Способ получения липидов

40 Способ осуществляют следующимобразом. 50 Дрожжи культивируют при аэрации на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора, калия и маг ния в количествах, оптимальных для активного роста микроорганизма продуцента. В качестве источника углерода используют нефтяные дистилляты. При этом подачу воздуха регулируют в зависимости от концентрации в среде нефтяного дистиллята и содержания в нем н-алкановтаким образом чтобы соблюдалось соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода. Ферментацию ведут при 65 Изобретение относится к микро-,биологической промышленности, аименно к способу получения липидовпутем выращивания дрожжей на углеводородсодержащих средах.Известен способ получения липидов, предусматривающий культивирование дрожжей на питательной среде,содержащей источники азота, фосфора, минеральные соли н смесьуглеводородов, включающую н-алканы в . 10качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим выделением липидов заданногосостава Ц . Согласно известному 15способу, изменяя в питательной среде.соотношение С: И, С:Р О, концентрациюисточника углерода и скорость потока среды, получают липиды, в составе которых в зависимости от заданного соотношения источников питания преобладают либо триглицериды исвободные жирные кислоты, либо фосфолипиды.Недостатком способа являетсяневысокий выход биомассы и отдельных липидных фракций,Цель изобретения - увеличениевыхода биомассы и отдельных липидных фракций.Цель достигается тем, что при 30осуществлении способа получения липидов, предусматривающего культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей источники азота, Фосфора, минеральные соли и смесь углеводородов, включающую н-алканы в качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим выделением липидов заданногосостава, в процессе культивированияизменяют соотношение содержанияуглерода н-алканов и кислорода, приэтом для получения липидной фракции, обогащенной фосфолипидами ижирными кислотами или глицеридамии стеринами, соотношение составляет1:10 - 1;60 или 1:0,5 - 1:12,5 соответственно.температуре 30-39 фС, рН 3,8-5,0коэффициенте разбавления 0,35-0,07 ч,Но окончании культивированиябиомассу отделяют и экстрагируютлипиды органическими растворителями.П р и м е р 1. Дрожжи Сапй 1 йа9 ц 1 е гщопд культивировали в ферментере с рабочим заполнением Мкгна питательной среде следующегосостава, мг/л:70-ная фосфорнаякислота 930,0Хлорид калия 990,0Сульфат магния 330,0Хлорид железа 9,0СульФат цинка 31,0Сульфат марганца 25,5Сульфат меди 7,2Источником азота служил титрующий агент - 6-ный раствор гидроокиси аммония. В качестве источника углерода использовали нефтяной дистил"лят (фракции 240-360) в концентрации 10, содержащий 20 н-алканов.Концентрация н-алканов в среде2. Скорость разбавления 0,25 ч ,, Интенсивность аэрации среды воздухом 200 л/кг ч.Заданные параметры культивирования давали соотношение углерод н-алканов:кислород, равное 1:14Культивирование проводили прирН 4-4,5 и температуре 30-32 С.Дрожжевую суспенэию из ферментера сгущали декантацией и сепарированием. Биомассу сушили на распылительной сушилке и экстрагировалилипиды смесью бензин - зтанол - вода в соотношении 80:19;1, После отгонки экстрагента анализировалисостав липидов.Содержание липидов в биомасседо экстракции было 12,7.Состав липидов,:фосфолипиды 28,9Глицериды 36,0Свободные жирные кислотыСтериныСтериновыеэфиры воска 4,0П р и м е р 2. Способ осуществляли согласно примеру 1, но скоростьразбавления составляла 0,1 ч , аинтенсивность аэрации воздухом250 л/кг ч. При этом соотношениесодержания углерода н-алканов и кислорода составляет 1;44.После культивирования содержаниелипидов в биомассе до экстракциибыпо 15,2.Состав липидов,:фосфолипиды 32,6Глицериды 27,8Свободные жирные кислотыСтериныСтериновые эфиры воска 2,3839258 1567,6 9,9 5,7 1,8 Составитель Т. МелентьеваРедактор 3. Бородкина Техред М.Тепер Корректор А.Тяско Заказ 8128/4 Тираж 523 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Подписное филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 П р и м е р 3. Дрожжи (:аадда аа 1 вопао 1 а культивировали согласно примеру 1, ко концентрация нефтяного дистнллята в среде была 20, содержание н-алканов в дистилляте 35, что составляло концентрацию н-алканов 7. Скорость разбавления среды 0,3 ч , интенсивность аэрации 360 л/кг ч. При этом соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода составляет 1:6.Содержание липидов в биомассе/до экстракции было 11,3. Состав липидов, :фо сфол ип идыГлицеридыСвободныежирные кислотыСтериныСтериновыеэфиры воска Таким образом, предлагаевнй спо"О соб позволяет увеличить выход биОмассы с высоким содержанием липидовопределенной фракции.