Способ количественного определения метионина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК ж 4 С ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ЛЬСТВУ СУДАРСТВЕННЫИ НОМИТЕТ СССРДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ К АВТОРСКОМУ СВИ(71) Ленинградский научно-исследовательский институт гигиены труда ипрофессиональных заболеваний(56) Лаурс Ю.Р Захаранс В.Я.,Банковский Ю.А. Определение Б-содержащих функциональных групп в органических соединениях. Спектрофотометрическое определение метионина и некоторых его производных с использованием перйодатного окислителя.Изв.АН Латв.ССР, СерХимия, 1982,У 1, с.59-62,Авторское свидетельство СССРУ 731362, кл,С 01 И 21/24, 1980.(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИОНИНА(57) Изобретение касается аналитической химии, в частности определения метионина в фармацевтическихпрепаратах. Для повьппения чувствительности анализ ведут последовательной обработкой пробы растворомацетата или нитрата ртути (11),И,М-диметил-п-фенилендиамина и РеС 1в НС 1 при нагревании на водянойбане. Затем полученный раствор фотометрируют. Способ позволяет увеличить в 4 раза чувствительность анализа при исключении использования ичиого рас тв орителя . 4 таблИзобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения метионина (Ы-аминометилмеркаптомасляная кис 5 лота).Целью изобретения является повышение чувствительности способа.П р и м е р. Точную навеску метионина (0,0400-0,2000 г) растворяют в мерной колбе емкостью 1 л в дистиллированной воде. В колориметрическую пробирку с пришлифованной пробкой вносят 0,5 мл 57.-ного раствора ацетата ртути (11),0,2-2,0 мл 15 раствора метионина, осторожно перемешивают, доводят объем раствора до 8,5 мл дистиллированной водой и помешают пробирку в кипящую водяную баню на 1 О мин. Раствор охлаждают до ком натной температуры, после чего приливают 0,5 мл хромогенного реагента (смесь 0,2 Х-ного раствора И,И-диме-" тил-и-фенилендиамина гидрохлорида в концентрированной соляной кислоте и 25 47-ного раствора хлорида железа (111) в 2 н.растворе соляной кислоты, взятых в соотношении Э:1) . Раствор перемешивают и через 15 мин фотометрируют при длине волны 500 нм в кювете 30 с толщиной слоя 2 см относительно холостого раствора, который готовят одновременно и аналогично пробе.Содержание метионина находят по градуировочному графику зависимости оптической плотности от содержания метионина в фотометрируемом объеме раствора,. Для построения градуиро-, вочного графика в серию колориметрических пробирок, содержащих по 40 0,5 мл 57-ного раствора ацетата ртути, вносят стандартный раствор метионина с концентрацией 0,1 мг/мл в количестве 0; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8;1,0; 1,5 и 2,0 мл и доводят объем 45 растворов до 8, 5 мл водой. Градуировочные растворы обрабатывают и фотометрируют аналогично пробе. Линейность грудуировочного графика наблюдается в диапазоне 0-200 мкг метионина. Окраска устойчива в течение 4 ч. Результаты определения метионина обрабатывают методом математической статистики.Результаты определения метиони" на в растворах представлены в табл,1,Тезультаты определения метионина в таблетках представлены в табл.2.Данные о влиянии условий предварительной обработки анализируемых растворов хорошодиссоциированными солями ртути и времени нагревания проб в кипящей водяной бане на результаты измерения концентрации метионина приведены в табл.З.Сравнительные данные, характеризующие чувствительность, селективность, достоинства и недостатки предложенного и известного способов, отражены в табл.4.Предлагаемый способ определения метионина в сравнении с известным отличается более высокой чувствительностью (в 4 раза), селективностью, устраняет необходимость применения токсичного растворителя.формула и э о б р е т е н и яСпособ количественного определения метионина путем обработки пробы анализируемого вещества химическим реагентом при нагревании на кипящей водяной бане с последующим фотометрированием полученного раствора, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности определения, обработку ведут последовательно сначала раствором ацетата или нитрата ртути (11) в воде, при нагревании на кипящей водяной бане, затем раствором Ю,й-диметил-п-фенилендиамина и хлорида железа (111) в соляной кислоте.1397812 Т а б л и ц а 1 Метрологические критерии при р 0,95 Оптическая Содержание метионина в растворе, мкг плотность,А, прип 6 ОтносительТочность прямого измерения ещ 1 с Я 310 Среднееквадратичное от ное стандартное отклонение, Я клонениеЯ АЙ 0 3,11 2,96 О 5,16 20 4,86 4,63 40 3,87 3,68 60 4,00 3,82 80 4,47 4,26 100 6,28 5,98 150 5,92 5,64 200 Таблица 2 Взято на анализ раствора таблетки в 1 л Оптичес- Найдено метионина Метрологические кая плот ностьхар-ки воды, мл Х 0,2510 Я 0,0025 0,39 0,25 0,5 Я 0,001 Заданная масса, г таблетки метионинав таблетке О, 045 0,090 0,181 0,269 0,359 0,450 0,671 0,889 0,559 0,565 0,569 0,571 0,560 0,066 0,057 0,025 0,014 0,011 0,009 0,009 0,006 в 0,5 мл в таблетраствора, ке,гмкг 124,2 Оэ 2480 125,6 Оэ 252 126,4 0,2528 126 э 9 Оэ 2538 124,4 0,24881397812 Таблица 3 Оптическая Заданометиони ПЛОТНОСТЬА при п4 на, мкг 22 100 30 20-25 20-25 20-25 0,5 100 30 0,5 100 30 1,0 100 100 0,5 100 10 100 0,5 100 100 1 О 0,5 100 15 0,5 100 20 100 0 5 100 100 1,0 Таблица 4 Способ Нижний пределопределения Растворитель Селективнос ть мкмоль мг/100мл С применениемаллоксангидрата(токсичньй органический растворитель) Не указана 0,27 0,400 Предлагаемый 0,067 0,125 Вода Определению метионина не мешают алании,аргинин,аспарагин,валин, глицин,лейцин, амины сахара, глицерин, жирные кислоты, спирты, аль- дегиды Условия обработки оастворов до прибавления хромогенного реагента Добавлено соли ртути Температу- Времяо (5 Х-ный раствор),мл ра, С экспоэициимин Ацетат Нитрат 0,370 0,450 0,452 0,450 0,43 б 0,449