Способ получения нуклеозидов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
(и)942186 Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(51)М. Кл,С 12 Р 19/38 (С 12 Р 19/ЗВ С 12 Р 1/04) (53) УДК 663.1(088 8) Ркударатееяяий коиятет СССР ао аелаи язееретеяяй я отарытяй(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НУКЛЕОЗИДОВ Изобретение относится к биохимии, а именно, к способу получения нуклеоэидов, которые применяются в медицине и научных исследованиях.Известен способ получения нуклеозидов, предусматривающий гидролиз РНК ферментными препаратами, содержащими нуклеаэы и фосфатазы, при нагревании с 11то В качестве ферментных препаратовиспользуют внутриклеточные ферменты,что усложняет процесс их получения,Кроме того, необходима активация ферментов, разрушающих нуклеозиды. Выход нуклеозидов составляет 513.Цель изобретения - увеличение выхода нуклеозидов и упрощение процесса,20Указанная цель достигается тем,что в способе получения нуклеозидов,предусматривающем гидролиз РНК ферментными препаратами, содержащими нуклеаэы и фосфатазы, при нагревании, в качестве ферментного препарата используют внеклеточные ферментымикроорганизма Асс 1 пощусеэ сое 11 со 1 огА, при этом гидролиэ ведут при37-40 оС, рН 8-9,1 в присутствии хлористого магния в концентрации 1 105 -10 М, Штамм Асй 1 пощусеэ сое 11 со 1 огА зарегистрирован во "ВНИИгенетика" под коллекционным номером"ЦМПМ 5-464" и имеет следующие морфологические и физиологические характеристики,На твердой среде, содержащей осахаренные амилазой пшеничную муку икрахмал, соли, мицелий имеет видочень тонких разветвленных гид. Стенки клеток мицелия прямые. Ширинаклеток мицелия 0,71-0,93 ммк. Спороносцы спиральные, с 1-3 завитками,нередно с примитивными спиралями,расположенными моноподиально, одиночные. Споры.овальнйе, шаровидные,с гладкой оболочкой.5 1 О 15 20 25 эо Э 5 до 50 55 Колонии неправильной округлойформы, края неровные, воздушныймицелий слабый, колонии серого илирозовато-красного цвета. Диаметргигантской колонии на 10-е сут роста 10- 12 мм. Среда не буреет, пигмент в среду не выделяется.На агаризованной среде Чапекас 33 сахарозы рост слабый, растеттонкой почти прозрачной пленкой.Колонии круглые, поверхность ровная,воздушный мицелий слабо развит, светло-розового цвета, диаметр колонии6-7 мм,На крахмал-аммиачной среде ростслабый, тонкой пленкой, среда неокрашена, диаметр колонии 3-4 мм,На МПА образует небольшие колонии неправильной формы диаметром7-8 мм растет в виде тонкой морщинистой пленки, в центре колонии слегка выступающей над поверхностью агара.Края колонии неровные, воздушныймицелий скудный, неокрашенный, сре, да не буреет.На сусло-агаре растет хорошо ввиде мощной морщинистой пленки кремового цвета. Воздушный мицелий отсутствует, колонии круглые, краяволнистые, диаметр 12-15 мм.На картофельно-пептонном агарерост хороший, колонии в виде морщинистой пленки, окрашенные в красновато-розоватый цвет, Края колонииволнистые, диаметр 6-7 мм, воздушныймицелий скудный белого цвета.На синтетической среде растетхорошо в виде небольших колоний диаметром 6-7 мм. Колонии гладкие, вцентре слегка морщинистые, края неровные, колонии бесцветные или слегка розоватые.На ломтике моркови рост слабый вместе укола; на ломтике картофелярост слабый, в верхней части столбика в виде морщинистой пленки кремового цвета; мясо-пептонную желатинуне разжижает; молоко хорошо пептонизирует на 10-е сут. Нитраты невосстанавливает,Оптимальная температура роста370 С - рост хороший в нижней частикосяка в виде морщинистой пленки.При 50 С - рост отсутствует,Отношение к углеводам: крахмалгидролизует, сахара употребляетс подкислением среды,П р и и е р 1, 5 л культуральнойжидкости, полученной в результате культивирования микроорганизмаАсспощусез сое 1 соог А подвергают сепарации, Получают 4 л спернатанта с активностью нуклеазы170 ед/мл.100 г рибонуклеиновой кислотырастворяют в 1 л воды при подщелачивании водным раствором аммиакадо рН 9,1. К полученному растворуРНК добавляют 4 л фильтрата культуральной жидкости и снова доводятрН реакционной смеси до 9,1. Затемдобавляют 5 г хлористого магния иустанавливают температуру реакционной среды 39 ОС. Выдерживают 10 чпри 37-40 С и 89-9, при постояноном перемешивании рН поддерживаютдобавлением раствора аммиакаПослеокончания ферментативной реакциигидролизат содержит, г: гуанозина18,0, аденозина 15, цитидина 9,1,уридинаОбщее количество нуклеозидовопределенное методом ионообменнойхроматографии, составляет 56,1 от .РНК,П р и м е р 2, Используют супернатант, полученный как в примере 1,с нуклеазной активностью 300 ед/мл.100 г рибонуклеиновой кислоты растворяют в 1 л воды при подщелачивании 2 Н гидратом окиси натрия до рН 8,7, добавляют 4 л супернатанта культуральной жидкости, полученному, как в примере 1, с активностью 300 ед/мл и снова доводят рН реакционной среды до 8,7, Затем добавляют 5 г хлористого магния и выдерживают 6 ч при 37-40 С и рН 8 5-8,7 при постоянном перемешивании рН поддерживают добавлением 2 Н раствора гидрата окиси натрия. После окончания ферментативной реакции гидролизат содержит, г: гуанозина 18,8, аденозина 16 цитидина 9,2, уридина 14,7 Общее количество нуклеозидов 58,7 Г, от РНК.Предлагаемый способ позволяет увеличить выход .нуклеозидов, упростить процесс получения и сократить его длительность,формула изобретеня Способ получения нуклеозидов, предусматривающимгидролиз РНК ферментными препаратами, содержащими нуклеазы и фосфатазы, при нагрева5 947 нии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью увеличения выхода нуклеоэидов и упрощения процесса, в качестве ферментного препарата используют внеклеточные ферменты микроорга.- низма Асй 1 поаусез сое 11 со 1 ог А, при этом гидролиз ведут при 37-40 оС,186врН 8,0-91 в присутствии хлористогомагния в концентрации 510 - 110м.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент Японии В 47-27037,кл. 16 Е 611.2, 1972.1Подписное Заказ 5527/39 Тираж 505 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Рауаская наб., д. 4/5
СмотретьЗаявка
2950163, 04.07.1980
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ "БИОХИМРЕАКТИВ", ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ БИОТЕХНИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ
ШАХОВА ТАТЬЯНА ВИКТОРОВНА, ХОМЯКОВА ГАЛИНА ИГОРЕВНА, ФРИДМАН ТЕРЕЗА ФЕЛИКСОВНА, МАЛЕЙ СЕРГЕЙ МИХАЙЛОВИЧ, КОНОВАЛОВ СЕРГЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ, ШНИТКО МАЙЯ РОБЕРТОВНА, МИКСТАЙС УЛДИС ЯНОВИЧ, КАЛУНЯНЦ КАЛУСТ АКОПОВИЧ, ГАЙЛУМА МАРА АВГУСТОВНА
МПК / Метки
МПК: C12P 19/38
Метки: нуклеозидов
Опубликовано: 30.07.1982
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-947186-sposob-polucheniya-nukleozidov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения нуклеозидов</a>
Предыдущий патент: Штамм sсеnеdеsмus овliguus 885, используемый для очистки промышленных сточных вод от цианистых соединений натрия и калия
Следующий патент: Способ дубления кож для низа обуви
Случайный патент: 181698