Способ определения резистентности эритроцитов

Союз СоветскикСоциалистическиеРесттубяик ИСАНИЕ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ) Приоритет СССР вф аелем кзоЬретекОпубликовано 30, 04,82, БюллетеньВата опубликования описания 02. 0(5 К 612, 13 (088.8) и открыт 2) Авторы изобретения Шепотиновский, 3. И. Микашинович и 1 И. В, Фирсова государственный медицинск й институт(7) Заявител Ростов 4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОС ЭРИТРОЦИТОВ возрастающеи интен05 до 0,6 Вт/сме пкГц,ствляют следующим ованияся больом спо"ьностью Изобретение относится к мед а именно к гематологическим л торным исследованиям, и может использовано для диагностикисикозах, бронхопневмойиях, ту лезе, лейкемии, лимфогранулом циррозе печени, при различных тических заболеваниях.Известен способ определения резистентности эритроцитов путем их разрушения с последующим определением гемоглобина 11 .Однако на проведение исслед 1 известным способом затрачивает шое количество времени, при эт соб обладает низкой чувствител что затрудняет диагностику.Цель изобретения - повышение чувствительности и ускорение способа.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения ре" зистентностиэритроцитов путем их разрушения с последующим определением гемоглобина эритроциты разрушают; ультразвуком ссивностью от О ри частоте 880-890Способ осуще образом..В центрифужную приборку с каплей гепарина производят забор 0,5 мл крови из любой сосудистой зоны (из пальца или вены) . В предварительно подготовленные четыре центрифужные пробирки, содержащие 1,9 мп физиологического раствора хЛористого натрия, вносят 0,1 мл крови. Содержимое пробирок осторожно перемешивают. Пробы озвучивают; например, на ультразвуковом приборе "Ультразвук Т". Рабочая частота высокочастотных колебаний составляет 880+8;8 кГц.Озвучивание производят путем соприкосновения ультразвуковой головки поверхностью 1 см с поверхностью физиологического раствора, содержащего эритроциты. Режим озвучивания: 0,05 Вт/см (1-я пробирка); 0,2 Вт/см.(2-я пробирка); 0,4 Вт/см. (3-я пробирка); 0,6 Вт/см (4-я пробирка).Время озвучивания 3 мин. Все пробирки центрифугируют 10 мин при 2000 аб/минВ надосадочном растворе хлористогонатрия, содержащем разрушенные эрит 1"роциты, определяется уровень гемоглобина. Для этого из каждой пробиркиотбирают по 0,3 ил надосадочной жидкости и помещают в соответствующее 11количество пробирок, содержащих2,7 мл М 3 цОН (1 мм концентрированно"го ИНОН разводится до 250 мл водой),содержимое пробирок тщательно перемешивают и шотометрирчот или спектро Ффотометрируют в кювете (1 см) придлине волны 570 нм. Результаты выраоьжают в грамм 4.Концентрацию гемоглобина определяют по формуле: К = ОП,22, где К "концентрация гемоглобина в грамм ;ОП - оптическая плотность на регистрирующем приборе, В тех случаях, ког.да определение ведется в крови припатологических процессах, сопровождающихся изменением количества эритроцитов, например; при кровопотери,необходимо делать поправку на гема"токрит, И в расчетной формуле используется гематокритный показатель:ОП 22н,где Н - гематокритная величина, В.Полученные значения гемоглобинана каждом режиме суммируют и получаютвеличину гемоглобина, свидетельствую- ффщую о гемолизе эритроцитов при обработке их ультразвуком. Увеличениевыхода гемоглобина по сравнению с нормой указывает на снижение резистивности эритроцитов, уменьшение выходагемоглобина на повышение резистивности.П р и м е р. Больной Г., 45. лет.В течение двух последних лет страдает приступами стенокардии. При пос-туплении в стационар снята ЭКГ, проведено определение в крови комплексабиохимических показателей, подтверждающих наличие хронической ьвемическойболезни.У больного произведен заборкрови с каплей гепарина иэ вены, Для определения реэистентности эритроцитовотобрано 0, 5 мл. После озвучивания получены результаты, представленные втабл, 1. И 5 1Таким образом, у больного Г. выход гемоглобина составляет 5,76 г / при норме 15,60,67 г Ф, что свидетельствует о повышенной резистивности эритроцитов.С целью сравнения предлагаемого способа с известным у 5 кроликов моделировалась острая кровопотеря (650 объема крови) и определялась резис" тентность эритроцитов в исходном состоянии и через 2 ч после потери крови.Для выражения полученных результа" тов использовали известный способ .- показатель средней клеточной хрупкости,. т.е, резистентности, соответст" вующую тому процейту раствора хлорис-. того натрия, при котором гемоливует" ся 503 клеток.Изменение процента раствора, при котором гемолиэуется 504 клеток, отражает изменение резистентности эритроцита.Показатели резистентности эритроцитов 7 кроликов в исходном состоянии и через 2 ч после тяжелой (653) кровопотери известным и предлагаемым способами приведены в табл. 2.Как видно иэ табл. 2, исследование резистентности эритроцитов известным способом показало, что у интактных животных 503 клеток гемолизуется при 0,473 растворе ИаС 1. После острой кровопотери 504 клеток гемолизируется также при 0,473 растворе ИаС 1, что является свидетельством того, что резистентность эритроцитов через 2 ч после массивной потери крови не изменена,При использовании предлагаемого способа выход гемоглобина с учетом гематокритной величины увеличился на 2 И по сравнению с исходным фоном, что свидетельствует о снижении реэистентности эритроцита по сравнению с данными интактных кроликов.Таким образом, предлагаемый способ является более чувствительным и позволяет выявить функциональные изменения эритроцитов уже в первые часы развития патологического процесса, не выявляемого известным спосо бом.923525 Т а б л и ц а 1 Пробиркий Режим озвучи- Выход гемогло- Состояние резисванияВт/см бина, грамм Ф тентностий а ввеееаеве е еа в а ее в в вввевееееаееееееаеаевеевв 0,05 0,0 0,2 0,0 0,4 0 98 0,.6 4,8 Сумма 5,76 Выаена Твбяив 2 еевевееае Воздействие уяьтраэвувом различнойинтенсивности предявкаееа сюсобом ее восле кровсевтермИсходный фон 1 гемэтокрнт г ф гемолиза Й ЯаС 1 Ф гемолнэ ре 3 Вмн оэвучивания токрит а 3-гага. формула изобретения Составитель Л Соловьев Ревактор А. Мотыль Техрел И.Гергель Корректор А Ференц Заказ 2657/8 Тираж 717 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва ВРамшская наб. 8. 4 Д Фипиап ППП "Патейт", г, Ужгород, ул. Проектная, 4Воздействие путем изменения осмотяческой концентреции раствора эюристого натрия .по известному способу еаааееевеееавеевеевеаееаеееаеаевееаеаеее Исходный фбмЙООе кроэОЙотеРИ Способ определения резистентностиэритроцитов путем их разрувения с4 фпоследующим определением гемоглоби"на, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения чувствительностии ускорения способа, эритроциты раз" рущат ультразвуком с возрастающейинтенсивность от 0,05 до 0,6 Вт/смпри частоте 880-890 кГц.Источники информациипринятые во внимание при экспертизеРуководство по клиническимлабораторным исследованиям. Под ред.Смирновой и Кост, 1960, с. 99 а 100,