Продуцент целлюлолитических ферментов

гян 1:сих 1 се От авт. свидетельстваЗаявлено 24 1 /1969 ( 13 Р 3428/28-13) л 6 Я, 22/01 присоединением заявкигрисритст 1 ПК С 120 13/10С 07 д 7/028С 121 3/00УДК 577,15.07(088,8) Комитат по делать изооретеи 1 и от 1:рытий ори Совете Министров СССР1 лстсиь3 публиковано 28.1 Х.1970 Дата опубликования описания 17 П.197 1 вторы:зобрстсш 1 я С. Щело иИ,Г.С тдел микробиологии АН Уз Заявитель 1 ТАММ АЯРЕКЯ 1.1 Л 1 ТЕРК 118 УзЦ- ПРОДУ ЦЕЛА ЮА ОА ИТИ Ч ЕСКИХ ФЕРЗЯ ЕНТОВ штамм Азрегр 11 цз 1 еггенз родуцентом целлюлолитичеи 30 С определяо ахарон по методу в модификации фермент) А. РадисПредлагаемьиУзЦявляется пских Ферментов.Штамм выделен из содержимого рубцакрупного рогатого скота.Для получения целлюлолитических ферментов гриб культивируют в глубинных условияхна минеральной среде Чапека, содержащей2 - Зоо фильтровальной бумаги, при значениирН среды 5,0 и температуре 30 С в течение10 суток. Целлюлолитическая активность культуральной жидкости гриба: карбоксиметилцеллюлозная 40500 ед/л, целлюлозна я1310 ед/л.Карбоксиметилцеллюлозная и целлюлозьаяактивность ферментного препарата, полученного из культуральной жидкости осаждениемэтанолом, соответственно составляет 22800 иб 20 ед/г.Выход фермента 1,б г,Карбсксимстилцеллюлозняя активностькультур альной жидкости известного гриба.-Ьрегр 11 из 1 и 1 тид а 1 и составляет лишь4800 ед/л, фсрментного препарата 4100 ед/г,Целл 1 слолитическую активность (с - фереент) культуряльной ркидкости, я также фе 1 Оментного препарата определгпот ио степенипадения вязкости субстрата карбоксиметилцеллюлозы (степень полимеризацрр 400, степень замещения Зб) под действием фермента и по количеству редуцирующих сахаров, образовавшихся при гидролизе этого субстрага.Степень падения вязкости определяют с помощью вискозиметра Оствальда по времени5 истечения 5 лиг 0,3%-ного раствора МЯ-КМЦ,1, которому дООЯВляют 1 тял кУльтуральнОЙжидкости гриоа, разведенной в 50 раз (1: 50)в ацстатном буфере, рН 5,0.При определении активности по количеству10 образовавшихся редуцирующих сахаров к5 лг,г 1%-рОго раствора Ха-КМЦ добавляют1 ял той же забуферной (1: 50) культуральной жидкости.После 1 час гидрслиза пр15 количество рсдуцирующих сСомоджи и НельсонаМ. И, Верховцевой.Активность фермента выражают в процентах падения вязкости ХЯ-КМЦгг/,1 л обра 20 зовавшихся редуцирующих сахаров, а такжев условных единщах активности.Целлюлозную активность (Ст -определяют методом, описанным Нневой и др по количеству образую25 харон при деиствии культуральнсй1:а хлопок,Морфология. Сусло - агар, Сиороношениеконидиальнос, кснидии шаровидные 2,5 - 3,0 лв диаметре, расположены цепочками, соеди 30 ненными в колонку. Конидиеносцы бесцветные282248 Предмет изобретения Составитель В. ДуньеТехрсд А. А, Каышиикова К рректор Г. С. Мухина Редактор А. Б. Бер Заказ З 5%,Ч Тираж 480 По;писиосЦНИИПИ Коиптста по делам изобретений и открыти при Свисте Мишстров СССРМосква, Ж, Раушская паб., д. 45"ио р 1), пг 1, С;и;ова, 2 глядис, 1 гэззс 1 го 5 6,(150 - 160,н. Дямс".рверхушечного пт зыр; 12- - 14Стсрпгмыбольшей час гьи зу 1 гя.ные: герггич:пе1,76,0 У,О , в Ории пье 1,7(5,0 - 6,0 О няцеллюлозном яг; ре; гриб морфологпчески 5почти не отличается.Твердая среда ЧапекаДокся, Через двоесуток после посева колонии белье, тушиспс,в центре выпуклые угсголтгснгпс, На трстьичетвертые сутки середина колоний окряшивается в светло-коричневый цвет вслсдс 1 висобразования конидий, край остается белым.На пятые-седьмые сутв вся колония становится коричневой (цвет корицы). Выделяетжелтый пигмегт в среду, Обратная стороа 15колоний оранжево-кор ичневая.Жидкая минеральная среда Чапека - Докса(с полоской фильтровальной бумаги). Черездвое суток на полоске фильтровальной бумаги появляется коричневый мицелий, котогзый 20со временем замещает всю бумагу, находящуюся . над. уровнем питательной среды.Часть .бумаги, погрукенняя в среду, растворяется, На поверхности среды образуется коричневая юцелиальная пленка. 25Сусло - агар. В.двухсуточной культуре колонии белые, пушистые, в центре выпуклые,уплотненныс, к краю мицелий тонкий. Нятретьи сутки ня выпуклой части появляетсясветло-коричневое окрашивание от конидпй, З 0на пятые сутки вся колония становится коргчневой бархатистой. Обратная сторона коло шйоранжево-коричневая. Диаметр 4 -5 си.Целлюлозный агар. На вторые-третьи сутки гриб образует слаборазвитый мицелий, Ко- ч 5лопни коричневые, клочковатые, 3 - 5 сл вдиаметре. Пигмент в среду не выделяется. Обратная сторона колоний не окрашена. На молочно-белом целлюлозном агаре образуют:япрозрачные зоны растворения целлюлозы. 40Отношение к углеводам. Лссимглирует глгокозу, сахарозу, мальтозу, целлобиозу и цел.чо.лозу. В качестве источника углеводйстого итания для даного штамма может слу ситестественная клетчатка, содержащаяся, няпример, в пшеничной, ржаной и рпсогой соломе,Отношение к источникам азота, Хорошо усваивает минеральный азот в виде ХяМО(НН 4) 50 г, плохо - органический в виде псптона.Ферментный препарат целлюлозы, голу енный с помощью предлагаемого штамма, может быть использован для разрушения оболочки растительных клеток с целью лучшей 55экстракции содержащихся в них веществ; дпищевой промышленности, например, при производстве пива и соков для увеличения выхо;я эгсратг и Осгетлсггия, я также и сельском хозяйгстде при гронзводсве кормов. Применение целгнолозы прп обработке грубых кормов оу.ст способствовать свь.и егпю содеркания легкоусдсяемых углеводов и размягчению кормя,Штамм Лзр гц 111 цз 1 сггецз УзЦ- - п 1 го;- цспт целлюлолитических ферментов.Морфология. Сусло - агар. Спороношепие конидиальное, Конпдии шаровиднье, диаметр пх 2,5 - 3,0 , расположены цепочками, сосдпесггымп в ОлОпку. КОнпдиеггосцы Оссцзег пыс гладкие, размером 5 - 6;х,150160 р. Дпамср верхушечного пузыря 12 - 14 ц Стеригмы большей частью двурядные; размер первичных 1,7(6,0 - 7,0 р, вторичных 1,75,0 - 6,0 .Твердая среда Чапека - Докса. Через двое суток колонии белые, пушистыс, в центре выпуклые плотные. 1-1 а третьи-четвертыесутк середина колоний окрашивается в светло-коричневый цвет вследствие образования кошдий, край остается белым. На пятые-седьмые сутки вся колония становится коричневой (ивет корицы), выделяет желтый пигмент в среду, ооратная сторона колоний оранжевокоричнсвого цвета.Жидкая минеральная среда чапека в Док (с полоской фильтровальпой бумаги). Через двое суток на полоске бумаги появляется коричневый мицелий, который со временем замещает всго бумагу, находящуюся над уровнем питательной среды, Часть бумаги, погруженная в среду, растворяется. 1-1 а поверхности среды образуется коричневая мицелиальная пленка.Сусло в аг, В двухсуточной культуре колонии белые, пушистые, в центре выпуклые уплотненные, к краю мицслий тонкий. 1-1 а третья сутки на выпуклой части появляется светло- коричневое окрашивание от конидий, На пя. тые сутки вся колония становится коричневой бархатистой, Обратная сторона колоний оранжево-коричневая. Диаметр колоний 4 - 5 с:я,Целлюлозньй агар. На вторые-третьи су- ки гриб образует слаборазвитый мицслий. Колонии коричнсвье, клочковатые, диамегр нх 3 - 5 слс. Пиглент в среду не вьгделяетс, обратная сторона кологий ге Окрашена. 11 я ъоло гпо-белом целлюлозном агаре образуотея прозрачные зоны растворения целлголозы.Отношение к углеводам. Ассимилирует глокозу, сахарозу, мальтозу, целлюлозу, целлобиозу.Отношение к источникам азота. Хорошо усваивает минеральный азот д диде ХяКОа, (ХН,)в 50, плохо органический - пептон,