Способ определения степени разрушения клеток микроорганизмов при дезинтеграции их в суспензии

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИДЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН А С 12 И 1/ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН А. Смыслов исследовантеза белкохническииобиология" НИЯ СТЕПЕНИРГАНИЗМОВУСПЕНЗИИ,ение Аизико- иэменяющегоГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР по делдм изов етений и ОткРыти(71) Всесоюзный научнотельский институт биссивых веществ и Научно-тецентр "Техническая микр(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛРАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОК МИКРОПРИ ДЕЗИНТЕГРА 11 ИИ ИХ Впредусматривающий измерхимического показателяЯО 90784 ся в процессе дезинтеграции, и последующее определение степени разрушения клеток микроорганизмов позаранее построенным калибровочнымкривым испытуемой суспензии, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения точности определения,в качестве физико-химического показателя используют диэлектрическую.проницаемость суспензии микроорганизмов и определяют разность значений диэлектрической проницаемостисуспензии микроорганизмов до и после дезинтеграции в электрическомполе с частотой в интервале 0,05200 кГц.7907 Изобретение относится к микробно" логической, пищевой отраслям промьппленности, а более конкретно к способэм определения степени разрушения клеток микроорганизмов, 5Известен способ определения степени разрушения клеток микроорганиз" мов при дезинтеграции их в суспензии, предусматривающий измерения Ьи зико-химического показателя, напри" 1 О мер рН среды, изменяющейся в процессе дезинтеграции, и определение степени разрушения клеток микроорганизмов по заранее построенным калибровочным кривым испытуемой сус пензии.Недостатком данного способа является проведение дополнительных операций для увеличения измерения рН суспензии, определяемого до и пос ле дезинтеграции, в частности, искусственного подщелачивания исходной суспензии, Искусственное подщелачивание приводит к экстракции внутриклеточных веществ, что пони- , 25 жает точность определения рН, а сле" довательно, и степень разрушения клетокПелью изобретения является повышение точности определения. ЭОУказанная цель достигается тем, ,.что в качестве физико-химического показателя используют диэлектричес кую проницаемость суспензии микро-организмов и определяют разность значений диэлектрической проницаемости суспензии микроорганизмов до и после дезинтеграции в электрическом поле с частотой в интервале 0,05-200 кГц.Для каждого вида микроорганизмов сущестьует своя зависимость между степенью разрушения и разностью диэлектрической проницаемости, Для построения калибровочных кривых вы" являют зависимость диэлектрической проницаемости от степени дезинтеграции, используя известный метод Лоури. Метод Лоури псзволяет определять концентрацию растворенного белка, который находится в прямой зависимости от степени дезинтеграции, а из последней зависимости получаем калибровочную кривую испытуемой суспензии, необходимую для осу," ществления заявленного способа. П р и и е р 1. Для определения степени разрушения клеток микроор-,Ф84 2тганизмов измеряют диэлектрическуюпроницаемость суспензии дрожжей роди СапйЫа рп 1111 егшоМН с концентрацией биомассы 6% до и после дезинтеграции. Измерения проводят в частоте 0,05 кГц. Степень дезинтеграции 65%,Диэлектрическая проницаемость суслензии до дезинтеграции (1,4 +0,5)Ф10". Диэлектрическая проницаемостьсуспензии после дезинтеграции (3,7 +ещФ+ 0,5)ф 10 . Измерение на низних частотах сопровождается большими .ошибками при определении диэлектрической проницаемости, что показано впримерах 2 и 3.П р и м е р 2, Для определениястепени разрушения клеток микроорганизмов измеряют диэлектрическую проницаемость суспензии дрожжей родаСапйЫа рп 1 П 1 епчопй 11 с концентрацией биомассы 6% до и после дезинтеграции. Измерения проводят на частоте 100 кГц. Степень дезинтеграции65%.Диэлектрическая проницаемость суспензии до.дезинтеграции (5,44 +0,01); 10 . Диэлектрическая проницаемостьсуспензии после дезинтеграции (6,34++ 0,01) 10,Погрешность измерения диэлектрической проницаемости в частотах100 кГц и выше значительно меньше,1 чем на частотах 1 кГц и ниже.П р и м е р 3. Для определениястепени разрушения клеток микроорганизмов измеряют диэлектрическуюпроницаемость суспензии дрожжей родаСапдЫа цц 1111 егшопйЫ с концентрацией биомассы 6% до и после дезинтеграции. Измерения проводят начастоте 200 кГц. Степень дезинтеграции 65%.Диэлектрическая проницаемость сус:пензии до дезинтеграции (4,55 +0,01)10, Диэлектрическая проницаемостьЯ(4,5 +О, 01) г 10 .Измерения диэлектрической прониГцаемости на частоте 200 кГц и выше.показали, что этот показатель не изменяется после дезинтеграции.П р и м е р 4. Для определениястепени разрушения клеток микроорганизмов измеряют диэлектрическуюпроницаемость суспензии дрожжей рода СапйЫа дпх 111 егшопдН с концентрацией биомассы 6% с различной сте790784 Степень дезинтеграции 0 0,54 0,73 60 100 Редактр П.Горькова Техред Т.Маточка Корректор А.Ильинс Заказ 54 б/3 Тираж 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3пенью дезинтеграции. Измерения проводят на частоте 110 кГц. Экспериментальные результаты представлены в таблице. Диэлектрическая проницаемость Ж) исходной суспензии 4 48 ф 10 з 4Степень дезинтеграции клеток мик"роорганизмов заранее определяласьмикроскопическим методом, а затемполученные резуЛьтаты сопоставлялисьс разностью значений диэлектричес"кой проницаемости суспензии дрожжейдо и после дезинтеграции.Приведенные примеры показывают,что показателем степени разрушения 10 клеток микроорганизмов может служитразность диэлектрической проницаемости до и после дезинтеграции приизмерении диэлектрической проницаемости в частотном интервале 0,05 - 13 200 кГц. Технико-экономический эффектпредлагаемого способа заключаетсяв повышении точности измерений безприменения дополнительных операций,как например подщелачивание прирН-метрии в известном способе.