Способ количественного определения аминофосфоновых кислот

(54) спОсОБ кОличестВеннОГО ОпРелеЛЕНИЯ АИИНОфОСЕОНОВЫХ КИСЛОТ (57) Изобретение относится к аналитическои химии и может быть использовано для определения лекарственных препаратов, средств регулирования роста растений и т.п. Цель изобретения - увеличение точности, чувствительности и экспрессности способа. В качестве реагента используют раствор о-фталевого альдегида и меркаптосоединения в молярном отношении от 1:1 до 1:10, Реагент вводят в пробу до концентрации о-фталевого альдегида 9 10 моль/л, рН 8-11, выдерживают раствор 3 мин и определяют опплотность на длине волныпо величине которой опредеержание аминофосЬоновой кислоты оаеггу.- , ч.296,тическую 340 нм, ляют сод 5 мл раство й кислоты к мл реагент анием 0,2 мльдегида кон овом спирте аствора мер О,фонови 0,2 еш вого ал в этил ного р центрборатстабил уфе теч в ячейк ляют оптическую плотность при относительно разбавленного в д за реагента. Оптическая плоти ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГННТ СССР(46) 23,09,90 Бюл. Кф 35 (71) МГУ им. М.В.Ломоносова и Институт биоорганической химии АН УССР (72) Е,В. Козлова, В.А. Солоденко, В.-Ю.К.1 Пвядас, Т,Й, Кашева и В.П.Кухарь(56) МавцЬага т., НауавИ А. 1 йепсИсаоп оГ ао 1 есц 1 аг вресев оЕ сегааЫе, аахпоесЬУ 1 рЬоврЬопаге Иоа оувгег аЫцсгог Ъу яав - 1 дццЫ сЬгоаагоягарЬу - аавв вресгг В 3.осЬеа. ВюрЬув. Асйа, 1973 Р 1, р. 171-178.Ошп 1,Л. тЬе пагцга 1 оссцгепсе ой соароцпйв ыхгЬ сагЬоп-рЬоврЬогцз Ьопй.-. Торхсв п РЬоврЬогцв СЬеахвггч./Ейз.М.Сгаувоп Е.1. СгИГ 1 гЬ. ЯЛ., 1 пгегвс 1 епсе,; 1967, ч, 4, р. 23-48. И б и относится к областихимии, а именно к способам количественного определения аминофосфоновых кислот, и может быть использовано для определения лекарственных препаратов, средств регулирования роста растений и т.д.Цель изобретения - увеличение точности, чувствительности и экспресс- ности способа.П р и м е рноэтилфосфоновшенин о-фталевкаптоэтанола 1 1, Определение 1-амиой кислоты при соотноого альдегида и мер- :2 и рН 10 О,аминоэтилфос онцентрации 6 10 М а которыи готовят раствора о-фталецентрации 14,4 мг/мл 0,2 мл этанолькаптоэтанола конмл/л и 12 мл О,1 М а с рН 10,0 (реагентние дня), помещают офотометра и опреде20 30 0,25 мл раствора 1-аминоэтнлАосФоновой кислоты концентрации 6 10 М и 0,25 мл реагента, который готовят Вналогично примеру 1, рН О, 1 М боратйого буАера 11,0,.смешивают в ячейке спектроАотометра и через 3 мин измеряют оптическую плотность, как в Примере 1, Оптическая плотность соСтавляет 0,177. что при коэААициен те экстинкции 5800+400 Мсм - соот- д 0 ветствует концентрации 1-аминоэтилфосфоновой кислоты (6,10+0,40) 10 М.П р и м е р 4, Определение 1-аминоэтилфосАоновой кислоты с помощью о-Аталевого альдегида и меркапто этанола при соотношении 1:2 и рН 6,0,Исходная концентрация 1-аминоэтилфосфоновой кислоты 6 .10- М, Реагент готовят аналогично описанному в примере 1, но рН 0,1 М боратного буАера 6,0. Оптическая плотность, определяемая аналогично примеру 1, составляет 0,035, что при коэдхЬициенте экстинкции 1100+250 М -см - соответст. Вует концентрации (6,36+1,18) 10 М.П р и м е р 5, Определение 1-ами 55 ноэтилфосфоновой кислоты с помощью о-Аталевого альдегида и меркаптоэтанола при соотношении 1:0,5 и рН 10,0. измеренная через 3 мин после смешения реагентов, составляет 0,185, чтопри коэффициенте экстинкции 59000300 М-" смотвечает концентрации;1-аминоэтилфосАоновой кислоты (6,250,30) -10 М.П р и м е р 2, Определение1-аминоэтилфосфоновой кислоты присоотношении о-Фталевого альдегида 10и меркаптоэтанола 1:2 и рН 8,0,0,25 мл раствора 1-аминоэтилАосФоновой кислоты концентрации 6 10" Ми 0,25 мл реагента, приготовленногоаналогично описанному в примере 1, 15но рН 0,1 М боратного буфера 8,0,Помещают в ячейку спектрофотометраи измеряют оптическую плотность, каки примере 1.Оптическая плотность, измереннаячерез 3 мин после смешения реагентов, составляет 0,143, что при коэй 5 ициенте экстинкции 4900+200 М см-- отвечает концентрации 1-аминоэтилАосоновой кислоты (5,85+0,25) 10 М. 25П р и м е р 3, Определение 1-амийоэтилАосдюновой кислоты при соотношении о-фталевого альдегида и меркаптоэтанола 1:2 и рН 11,0,Исходная концентрация 1-аминоэтилфосдюновой кислоты 6 10 М. Реагентготовят смешиванием 0,2 мл раствораи о-фталевого альдегида концентрации14,4 мг/мл в этиловом спирте, 0,5 млэтанольного раствора меркаптоэтанола концентрации 15,6 мл/л и 12 млО, 1 М боратного буАера с рН 10,0,Оптическая плотность, измеренная какв примере 1, составляет 0,045, чтопри коэффициенте экстинкции 1500 +200 М см - отвечает концентрации1"аминозтилфосАоновой кислоты (6,00 фф 0,70) 10 М.П р и м е р 6, Определение 1-аминоэтилфосфоновой кислоты с помощьюо-фталевого альдегида и меркацтоэтанола при соотношении 1:1 и рН 10,0,Исходная концентрация 1-аминозтилфосАоновой кислоты 6,0 10-"М, Реагентготовят смешиванием 0,2 мл растворао-фталевого альдегида концентрации14,4 мг/мл в этиловом спирте О, 1 млэтанольного раствора меркаптоэтанолаконцентрации 15,6 мл/л и 12 мл О. 1 Мборатного буАера с рН 10,0, Оптическая плотность, определяемая как описано в примере 1, составляет 0,145,что при коэАФициенте экстинкции5000+200 М см - отвечает концентрации (5,80+0,25) 10-М,П р и м е р 7. Определение1-аминоэтилАосфоновой кислоты с помощью о-Аталевого альдегида и меркаптоэтанола при соотношении 1;10 ирН 10,0.Исходная концентрация 1-аминоэтилФосАоновой кислоты 6 10 М, Реагентготовят смешиванием 0,2 мл растворао-Ьталевого альдегида концентрации14,4 мг/л в этиловом спирте 0,1 млэтанольного раствора меркаптоэтанола концентрации 156 мл/л и 12 мл0,1 М боратного буАера, Оптическаяплотность, измеренная как в примере 1, составляет 0,110, что при коэффициенте экстинкции 3800+200 М см -соответствует концентрации 1-амино-этилАосйоновой кислоты (5,79+0,32) фх 10- М.П р и м е р 8, Определение 1-амино-метилбутилАосАоновой кислотыпри соотношении о-Аталевого альдегида и меркаптоэтанола 1:2 и рН 10,0,Реагент готовят аналогично описанному в примере 1. Концентрация1-амино-метилбутилфосАоновой кислоты 4 10- М. Оптическая плотность5 159измеренная как в примере 1, составляет 0,111, что при коэффициенте экстинкции 5800 ф 300 И -" см - отвечаетконцентрации 1-амино-метилбутилфосфоновой кислоты (3,80+0,25) 10 М.П р и м е р 9, Определение 1-амино-метилпропилАосАоновой кислоты.с помощью о-фталевого альдегида имеркаптоэтанола (соотношение 12)при рН 10,0,Реагент готовят аналогично описанному в примере 1. Концентрация1-амино-метилпропилфосфоновой кислоты 6 10-М. Оптическая плотность,измеренная как в примере 1, состав ляет 0,156, что при коэффициенте;экстинкции 5400+300 М смотвечаетконцентрации 1-амино-метилпропилфосфоновой кислоты (5,80+0,30) 10 М.П р и м е р 10, Определение3-аминопропилфосфоновой кислоты спомощью о-Аталевого альдегида и меркаптоэтанола (соотношение 1:2) прирН 10,0,Реагент готовят аналогично примеру 1, Концентрация 3-аминопронилАосфоновой кислоты 4 10 М. Оптическая плотность, измеренная как в примере 1, составляет 0;089, что при коэААициенте .экстинкции 4600+300 Мсм соответствует концентрации 3-аминоп-опилАосфоновой кислоты (3,90+0,20)П р и м е р 11. Определение 1-аминоэтилфосАрновой кислоты с помощью о-Аталевого альдегида и дитиотреитола при молярном соотношении 1:2 и рН 10 О.0,25 мл раствора 1-аминоэтилфосфоновой кислоты концентрации 6 -10 М и 0,25 мл реагента, который готовят смешиванием 0,2 мл раствора о-фталевого альдегида концентрации 14,4 мг/мл в этиловом спирте, 0,2 мл этанольного раствора дитиотреитола концентрации 30,9 мг/мл и 12 мл 0,1 М борат-. ного буфера с рН 10,0 (реагент стабилен в течение дня), помещают в ячейку спектрофотометра и измеряют оптическую плотность при 340 нм. Так как в результате образуется стабильный хромофор, измерение оптической плотности можно проводить в течение одного часа после смешивания реагентов, Оптическая плотность, измеренная через 10 мин после смешивания реаген-. тов, составляет О, 135, что при коэф 4390 бАициенте экстинкции 4500+250 М -ф см -отвечает концентрации 1-аминоэтилфосфоновой кислоты (6,000,30) 10 И.П р и м е р 12. Определение1-амино-метилпропилфосфоновойкислоты с помощью о-Аталевого альдегида и дитиотреитола (соотношение1:2) при рН 10,0.Реагент готовят и оптическую плот"ность измеряют как в примере 7. Концентрация 1-амино-метилпропилфосфоновой кислоты 6 1 О-И, Измереннаяоптическая плотность О, 137, что прикоэААициенте экстинкции 4500 ф 300 И-см -соответствует концентрации 1-аминоетилпропилфосАоновой кислоты (6,09 ф, с помощью о-Аталевого альдегида идитиотреитола (соотношение 1 ф 2) прирН 10,0.Реагент готовят и оптическую плотность измеряют как в примере 11. Исходная концентрация 3-аминопропил-фосАоновой кислоты составляет 6 10 МИзмеренная оптическая плотностьравна О, 145, что при коэффициентеэкстинкции 4800+250 М см-отвечаетконцентрации 3-аминопропилАосАоновойкислоты (6, 02+ О, 25) 10М.П р и и е р 14. Определение1-амико-метилбутилАосфоновой кислоты с помощью о-фталевого альдегидаи дитиотреитола (соотношение 1:2)при рН 10,0.Реагент готовят и оптическую .плотность измеряют как в примере 11. Исходная концентрация 1-амино-метилбутилАосАоновой кислотй 4 1 О И. Оптическая плотность равняется 0,080,что при коэффициенте экстинкции4000+150 Исмсоответствует концентрации 1-амино-метилбутилАосфоновой кислоты (4,00-0,15) 10-М.П р и м е р 15, Определение1-аминсэтилфосфоновой кислоты с помощью о-фталевого альдегида и меркаптоянтарной кислоты при соотношении 1:2 и рН 10,0.0,25 мл раствора 1-аминозтилАосфоновой кислоты концентрации 3 10 Ми 0,25 мл реагента, который готовятсмешиванием 0,2 мл раствора о-фталевого альдегида концентрации 14,4 мг/млв этиловом спирте, 0,2 мл растворамеркаптоянтарной кислоты в 0,1 н,боратном буАере в концентрации1594390 Формула изобретения Составитель А. ВоробьевРедактор Н. Бобкова Техред М.Ходанич Корректор С. Черни Заказ 2823 Тираж 515 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-З 5, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул, Гагарина, 101 ЗО,О мг/мл и 5 мл 0,1 М боратногобуФера с рН 10,0, Далее поступают,как описано в примере 11, Оптическаяплотность составляет 0,068, что прикоэФФициенте экстинции 4500+200 М смсоответствует концентрации 1-аминоэгилдюсФоновой кислоты (3,0210, 15)10М.П р и м е р 16 Определение1 О3 аминопропилФосйоновой кислоты спомощью о-Фталевого альдегида имеркаптоянтарной кислоты при соотношении 1:2 и рН 10,0,Исходная концентрация 3-аминопроптлФосФоновой кислоты 3 .10 М. Реагент готовят и оптическую плотностьумеряют, как описано в примере 15.Гптическая плотность составляет0,078, что при коэФФициенте экстинкпии 50001250 М см - отвечает конпентрации 3-аминопропилфосФоновойислотой (3,12+0,16) 10 -М.П р и м е р 17. Определение1-амино-метилпропилФосФоновой кис" 25Моты с помощью о-. Фталевого альдегидаи меркаптоянтарной кислоты три соотношении 1:2 и рН 10,0.Исходная концентрация 1-амино-.21метилпропилФосФоновой кислоты 4 10М,30Реагент готовят и оптическую плотность измеряют, как описано в примее 15. Измеренная оптическая плотость составляет 0,102, что при коэф фициенте экстищсции 4900+200 М - см -35соответствует. концентрации 1-аминь"2-метилпропилфосФоновой кислоты(4,1610,16)10 М. П р и м е р 18, Определение1-аминь-метилбутилФосдюновой кислоты с помощью о-Фталевого альдегидаи меркаптоянтарной кислоты при соотношении 1:2 и рН 10,0,Исходная концентрация 1-аминьметилбутилФосФоновой кислоты 3 10 Ъ,Реагент готовят и оптическую плотность измеряют, как описано в примере 15. Измеренная оптическая плотность 0,075, что при коэФФициентеэкстинкции 4800+200 М 1 см -1 соответствует концентрации 1-амино-метилбутилФосФоновой кислоты (3, 13 ф 0, 15)1 О-М. Способ количественного определения аминоФосФоновых кислот, заключа" ющийся во введении в пробу реагента, спектроФотометрировании полученного раствора и определении содержания аминоФосФоновой кислоты по величине оптической плотности, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью,увели- чения точности, чувствительности и экспрессности способа, в качестве реагента в пробу вводят о-фталевый. альдегид и меркаптосоединение при их молярном отношении от 1;1 до 1;10 до концентрации о-Фталевого альдеги да 9 10 М, рН полученного раствора поддерживают буФером в диапазоне 8-11, выдерживают полученный раствор в течение 3 мин и. спектрофотометрируют на длине волны 340 нм.