Способ подбора родительских пар в племенном животноводстве

Саез Сееетскик Сециалиствческик Республикс присоединением зая Государственник комитет 3) Приорит СССР пе дедам изобретений и открытий(72) Авторы изобретено Романов,1Е.Ьюа,докриногит 1,"аинскойедРУкраинс ВВфР:. 1"ахнин Л МО. Н, Зряковий институт элогии АН Укрскотоводстваной академии А. Бал енко и ыжев, И , Г. Тим 71) Заявител иевский научно-исследовательс и обмена веществ, Институт зои Опытная станция мясногосельскохозяйствен ОСОБ ПОДБОРА РОДИТЕЛЬСКИХ ППЛЕМЕННОМ ЖИВОТНОВОДСТВЕ(54 Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано в племенном животноводстве при разведении и селекции различных видов животных. 5В современном животноводстве улучшение качества потомства достигается путем гетерозисных сочетаний. Однако, способы подбора животных для скрещивания из-за отсутствия четких критериев сочетаемости 10 пар в той или иной степени эмпирические 11.Известны способы гомогенного спаривания производителей и маток по сывороточной активности ферментов аминотрансфе разы и фосфатазы 11 или церулоплазмина Известен способ определения положительной сочетаемости пар при индивидуальном подборе, который базируется на крите риях сходства (различия) животных по одной или нескольким генетическим системам крови 31.Однако существующий способ не является универсальным, так как в связи с отсут ствием специфических антисывороток не может быть использован для всех видов животных, Кроме того, в каждом конкретном случае необходимы предварительные трудоемкие исследования систем крови, взятых в ЗО качестве критерия, и проверка их на сочетаемость. При анализе нескольких систем крови проверка всех скрещиваний становится практически невозможной. Использование иммуногенетического тестирования животных по группам крови ограничивается и трудностями, возникающими при получении большого набора моноспецифических сывороток.Целью изобретения является повышение эффективности и упрощение процесса подбора родительских пар в племенном животноводстве.Поставленная цель достигается тем, что сопоставляются антигены гистосовместимости в двунаправленной реакции смешанных лимфоцитов,По предлагаемому способу совместнс культивируют лейкоциты периферической крови самца и самки. При этом в культуре происходит трансформация малых лимфоцитов в бластные клетки, что представляет собой реакцию лимфоцитов на генетически детерминированные чужеродные антигены гистосовместимости. Реакция учитывается микроскопически, путем подсчета бластных клеток или радиометрически по включению меченого предшественника в нуклеиновую кислоту, например, Нз - тимидина, Наи. лучшая сочетаемость пар животных имеет45 55 65 место при более высоких показателях реакции смешанных лимфоцитов, то есть при наиболее выраисенных различиях антигенов гистосовместимости.Пример конкретного выполнения способа. Берут кровь у сельскохозяйственных животных из яремной вены в стерильные отдельные пробирки в объеме 4 - 6 мл от самца и самок, предназначенных для скрещивания. Для предупреждения свертывания крови в пробирки предварительно вносят стерильный раствор гепарина из расчета 40 ед. на 1 мл крови. Кровь доставлют в лабораторию и помещают в термостат на ЗT С, Через 1,5 - 2 ч отбирают плазму, содержащую лейкоциты, и разводят ее подходящей средой, например, оредой 199 с антибвоткками (100 ед. пенициллина и 100 ед. стрептомицина на 1 мл) так, чтобы в 1 мл содержалось 1 млн. лейкоцитов. Культивирование клеток производят в силиконизированных стеклянных пробирках размером 16 Х 125 мм. В каждую пробирку вносят 1 млн клеток самца и 1 млн клеток самки. Для каждого варианта ставят по 3 параллельных пробы, Смешанные культуры инкубируют во влажной камере в термостате при ЗT С в плотно закрытых пробирках. Через 5 суток в культуры стерильно добавляют Нз - тимидин в дозе 0,5 мккюри/мл в 0,1 мл среды 199 и культивирование продолжают еще 84 часа. После этого культуры охлаждают на ледяной бане и уровень включения изотопа определяют с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика любым подходящим методом, например, определением радиоактивности кислотонерастворимого осадка, перенесенного на миллипоровые фильтры, Результат выражают в количестве импульсов радиоактивного распада в минуту на пробу, Для каждой тестируемой пары определяют среднее значение реакции трех параллельных проб, Положительная сочетаемость достигается между самцом и теми самками, где наблюдается наибольшая выраженность реакции смешанных лимфоцитов. Эти пары и отбираются для скрещивания. Для крупного рогатого скота положительная сочетаемость, определяемая этим способом, характеризуется рождением более крупного потомства, отличающегося высокой энергией роста. Так, через 15 месяцев после рождения вес бычков в среднем на 12%, а телок - на 20% выше, чем у сверстников от родителей с низкими показателями реакции смешанных лимфоцитов. 5 1 О 15 20 25 зо 35 40 Для животных, отличающихся многоплодностью, положительная сочетаемость, определяемая предлагаемым способом, характеризуется увеличением числа потомков. Это было установлено при испытании опооаба на мышах. Результаты аиалкза пометов после 40 скрещиваний мышей показали, что с увеличением различий между самцами и самками по антигенам гистосовместимости наблюдается возрастание среднего числа потомков, приходящихся на одну самку, почти на две головы. Связь степени генетических различий, выявляемых реакцией смешанных лимфоцитов мышей, достоверная, положительная. Доля влияния исследованного показателя на число рожденных живых мышей составляет 52%. Следует учесть, ято моноапецифичвских сывороток против антигенов групп крови мыБтей не существует, ы аадбар дар в этом случае, а в равной степени и в отношении других видов животных, возможен лишь при использовании предлагаемого способа.Использование предлагаемого способа подбора родительских пар для скрещивания животных обеспечивает по сравнению с известными способами следующие преимущества: возможность сраанения любых нар разных видов животных по комплексу анти- генов гистосовместимости без специального исследования групп и систем крови; достаточно высокая, надежность, которая обеспечивается высокой специфичностью реакций клеточного иммунитета, тюложевных в основу способа; не требуется приготовления дорогостоящих моноспецифических сывороток; повышение эффективности подбора (например, при положительной сочетаемости увеличиваепся число рождаемыхпотомков у многоплодных животных и увеличиваются темпы прироста веса у потомков одноплодных животных) . Формула изобретения Способ подбора родительских пар в племенном животноводстве, включающий иммуногенетический анализ антигенов тестируемых пар, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности и упрощания процесса подбора, иммунагенетический анализ проводят с антигенами гистосовместимости в двунаправленной реакции смешанных лимфоцитов. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1, Смирнов О, К, Раннее определение продуктивности животных, М., Колос, 1974,2. Эйдригевич Е. В., Лапкин М. М., Петренко В. Д. Подбор пар в скотоводстве с использованием иммуногенетических тестов,:Заказ 24/39 Изд,102 Тираж 882 ПодписноеНПО Поиск Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Мосина, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Тип. Харьн. фил. пред, Патекг В кн. Пути повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и птиц. Одесса, 1978,63. Тихонов В. Н. Использование грущ крови при селекции животных, М., Ко. лос, 1967 (прототип).