируемой пробы, коррелирующей с концентрацией витамина А, отл и ча ю щийс ятем,что,с целью повышения точности путем фиксации нулевой точки измерения, е качесте органического растворителя при экстракции используют гексан, перед дегидратацией осуществляют удаление органического растворителя путем упаривания, с последующим растворением полученного сухого остатка е этаноле, при этом дегидратацию осуществляют путем добавления соляной кислоты с конечной концентрацией последней 0,2 - 0,5 н, а измерение оптической плотности осуществляют при длине волны 390 - 392 нм в течение 4 - б мин. ЗО 35 40 45 50 сле окончания омыления смесь охлаждают и количественно переносят в делительную воронку, куда предварительно вносят 50 мл гексана и энергично встряхивают. Экстракцию повторяют дважды по 30 мл гексана. Гексановый экстракт отмывают дистиллированной водой до нейтральной реакции, за.тем фильтруют через воронку, в которую насыпан безводный сульфат натрия для удаления остатков влаги. Фильтрат упариваютдосуха, остаток растворяют в 5 мл этанолаК полученному растору добавляют 0,1 мл концентрированной соляной кислоты. Смесь быстро перемешивают и вносят в кювету для спектрофотометрирования, через 30 с после внесения кислоты проводят первое измерение оптической плотности при 390 нм против контрольного раствора. Второе измерение проводят через 5 мин после первого и по разнице показаний между вторым и первым измерениями находят прирост оптической плотности, количество витамина определяют по предварительно построенному калибровочному графику. (фиг.2).1670602 Табли ца 1 Концентрация кислоты, Н Прирост оптической плотности за 5 мин 1 .1 1 Примечание 2 понт. 3 повт. среднее О, 15 О, 095 О, 153 0,113 О, 168 О, 198 0,20 0,25 0,30 0,252 0,40 0,305 0,350 0,495 0,305 0,354 0,475 0,50 0,60 Неравномерный прирост Таблица 2 Способ Кол "во витамина А, мкг/л Кол-во Добавление Найдено в опреде внутреннего тамина А, лений стандарта,мк Среди анали время мнн1670602 О г 2 ь И.Пин оргента Составит Техред М орректо аксимишине заодстаенно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 10 00по Редактор О.СпесивЗаказ 2748ВНИИПИ Госуд Тираж 391 Подписноественного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5