Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей

КИНЕЗИИ к области кои к медицине абораторной елчного пуИзобра именно иагно зыря у дНаибо является зии желч аемо иски химиустанов ческого нъюги- значе- превыи ованных ий конь иагноз шающих 7 дискинез тей п олучи е и п рную желчь неособенно внарушениях ритОднако у де сегда можно п аннем возраст а сердца.Цель изобрет ости способа.Способ осуще азом. вышение точя следующим об вля СУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТИЗОБРЕТЕНИЯ 4 И ОТНРЫТИЯМИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИЖЕЛЧНОГО ПУЗЫРЯ У ДЕТЕЙ(57) Изобретение относитсямедицины, а именно к клинич тение относится к клинической л ке дискинезии ж тей,ее близким к предла способ диагностики ого пузыря путем би сследования желчи с ней концентрации ко диенов. При наличии югированных диенов, 23 П/мл, ставился д ии желчного пузыря 80147812 бораторной диагностике дискинезиижелчного пузыря у детей. Цель изобретения - повышение точности, Сыворотку крови экстрагируют изопропиловымспиртом и гептаном, после чего спектрофотометрически (при длине волны233 нм) определяют количество диеновых конъюгатов в фазе изопропиловогоспирта и гептана, затем рассчитываютих соотношение и при его значении6,06 и более определяют дискинезиюжелчного пузыря, Точность способасоставляет 1003. Способ особенно полезен при наличии противопоказаяийк дуоденальному зондированию, 1 табл 0,2 мл отцентрифугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл бидистиллированной воды, перемешивают, затем приливают 4 мл изопропилового спирта, а сверху 4 мл гептана. Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гептановой). Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю - водно-спиртовую и верхнюю - гептановую. Добавляют 1,0 г сухого ИаС 1. Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Переносят верхний гептановый слой в сухую чистую пробирку закрывают ее стеклянной пробкой. В пробирку с изопропиловым спиртом и водной фазой вносят еще 1,0 г сухого ИаС 1. Покачивают 20 раз, переводя пробирку из вертикального положения в горизонтальное. Затем еще раз центрифугируют при тех же условиях, Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой. Измерения оптической плотности производят на спектрофотометре при длине световой волны 233 нм как в гептановой, так и в изопропиловой фазах. После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по формулеЛП э Чэ2 ЭЗ/мло,м гдП , - Разница оптической плот 15ности исследуемого образца и образца, содержащеговместо биологического материала бидистиллированнную воду,20Ч, - объем экстрагированнойгептановой или изопропиловой фазы, мл,Ч - исходный объем биологиИ,мческого материала (сыворотки),Затем рассчитывают соотношение оптической плотности дисковых конъюгатов в фазе изопропилового спирта ктаковой в фазе гептана и при егозначении б,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря.В таблице представлены средниепоказатели соотношения диеновыхконъюгатов в фазе изопропиловогоспирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови у детей с дискинезиейжелчного пузыря и нарушением ритмасердца, где Х - среднее значение,ш - ошибка, Р - достоверность, в 40скобках - заверительный интервал,1 - изучаемая группа больных с дискинеэией желчного пузыря и нарушениемритма сердца 1 1 а - часть больных1 ГруппыУ к От Орых Гипомотор ная Дис 45кинезия желчного пузыря. определенатолько при установлении соотношениядиеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гептана в сыворотке крови; 11 - больные со стойким нарушением ритма сердца при отсутствии дискинезии желчного пузыря; 111 - группа здоровых.Иэ таблицы видно, что у 20 больных из 48 детей изучаемой группы(с дискинезией желчного пузыря и снарушением ритма сердца) с помощьюизвестных способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральнойхолецистографии и биохимического исследования пор 1 ии желчи желчного пузыря с определением в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта) не диагностирована дискинезия желчного пузыря. У упомянутых 20 больных (423 из обследованных детей с дискинеэией желчного пузыря и с нарушением ритма сердца) диагноз дискинезии желчного пузыря поставлен только с помощью предлагаемого способа.Таким образом, с помощью прототипа представлена возможность ставить диагноз дискинезии желчного пузыря только у 583 детей с нарушением ритма сердца. Предлагаемый способ диагностики позволяет у всех детей с нарушением ритма сердца своевременно поставить диагноз дискинезии желчного пузыря с помощью определения в сыворотке крови соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана. Способ помогает вовремя поставить диагноз дискинезии желчного пузыря у детей с нарушением ритма сердца и в тех случаях, когда применяемое в прототипе дуоденальное зондирование (с целью получения порции желчи желчного пузыря для биохимического исследования) представляет опасность ухудшения аритмии сердца (спровоцирование приступов пароксизмальной тахикардии), Кроме того, дуоденальное зондирование с целью получения порции желчи желчного пузыря и определения в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта для постановки диагноза дискинеэии желчного пузыря не представляется возможным у детей раннего возраста.1П р и м е р 1. Больной П.,9 лет с диагнозом стойкой суправентрикулярной экстрасистолии, Ребенокбыл обследован по поводу дискинезиижелчного пузыря. На пероральной холецистограмме и при эхоскопическомисследовании не обнаружено измененийжелчного пузыря, общепринятое йсследование биохимических показателейв порции желчи желчного пузыря(включая установление диеновых коньюгатов) также было в пределах нормы,Наряду с указанным биохимическимизучением порции желчи желчного пузыря (полученной с помощью дуоденального зондирования) устанавливаютв сыворотке крови концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов 1следующим образом: 0,2 мл отцентрифугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл бидистиллированной воды, перемешивают, Затем приливают 4 мл изопропилового спирта, а сверху также 4 мл гептана. Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гвптановой). Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю - водно-спиртовую и верхнюю -15 гептановую. Добавляют 1,0 г сухого МаС 1, Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин, Переносят .верхний гептановый слой в сухую чистую про 20 бирку, закрывают стеклянной пробкой. В пробирку с изопропиловым спиртом и водной фазой вносят еще 1,0 г сухого ИаС 1. Покачивают 20 раз, переводят пробирку из вертикального25 положения в горизонтальное. Затем еще раз центрифугируют при тех же условиях. Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой. Измерения оптической плотности производят на спектрофотометре при длине световой волны 233 нм как в гептановой, так и в изопропиловой фазах. После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по 35 формуледР 2 ээ Чэгэ/мл Чгде,4 Рэ, - разница оптической плотности исследуемого образца и образца, содержащего вместо биологическогоматериала бидистиллированную воду;, 45Ч - объем экстрагированнойэгептановой или изопропиловой фазы, мл,Ч- исходный объем биологической жидкости - сыворотки.Концентрация первичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов в фазе изопропило- ВОГО спирта составляет согласно фор 55 муле в сыворотке крови0,266 . 4,21 э/мл 0,2и в фазе гептана 0,0834,2 П р и м е р 2Больной Б12 лет. Поступил в клинику с диагнозом стойкой желудочковой экстрасистолии и с подозреваемой дискинезиейжелчного пузыря. С помощью общепринятых способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральнойхолецистографии, биохимическогоисследования желчи) установлена гипомоторная дискинезия желчного пузыря,Определяют концентрацию первичныхпродуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов в фазахизопропилового спирта и гептана ипроизводят расчет в единицах оптической плотности на. 1 мп сыворотки крови по формуле. Концентрацию диеновых конъюгатов в фазе изопропиловогоспирта определяют согласно формулев сыворотке крови 0,59044,2 Эи в фазе гептана в сыворотке крови 1,4 Р/мл,0,06664,2 показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гептана в12,4сыворотке крови ф = 8,85, что превышает аналогичное соотношение у группы здоровых детей (6,06). На основании результатов эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, биохимического исследования желчи и определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови ставился сопутствующий нарушению ритма показатель соотношения диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворот 5,60ке крови= 3,20, что не отличается от показателей группы здоровых детей (6,06).Предлагаемым способом диагностики, как и общепринятым способом диагностики, исключена гипомоторная дискинезия желчного пузыря.1478125 и в Фазе гептана 0,0652 х 4 2рзмл 0,2 1 О 15 20 25 30 3540 Группадетей татистиескиеоказатели Числобольных ю г г 8, 16 (5, 19-11, 13)0,990,0019,19 (6,42-11,96)0,674,35 (2,63-6,07)0,490,14 эб 4 (322 бв 06)0 34 0 Х Х сердца диагноз гипомоторной дискинеэии желчного пузыря.П р и м е р 3. Больной С., 14 летПоступил в клинику с диагнозом стойкой суправентрикулярной экстрасистолии. С помощью общепринятых способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, общепринятого биохимического исследования желчи) исключена дискинеэия желчного пузыря. Наряду с биохимическим изучением порции желчи желчного пузыря, полученной с помощью дуоденального зондирования, определяют в сыворотке крови концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов в Фазе изопропилового спирта и в фазе гептана и производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки крови. Концентрация диеновых конъюгатов в фазе иэопропилового спирта в сыворотке крови составляла согласно формуле 0,67824,215,6 Р/мл 7 23/мл 0,2 и в Фазе гептана в сыворотке крови 0,0093 1О 1,7 Э/мл,0,2 показатель соотношения диеновыхконъюгатов в фазе изопропиловогоспирта к таковым в фазе гептана в15,6сыворотке крови в= 9 17 что пре 1,7вышает аналогичное соотношение угруппы здоровых детей (6,06).Спустя два месяца при наличиистойкой желудочковой экстрасистолииповторно определяют концентрациюдиеновых конъюгатов в фазе иэопропи,лового спирта и в фазе гептана в сыворотке крови, которые составлялисогласно Формуле в сыворотке кровив фазе иэопропилового спирта 0,5565 " 4 2 12,8 В/мл 2 ззмл 0,2 показатель соотношения диеновых коньюгатов в Фазе изопропилового спирта12,8к таковым в фазе гептана ф = 8,53,что превышает аналогичные показатели группы здоровых детей (6,06).На основании результатов определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропиловогоспирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови (при повторном обследовании его) ставился сопутствующийнарушению ритма сердца диагноз гипомоторной дискинеэии желчного пузыря,Точность предлагаемого способасоставляет 1007,Формула и з о б р е т е н и я Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей путем определения диеновых конъюгатов в биологических жидкостях, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови определяют количество диеновых конъюгатов, экстрагируемых изопропиловым спиртом и гептаном, рассчитывают соотношение диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана и при его значении 6,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря. Соотношение диеновых коньатов в Фазе изопропилово спирта к таковым в фазе птана в сыворотке крови