Способ профилактики гриппа

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз СоветскикСоциалистическихРеспублик пц 731921(51) М. Кл. Аб К 39/2 Государственный комитет Опубликовано 05.05.80. Бюллетень17Дата опубликования описания 15.05,80(53) УДК 576 8 . 097. 3 (088,8) оо делам изобретений и открытий(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА Изобретение относится к области медицины, а именно к вирусологии и может быть применено для профилактики гриппа в пред- эпидемический период.Известен способ профилактики гриппа с помощью вакцины 11,Однако известный способ не обеспечивает высокого противогриппозного иммунитета.Цель изобретения - повышение противо- гриппозного иммунитета.Цель достигается тем, что вводят подкожно инактивированную вакцину, а затем интраназально живую вакцину,Были проведены клини ко-иммунологические наблюдения на 55 волонтерах в клинике экспериментальной патологии и терапии острых респираторных инфекций, Экспериментальная часть работы выполнена на 250 белых мышах и 50 морских свинках.Для первой прививки используют адсорбированную гриппозную химическую (АГХ) вакцину, приготовленную из штамма вируса гриппа А (Виктория /3/75 (НЗМ 2). Прививку делают подкожно, вводя волонтерам по 0,5 мл вакцины и животным по 0,25 мл. 2Получаемая волонтерами доза вакцины содержит 2500 ГЕ.С целью выбора оптимального методаревакцинации введение живой вакцины осуществляют двумя путями: интраназально и перорально. Для интраназального введения используют вирус гриппа А (Ленинград /323/76/20 (Н 31 Ч 2) с инфекционной активностью 7,2 ед. ЭИД 50/0,2 мл, для перорального - вирус гриппа А (Ленинград /323/76/10 (НЗ 1 Ч 2) с инфекционной ак тивностью 7,5 ед. ЭИД 50/0,2 мл.Для ревакцинации морских свинок используют штамм А (Хабаровск /76/5 (НЗХ 2) (инфекционная активность - 7,2 ед. ЭИД 50/0,2 мл). Аттенуация вирусов для живой гриппозной вакцины проводилась в процессе их последовательного пассирования в развивающихся куриных эмбрионах, инкубированных при 33 С,Антигенную активность вакцин оценивают в РТГА по общепринятой методике с 2 О ингибиторорезистентным вирусом гриппа А(Виктория /3/75 (НЗХ 2). Определение нейраминидазных антител проводят с помощью реакции ингибиции нейраминидазной активности.73197 О приживаемости вируса гриппа в верхних дыхательных путях у волонтеров судили по выделению его из смывов, взятых из носовой полости, через 72 ч после введения вируса. Для определения уровня секреторных антител используют реакцию нейтрализации на хориоаллантеисной оболочке ХАО.Напряженность поствакцинального иммунитета у экспериментальных животных и волонтеров оценивали по разному. Белым мышам на 21 день после ревакцинации вводили интраназально по 0,1 мл вируса гриппа А (Виктория /35/72/15), прошедшего предварительно 15 пассажей через организм мышей (инфекционная активность 8,2 ед, ЭИД 50/0,2 мл). На 3 сут. после инфицирования у животных определяли концентрацию вируса в легких путем титрования суспензии легочной ткани на 10-дневных куриных эмбрионах. Часть животных наблюдали на выживаемость в течение 12 дней после инфицированияя.Проверку защищенности вакцинированных добровольцев проводили через 5 мес. после иммунизации. Волонтерам вводили интраназально по 0,5 мл малоаттенуированного вируса гриппа А (Ленинград /323/76/10, инфекционная активность 7,5 ед. ЭИД 50/0,2 мл). Резистентность у волонтеров к экспериментальной гриппозной инфекции оценивали по развитию общих клинических реакций.Все лица, участвовавшие в наблюдении, проходили клинико-лабораторное обследование.Наблюдения на мышах. Результаты оценки иммуногенности вакцин в различных схемах их применения показали 4 - 8 кратный прирост гемагглютинирующих антител в сыворотках животных всех четырех (1 - 4) опытных группах наблюдений. При этом введении живой вакцины не изменило уровня антител у мышей ранее привитых АГХ-вакциной, Наиболее выраженная зашита наблюдалась у животных 1,2 и 3 групп. Об этом свидетельствует снижение репродукции вируса гриппа в легких на 1,5 - 3,0 ед.(по сравнению с контролем) и полное отсутствие гибели животных при их инфицировании. Различия по всем указанным показателям с контрольной группой статистическидостоверны (Р = 0,05).Наблюдения на морских свинках, 11 риоднократной иммунизации морских свинок АГХ-вакциной отмечен 76,0% сероконверсий при среднем геометрическом титре антител 1:39,0. Ревакцинация живым вирусом А (Хабаровск /76/5 увеличивала частоту сероконверсий на 20,0% и стимулировала дополнительный 6-.кратный прирост уровнягемагглютинирующих антител. Иммунизация морских свинок живым вирусом вызывала накопление секреторных антител у 40% привитых животных при повышении титра анти4тел в носовых секретах с 1,0 до 4,3 (средние показатели) .Наблюдения на волонтерах. Проведенное клинико-инструментальное исследование волонтеров биохимическое, гематологическое, ЭКГ рентгенологическое показало безвредность испытуемых вакцин. Прививка 1,2 и 3 групп волонтеров АГХ-вакциной сопровождаласть практически полной ареактогенностью данного препарата.Общие и местные реакции 11 - 111 степени отсутствовали. У 5 волонтеров через 12 - 24 ч после прививки на месте инъекции вакцины появилась гиперемия кожи размером 1 Х 1 см. Признаки воспаления проходили через 24 - 48 часов. У 6 волонтеров в первые 3 дня после вакцинации имело место кратковременное повышение температуры тела до37,1 - 37,3 и у 2 - катаральные явленияв виде легкого ринита. Введение АГХ-вакцины не сопровождалось формированием повышенной чувствительности привитых к гистамину.Интраназальная ревакцинация первой группы волонтеров живым вирусом гриппа А (Ленинград /32/76/20) вызвала легкие клинические реакции у 4 привитых. У волонтеров, вакцинированных перорально вирусом гриппа А (Ленинград /32476/10), равно как и у получивших плацебо, клинических реакций не было. Интраназальное введение тогоже вируса гриппа А (Ленинград /323/76/20) лицам контрольной группы вызвало клинические реакции у 46,6% волонтеров, т. е. у 7 из 15 человек, среди которых выраженнье клинические реакции 11 степени тяжести наблюдались у 4 привитых (26,6%).Для характеристики иммуногенности вакцин были оценены показатели накопления антител в сыворотке крови (частота серо- конверсий и кратность прироста антител после введения каждой вакцины). Для характеристики иммуногенности вакцин были оценены показатели накопления антител в сыворотке крови (частота сероконверсий и кратность прироста антител после введения каждой вакцины).При однократной прививке волонтерам АГХ-вакцины отмечено 55,0 - 64,0% серо- конверсий при кратности прироста антител 4,0 - 6,5.Интраназальное введение живого вируса увеличивало частоту сероконверсий до 70,0% и стимулировало дополнительный подъем уровня антител, Так, у волонтеров первой группы кратность прироста антител увеличивалась с 4,8 до 7,5. Пероральная ревакцинация живым вирусом не изменяла иммунологических показателей, полученных после введения АГХ-вакцины. У волонтеров 4 группы после 2-кратной интраназальной прививки умеренно реактогенным вирусом группа А (Лениград /323/76/20) уровень гуморальных антител был идентичным показа 735телем, полученным в группах 1 и 2. Приживаемость вирусов гриппа А (Ленинград /323/76/20) и (Ленинград /323/76/10) была одинаковой у лиц опытных и контрольной групп 63,1 и 66,6% соответственно).Введение живого вируса стимулировало образование секреторных антител в 6 из 14 волонтеров, привитых интраназально, и у 2 из 7 - привитых перорально,Исследование сывороток 10 волонтеров на нейраминидазные антитела выявило нарастание последних у 2 из 5 волонтеров 1 группы и у 4 из 5 привитых 11 группы.Интраназальное введение штамма вируса гриппа А (Ленинград /323/76/10) через 5 мес. после вакцинации вызвало у волонтеров контрольной группы клинические реакции в 57,1/, (т. е, у 8 из 14 человек среди которых 21,4% составили выраженные клинические реакции 11 - 111 степени тяжести). Ни у одного из 10 волонтеров ранее привитых по разработанной схеме не отмечалось даже слабых клинических реакций (Р -0,05).Предложенный способ сочетающий применение инактивированной и живой вакцин 9716обеспечивает мобилизацию различных механизмов иммунной защиты и повышение проти вогриппозного иммунитета.Способ может быть использован для профилактики гриппа у лиц повышенного риска заражения (медицинские работники, педагоги, работники общественного транспорта, торговли, сотрудники милиции и т. д.), которым приходится работать во время эпидемии в условиях продолжительного, многократного и интенсивного инфицирования вирулентным вирусом гриппа.формула изобретенияСпособ профилактики гриппа с помощью 15 вакцины, отличающийся тем, что, с цельюповышения противогриппозного иммунитета, вводят подкожно инактивированную вакцчну, а затем интраназально живую вакцину.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССРЛд 546132, кл. А 61 К 39/8, 1975.Составитель С. Малютина Редактор М. Недолуженко Техред К. Шуфрич Корректор Н. Степ Заказ 1522/1 Тираж 673 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент г. Ужгород, ул. Проектная, 4