Способ получения убихинона

) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ УБИХИНОНА ние вы- ширение е с У сх еи ство" ст вии ничес олу я со ныерера расят ар ст 1Изобретение относится к медицинской промышленности и касается технологии получения биологически активных веществ из сырья животного происхождения,Известен способ получения убихинона из сердца лошади, включающий измельцение ткани, гидролиз ее в .кипящем растворе метанола, содержащем щелочь и антиоксидант, экстрак" цию диэтилоловым эфиром, дальнейшую обработку полученного экстракта для отделения сопутствующих линидов, хроматографическую очистку на колонке с окисью алюминия и последующее выделение и кристаллизацию целевого продукта 13Однако известный способ не обеспечивает достаточно высокого выхода целевого продукта (95 мг убихинона из 1 кг сырья) 1 а сырьевая база для его получения является ограниченной. Цель изобретения - повышехода целевого продукта и рассырьевой базы,Поставленная цель достигаечто согласно способу полученихинона из сырья животного проидения, включающему измельчениходного сырья, его гидролиз рром щелочи в метаноле в присуантиоксиданта, экстракцию оргким растворителем, обработкуценного экстракта для отделенпутствующих липидов, последующухроматографицескую очистку, выдние и кристаллизацию целевогодукта, в качестве исходного сиспользуют непищевые и малоцевиды морепродуктов и отходы иботки пищевых видов, гидролизвором щелочи в метаноле провоодновременной экстракцией .триэтиленом, полученный экстрактвают, обрабатывают его смесьюнол - вода при соотношении ра950391 4 5 10 15 20 П р и м е р 1. В качестве сырьяиспользуют рыбную мелочь (несортовую скумбрию) . Рыбную мелочь целиком перерабатывают на мясорубке.Навеску 5 кг рыбного фарша помещают в реактор на 20 л, приливают ч лтрихлорэтилена, 3,5 л 15/-ного раствора КОН в метаноле (вес/объем), содержащего 50 г пирогаллола, и содержимое непрерывно перемешиваютмешалкой 15 мин при 25 С. Послеотстаивания нижний слой трихлорэтилена сливают, в отстойник на 30 ли проводят дважды повторную экстракцию 1,0 л трихлорэтилена при непрерывном перемешивании содержимогореактора 30 мин, Собранные вместеэкстракты (11,2 л) промывают приплавном перемешивании 1 л воды, азатем дважды проводят нейтрализацию 2,5 л 2,5/-ного раствора НС Ев воде, После тщательного отделенияводного раствора проводят вакуумнуюотгонку растворителя до 1/10 первоначального объема - 1200 мл. Концентрированный липидный экстракт однократно промывают 500 мл метанолводного раствора (11:1) для удаления поверхностно-активных веществ, а затем полностью удаляют растворитель на вакуумном испарителе. Получают 143 г суммарных липидов и растворяют их в трехкратном объеме(ч 30 мл) метанол-ацетонового раствора (1: 1) при +15 С и оставляют на ночь при - 15 СПолученный осадок отфильтровывает и промывают двумяобъемами охлажденного до (-15)о(-20) С метанол-ацетонового раствора (300 мл), выпаривают под вакуумом и получают 100 г сопутствующих липидов, Экстракт, содержащий убихинон, упаривают под вакуумом и получаютна этом этапе 110,7 г липидного остатка, содержащего убихинон, Наносят указанный липидныйостаток в минимальном объеме гексана на колонку с кремниевой водной кислотой предварительно отмы/той перегнанным метанолом и активированной при 120 С в тецение 5 ч.о 3рит елей 1: 1, з ат ем охлажденной смесью ацетон - метанол при соотношении растворителей 1;1, а хроматографицескую очистку осуществляют на кремнийсодержащем сорбенте с последующей последовательной элюцией гексаном и бензолом,25 30 35 40 45 50 55 Сорбент берут в 10-кратном по весу к липиду количестве (210 г кремниевой водной кислоты 510 и Н 20).Соотношение диаметра столба колонки к его высоте 1:ч:5. Элюирование проводят десятикратным объемом(объем/вес) гексана, а затем бензола. Собирают Фракции по 250-500 млэлюатов. Убихинон выходит с первойполовиной порции бензола, Упаренныефракции объединяют, удаляют растворитель в вакууме и получают суммарный препарат убихинона 9,5 г. После повторной хроматографицеской очистки и двухкратной кристаллизации изабсолютного этанола получают 17,90 мгубихинона в том числе 6,8 мг кристаллического вещества, или на 1 кгнавески ткани 3,58 мл убихинона, втом цисле 1,36 мг кристаллическоговещества (383 от общего выделенногоубихинона). П р и м е р 2, В качестве сырья использует печень сельдевой акулы. Навеску 25 кг измельченной печени акулы помец 1 ают в реактор на 100 л, приливают 20 л трихлорэтилена, 175 л 161-ного раствора КОН в метаноле, содержащего 250 г пирогдллола. Проводят аналогично примеру 1 одновременно гидролиз и экстракцию материала, обработку экстракта соответствующими количествами воды, 2,5-ного раствора НС 9 в воде, упаривание до 1/10 (5,0 л) первоначального объема (56 л), промывание 2,5 л метанолводным раствором (1;1), удаление растворителя на вакуумном испарителе. Получают 950 г суммарных липидое, отделяют 352 г сопутствующих липидов и 590 г липидного остатка наносят в гексане на колонку с 3 кг кремниевой водной кислоты, Элюиру" ют последовательно 30 л гексана и 20 г бензола. Получает 35,Й г суммарного препарата убихинона, После повторной хроматографической очистки и двухразовой кристаллизации из абсолютного этанола получают 165,2 мг убихинона, в том числе 51 мг кристаллического вещества, или на 1 кг навески печени 6,6 мг убихинона, в том числе 2,01 мг кристаллического вещества (30,91 от общего выделенного убихинона). Эффективность извлечения убихи -нона по предлагаемому способу в данФормула изобретения 5 95039 ном примере 67,33, в том числе выход кристаллического вещества 20,8 ь.П р и м е р 3. В качестве сырья используют печень морзверя (сивуча). Навеску 10 кг измельченной печени морзверя помещают в реактор на 50 л. Аналогично примеру 1 получают 302 г суммарного липида, отделяют 161 г сопутствующих липидов, Из 139 г липидного остатка после первой хрома о тографической очистки получают 15,2 г суммарного препарата убихинона, из которого после дальнейшей очистки получают 102 мг убихинона, в том числе 75 мг кристаллического вещества 15 (73,51 от общего выделенного убихинона).Эффективность выделения убихинона О в этом сырье 86,4/, в том числе выход кристаллического вещества 63,6 В 2 оП р и м е р 4, В качестве сырья используют печень руветты. Навеску 5 кг измельченной печени рыбы руветты помещают в реактор на 20 л, Аналогично примеру 1 получают 192 г сум- д марных липидов, отделяют 125 г сопутствующих липидов. Из 64,5 г липидного остатка после первой хроматограФической очистки получают 10,2 г суммарного препарата убихинона из которого после дальнейшей очистки получают 136,15 мг убихинона, в том числе 56,8 мг кристаллического вещества или на 1 кг навески печени руветты 27,2 мг убихинона, в том числе 11,36 мг кристаллицеского вещества (41,8 от общего выделенного убихинона)Эффективность выделения убихино" на в этом сырье 69,9/, в том числе выход кристаллического вещества 29,21.,П р и м е р 5. В качестве сырья используют целиком мовроликус. Навес" ку 2,5 кг измельченной массы мовроликуса помещают в реактор на 10 л. Аналогично примеру 1 получают 70 г суммарного липида, отделяют 35 г сопутствующих липидов. Из 32,5 г липидного остатка после первой хроматографической очистки получают 4,5 г суммарного препарата убихи 0 нона, из которого после дальнейшей очистки получают 100,8 мг убихинона, в том числе 68,7 мг кристаллического вещества, или на 1 кг навески измельченной массы мовроликуса 40,32 мг убихинона, в том числе55ВНИИПИ Заказ 5801/10 Тира 4 627,48 мг кристаллического вещества(68,21 от общего выделенного убихи нона),Эффективность выделения убихинона по предлагаемому способу в данном примере 70, в том числе выходкристаллического вещества 47,73.Предлагаемый способ обеспечивает высокий выход целевого продукта,утилизирует непищевые виды морепродуктов животного происхождения и отходы промышленной обработки рыбы.Кроме того, способ применим при выделении убихинона из морепродуктовпри низком его содержании в исходном сырье. Способ .получения убихинона из сырья животного происхождения, включающий измельчение исходного сырья,его гидролиз раствором щелочи в метаноле в присутствии антиоксиданта,экстракцию органическим растворителем, обработку полученного экстрактадля отделения сопутствующих липидов,последующую хроматографическую очистку, выделение и кристаллизацию целевого продукта, о т л,и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и расширениясырьевой базы, в качестве исходного осырья используют непищевые и малоценные виды морепродуктов и отходы переработки пищевых видов, гидролиз раст"вором щелочи в метаноле проводят содновременной экстракцией трихпорэтиленом, полученный экстракт упаривают, обрабатывают его смесью метанол - вода при соотношении растворителей 4:1, затем охлажденной смесью ацетон - метанол при соотношениирастворителей 1: 1, а хроматографическую очистку осуществляют на кремнийсодержащем сорбенте с последующейпоследовательной элюцией гексаноми бензолом.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. 1 ЕБ.1. О. Го 1. 5 ове сЬеп.1 са 1геасС 1 соз о 1 цЬцц 1 попе 1 псЬд 1 п 911 ь со цчегзоп 1 по ФЬе 1 ьоаегсО Ьс 6 гоаепо 3. Во сЬ. е с В ори уь.Асса, 863, ч. 73, 11 3, р. 349-366ж 714 Подписное