Способ идентификации у. pseudo-тulеrеulоsis u у. ентеrосоliтiса

) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ У,РЬЕОООТОВЕКСО.0 И У. ЕйТЕКОСО.ТСА леи и 53-го Изобретение относится к медицине, а именно микробиологии.Известен способ идентификации. У. рзецдойцЬегсц 1 озь и У. епйегосо 1 йса, основанный на их свойстве ферментировать мочевину1.Известен способ идентификации У. рзецдойцЬегсц 1 овз и У, епйегосо 1 й 1 са путем посева исследуемого материала на плотную селективную среду с последующим пересевом чистой культуры на цветную дифференциальную среду, содержащую мочевину, инкубацией и учетом результатов 2 .Однано известный способ является недостаточно точным и не позволяет диФференцировать У. рзецдоцЪегсц 1 овв от У. епйегосо 11 Сса.Цель изобретения - повышение точности способа.Поставленная цель достигается,тем что согласно способу идентификации У. овецойцЬегса 1 оз 1 з и У. епйегосо 11 са путем посева исследуемого материала на плотную селективнуюсреду с последующим. пересевом чистойкультуры на цветную дифференциальнуюсреду, содержащую мочевину, инкубацией и учетом результатов культуру .дополнительно пересеваат на питатель"ный агар с содержанием 5,1-5,3 йаЮи питательный агар с содержанием3,6-3,73 йаС и при наличии ферментации мочевины на цветной дифференциальной среде и отсутствии роста на .обеих средах, содержащих йаСО, идентифицируют У. рзецдойцЬегсц 1 озз,а при наличии ферментации мочевинына цветной дифференциальной среде иотсутствии роста на питательном агаре с содержанием 5,1-5,33 йаС идентифицируют У. епйегосо 1 йса,П р и м е р. Производят посев фекалий больного на среду Энда. Колониюбактерий, выросшую на среде Эндо через 2 ч инкубации при 37 ОС, снимаютпет " суспендируют в капле0,8 стерильного раствора йайсектора питательного агара с различными концентрациями МаС 1 от 1,5 до1 ОФ. Через 24 ч инкубации учитываютрост бактерий по ходу посева. Солевой питательный агар готовят на основе стандартного питательного агараиз рыбного гидролизата, при этом придобавлении в среду МаО до требуемой концентрации учитывают его первона 1 О. чальное содержание (0,63 МаСГ) в сухом питательном агареСреду стерилизуют при 120 С 20 мин и разливают0в стерильные чашки Петри,Рост всех .исследуемых штаммовУ. рзецсойцЬегсц 1 озз и У. епйего-.соСса подавляется при концентрациях в питательном агаре ИаСс 5,05,33, при которых все остальные энтеробактерии хорошо растут, их рост по 20 давляется преимущественно при концентрации МаИ 7 т 93, Хлористый натрийв концентрации 5,0-5,34 в питательномагаре позволяет четко дифференцировать 1003 штаммов У. рзеццойцЬегсцо 25зз и У. еп 1 егосот.са от других видов энтеробактерий, ферментирующихмочевину. Хлористый натрий в концентрации 3,5-3,7 подавляет рост1003 штаммов У. рзецдойцЬегсцоз и56 4 о44 штаммов У. епйегосо 1 йса, т.е.испытание роста бактерий на питательном агаре с содержанием 3,5-3,73 МаИпозволяет провести дифференциацию96 + 2,23 штаммов У. епйегосо 1 йсаот У. рзецдойцЬегсцоьз.Использование изобретения позволяет повысить точность идентификациив 3,6 раз и тем самым улучшить диагЮностику псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза,формула изобретения Способ идентификации У. рзецдойцЬегсц 1 озз и У, епйегосо 1 йса путем посева исследуемого материала на плотную селективную среду с последующим пересевом чистой культуры на цветную дифференциальную среду, содержащую мочевину, инкубацией и учетом результатов, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности, культуру дополнительно пересевают на питательный агар с содержанием 5,1-5,34 МаС 0 и питательный агар с содержанием 3,6-3,7 ь Май и при наличии ферментации мочевины на 3 988865 на стекле стерильной чашки Петри. Одну петлю взвеси бактерий засевают на скошенный столбик цветной дифференциальной среды, содержащей 900 мл 13-го агара Хоттингера и 100 мл раст вора, представляющего собой глюкозу (1 г), лактозу (10 г), мочевину (10 г), комплексный индикатор, состоящий из индикатора Андреде (100 мл), бромтимолового синего (0,4 г) - 20 мл. Цветную дифференциальную среду готовят по известной методике 2 .Одновременно по одной петле взвеси бактерий засевают радиальным штрихом на сектор питательного агара с содержанием 5,33 МаИ и сектор питательного агара с содержанием 3,7 МаСс в чашках Петри, Посевы выращивают при 37 ОС 18-24 ч, после чего учитывают результаты. На цветной дифференциальной среде рост бактерий сопровождается синей окраской косячка и столбика, что свидетельствует о ферментации мочевины. На солевом питательном агаре с содержанием 5,33 МаЮ нет роста бактерий, на солевом -питательном агаре с содержанием 3,73 МаС 1 есть рост бактерий по ходу посева, следовательно, выделенный микроорганизм относится к виду У. епйегосо 1 йса.Изучена чувствительность к различным концентрациям МаС в питательном агаре у 75 штаммов У. еп 1 егосо 1- 1 са (35 эталонных культур - 7 штаммов серогрупп А, В, 11, 11, Ч, Ч, Ч 1, 28 штаммов серогрупп от 01 до 034 всех пяти биоваров) и 40 клинических штаммов преимущественно серо- групп 03 (А) и 09 (Ч), 60 штаммов У. рзецдойцЬегсцозз (13 эталонныхкультур - 6 штаммов серогрупп А, В,1, 1, 1 Ч, Ч, 7 штаммов тех же серогрупп из другой коллекции) и 47 45клинических штаммов всех сероваров,преимущественно серовара А, 124клинических штамма всех видов Ргойецз и 39 клинических штаммов других энтеробактерий КеЬзе 1 а 50рпецщопае, ССгоЬасСег ЬгецпсЬ 1,ЕпйегоЬасйег с 1 оасае, Зеггай 1 а вагсезсепз. Указанные культуры засевают на среду Зндо для получения изолированных колоний и инкубируют при 37 С 24 ч, По одной колонии суспендиоруют в капле 0,8 Я-го раствора МаСЯ и засевают по одной петле взвеси наТираж 521 Подписное ВНИИП 4 Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, 8-35, Раушская наб., д. ч/5Заказ 10992/3,ш ивФилиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная,5 988865 4цветной дифференциальной среде и от- Источники информации,сутствии роста на обеих средах, со- принятые во внимание при экспертизедержащих йаС 0, идентифицируют т.рзец. Лабораторная диагностика псевдоцЬегсцоз 1 з, а при наличии фермен- Аотуберкулеза. Методическое письмо,тации мочевины на цветной дифферен Владивосток, 1968, 12.циальной среде и отсутствии роста на 2, Методические рекомендации попитательном агаре с содержанием 5, 1- лабораторной диагностике кишечного5,3 ь НаС 1 идентифицируют У. епйего- иерсиниоза. Йркутск, 1979, 8 (просо 1 С 1 са. тотип),