Способ определения глюкозы иили фруктозы в жидких средах

(54) СПОСОБ ОП И/ИЛИ ФРУКТОЗЫ (57) Изобретени биологической и ти, а именно к АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ ейегег У. НапйЬоок оЮг гпе Ьь.о 1 о 8 са 1ог 1 с, С 1 псхпа 1 з., ТогопЬигп, 1974, р.203. ЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ В ЖИДКИХ СРЕДАХ е относится к микро- пищевой промьппленносспособу определения глюкозы и/или фруктозы в биолоГических жидкостях .и пищевых продуктах.Цель изобретения - ускорение и упрощение анализа и,повышение его точночти. Сахара, содержащиеся в жидкихсредах, определяют газбхроматографически в виде их летучих производных,которые получают термической дегидратацией сахаров исследуемой пробы непосредственно в камере испарителя газового хроматографа, нагретого до230-240 С. Летучими производными глюкозы, фруктозы и их смеси являютсяфурфурол, ацетил-фуран и оксиметилфурфурол, при газохроматографическоманализе определяют их количество ипо этим значениям устанавливают количество глюкозы и/или фруктозы в исследуемой пробе1 ил., 1 табл, Изобретение относится к микробиолОгической и пищевой промышленности,в частности к способам определениясахаров в биологических средах, продуктах брожения, а также в соках, сиропах, меде и т.д.Целью изобретения является ускорение и упрощение анализа и повышениеего точности.Предлагаемый способ осуществляютследующим образом.В микрошприц набирают исслецуемуюпробу, содержащую глюкозу или фруктоз или их смесь, и вводят непосредственно в блок испарителя газового хромМтографа, предварительно нагретыйдо 230-240 с,Условия хроматографирования.Колонка длиной 3 м заполнена хромтоном с нанесенной на него жидкойфазой Карбовакс 20 М в количестве1%, Терморегулирование колонки отбб до 235 С со скоростью 2 С в минут. Расход водорода 30 мл/мин, возду-ха - 300 мл/мин, газ-носитель - азотс расходом 30 мл/мин. При количественнЫх определениях используют методабсолютной калибровки. В составлениикалибровочных графиков используютводные растворы чистых глюкозы, Фруктозы и их смеси различной концентраи (фиг.1 а,б,в), вводя по 10 мклолученных растворов непосредственноМ хроматограф. Концентрацию искомогокомпонента определяют, измеряя площадь пика на хроматограмме, и находято графику соответствующее количество сахара.На чертеже 1 а, 1 б - графики зависимости образования фурфурола и аце Отил-фурана при дегидрации соответтвенно глюкозы и Фруктозы а 1 в -график зависимости образования оксиметилфурфурола при дегидратации смесиФруктозы и глюкозы (1:1). Таким образом, при необходимости раздельногоопределения глюкозы и фруктозы могутбыть использованы графики 1 а и 1 б, апри суммарном определении глюкозы ифруктозы может быть иснольэована за Овисимость 1 в.В таблице даны результаты сравнительного определения глюкозы, фрукто"зы и общего содержания гексоэ по предлагаемому способу и по прототипу - 55методу анализа ацетилированных производных сахаров. Как видно из данныхгаблицы, по предлагаемому методу стандартные отклонения среднего результата меньше, а точность определения выше, чем при использовании прототипа.П р и м е р 1. Набираот в микро- шприц 10 мкл исследуемой пробы, содержащей глюкозу, например виноградный сок, и переводят ее в летучие производные термической дегидратацией, вводя ее непосредственно в блок испарителя газового хроматографа,о предварительно нагреваемого до 230 С. На хроматограмме находят площадь пика фурфурола, равную 22,5 ич, по калибровочной кривой 1 а устанавливают соответствующее этой величине зна" чение количественного содержания глюкозы - 7,3 г/л.П р и м е р 2, 10 мкл виноградного сока, содержащего фруктозу, переводят в летучие производные термической дегидратацией, вводя их непосредственно в блок испарителя газового хроматографа, предварительно нагреваемого до 240 С. На хроматограмме находят площадь пика ацетил-фурана, образовавшегося в процессе термической дегидратации, равную 8,2 мм, и по калибровочной кривой 1 в устанавливают соответствующее этой величине содержание Фруктозы, которое составляет 7,2 г/л.П р и м е р 3, В микрошприц набирают 10 мкл исследуемой пробы - виноградного сока, содержащего глюкозу и Фруктозуи подвергают переводу са" харов в летучие производные путем термической дегидратации, непосредственно вводя ее в блок испарителя газового хроматографа предварительно нагретого до 235 С. Иа хроматограмме измеряют площадь пика оксиметилфурфурола, которая равна 154 мм , и по калибровочному графику 1 В находят значение суммы глюкозы и Фруктозы - 14, 7 г/л,Предлагаемый способ позволяет ускорить анализ с 2-3-х сут. до 0,5 ч, упростить его эа счет исключения ряда операций и повысить его точность, а также позволяет осуществить анализбольшего количества проб исследуемого жидкого материала практически без его предварительной подготовки и при стабильной работе хроматографа, что повышает точность определений, экономит время и материалы.1434368 Предлагаемый способ Прототип Образец Средний результат и стандартное отклонение,г/л Относитель" Средний ре"зультат истандартноеотклонение,г/л тносительнаяогреюность,Х ная погрешность, 7 Глюкоза 7,5 + 0,22 Виноградный сокТо же + 1 г/л глюкозыТо же + 3 г/л глюкозы 1,8 7,3 + 0,13 8,4 + 0,18 10,3 + 0,12 2,9 2,2 1 фг 8,4 + 0,2510,3 + 0,35 3,0 3,3 Фруктоза Виноградный сокТо же + 1 г/л Фруктозы 7,2 + 0,11 8,2 + 0,16 10,2 + 0,12 712 + Оэ 45 бэО 8,2 + 0,52 6,3 1,2 То же + 3 г/л Фруктозы 10,2 + 0,63 6,2 Содержание гексоэГлюкоза + фруктоза 14,7 + 0,32 0,8 14,5 + 0,12 15,5 + 0,15 17;4 + 0,12 2,2 Виноградный сокТо же + 1 г/л глюкозы 1 ф 0 0,7 2,2 15,6 + 0,35 0,41 2,3 Формула изобретенияСпособ определения глюкозы и/или фруктозы в жидких средах, предусматриваннций перевод сахаров исследуемой пробы в летучие производные, введе 5 ние их в газовый .хроматограф и газохроматографический анализ с последующим установлением количества глюкозы и/или фруктозы, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и 1 упрощения анализа и повышения егов То же + 3 г/л глюкозы 17,5 + точности, перевод в летучие производные осуществляют дегидратацией сахаров при 230-240 С путем непосредственного введения исследуемой пробы виспаритель газового хроматографа, пригазохроматографическом анализе рассчитывают фурфурола, ацетил-фуранаи оксиметилфурфурола и по их эначе.ниям устанавливают количество глюкозы и/или фруктозы в исследуемой пробе.1434368 Составитель Л.Пашининактор А.Лежнина Техред М.Ходаннч Корректор М.Пож Реду аз 5550/47 Тираж 847 В 11 ИИПИ Государстве по делам изобре 113035, Москва, Ж, Произв город, ул. Проектная,нно-полиграфическое предприятие ЧО 60 180 ЮОао Ъ бО ж 20 Ы 1 одержаиие саяара, ф/ Подписноного комитета СССРений и открытийРаушская наб., д, 4