Штамм гриба asperg3llus oryzae 8п

2 ОЗЬО 1 Союз Советских Социалистических Республикльства М 091722/28-13) Зависимое от авт.Заявлено 19 Л 1.19с присоединениемПриоритетОпубликовано 28. иде 14 явки Ьс МПК С 12 К Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров663.11:576,8.093.1088,8) Бюллетень М 2 ания 25,Х 11.196 967. та опубликования оп Авторыизобретения Д. Я, Типограф, (Демо кратическ ипизубова, Д, Е. Мих вский технологически Ньенгнам),в и И. М, Грачевапромышленности иностранец Леван я Республика Вь йлова, А. Н, Весе институт пищево Р 1. И Мос Заявитель УАЕ 81 2 с 7 Баллинг лоции дост оны 4,0 с.ц. выпуклые с а) ца третьи сгает 4,5 слс ц В центре расболее высоким усло-агаредиаметр коразующей зсы колонии суткиспорооположе Известны штаммы грибов Азрего 111 цз огукае, например Лзрегр 11 цз огугае КС, используемый в спиртовом производстве для осахаривания вместо солода. Этот штамм обладает активной сс-амилазой, но содержит недостаточное количество протеолитцческих ферментов, поэтому его применяют в смеси со штаммом гриба Азрегр 11 цз а.ь агпог 1 22, который имеет высокую декстринолитическую и мальтазную активность.Предлагаемый штамм Лзрегр 11 цв огукае 811 отличается быстрым ростом и способностью образовывать активные амилолитическце и протеолитические ферменты, сочетание которых необходимо для полного осахаривания крахмала и гцдролиза белковых веществ сырья. Это позволит применить в спиртовом производстве одну культуру гриба Азрегр 11 цз огукае 811, вместо применяющейся в настоящее время смеси вышеописанных культур, одна из которых образует нужный комплекс амилолитических ферментов, а вторая служит источником протеазы.Штамм Азрегр 11 цз огугае 811 имеет следующую характеристику.М о р ф о л о г и я. Конидиеносцы без перегородок, бесцветные, с возрастом приобретают легкий коричневатый оттенок. Большей частью гладкие, ца цекоторьсх имеются редко расположенные небольшие вмятины цли очень маленькце пологие бугорки. Концдиецосцы в длину достигают 194 - 350 лск и в поперечнике 8,3 - 10,1 лск.Пузыревидные вздутця имеют шаровцднуо цли слегка удлиненную форму 15,4 - 27,02( Р,13,2 - 27,02 лск, Стеригмы однослойные, удлиненные, цилиндрические, на некоторых пузыревидцых вздутиях они слегка расширенные цли даже клцновидные 11,64,6 5,8 лск. Чаще стеригмы располохкены на верхней части пузыря. Коцидии шаровидные с гладкой оболочкой, их диаметр варьирует от 3,8 до 11,58,цк,Коццдиальцые головки шаровидные или слегка удлиненные 22 - 48(22 - 44 лск.Гифы бесцветные, в поперечнике они имеют от 3,96 до 7,92 лск, иногда они колбовидно утолщены 8,8 лск.На синтетической среде Чапека ца третьи сутки после посева диаметр колонии в среднем достигает 3,9 с,ц и спорообразующей зоны 3,4 сл, Колонии бархатистые, в центре слегка клочковатые, ближе к периферии оцц становятся желтоватыми. Преобладают зелецыс тона. Обратная сторона колонии беловатая.203601 ПС (по Вильштетеру) Ед,/г або. сухой культуры дс мс на рисовых отрубях на пшеничных отрубях Штамм гриба АС на пшеничных отрубях АС на рисовых отрубях на пшеничных отрубях рН 738 рН 4,48 рн 449 рН 7,38 Аврегяйцв огуяае811,Аврегд 1 Пцв огухаеКС.Аврегр 111 цвада)цог 1 22 76,4 34,84 1100 550 26,17 29,2 23,2 28,3 727 477,2 28,4 8,85 14,5 858,3 126,2 Из данных таблицы видно, что штамм Лзрегр 11 цв огугае 8 П обладает большими активностями как амилазными, так и протеазными, чем Аврегр 11 цв огукае КС и Азрегр 1- 1 цз аюагпоп 22.При получении посевной культуры Лэрегр 11 цз огухае 8 П в лабораторных условиях трехсуточную культуру гриба, выращенную на косом сусловом агаре, пересевают на стерильные пшеничные отруби с влаукностью 45 -40 45 мицелием, чем по краю, Они окрашены в желтовато-зеленоватый цвет с преобладанием желтоватых тонов. Обратная сторона колонии бесцветная.На агаризованном 4% -ном отваре солодовых ростков на третьи сутки диаметр колонии достигает 30 сд и спорообразующей зокчй 2,7 сл, Колонии пушистые, выпуклые, покрытые довольно высоким мицелием. В центре они желтоватые, остальная часть колонии беловатая, Обратная сторона их бесцветная.На пшеничных отрубях (без принудительной аэрации), слой которых равен 1,5 - 2,0 сл, в колбах к 30 час культивирования превращаются в плотный корж, полностью прорастающий мицелием. Спорообразование начинается к 36 час, к 48 час становится обильным.На рисовых отрубях (65%) и рисовой шелухе (35%) к 35 час образуется плотный корж, спорообразование начинается к 35 час роста, обильным оно становится к 42 час.Отношение к сахарам, Интенсивно окисляет глюкозу, мальтозу, сахарову, ксилозу, сорбит, слабее - галактозу, рафинозу, декстрин и манпит и очень слабо - галактозу н рабинозу. Газообразование наблюдается только на среде с сахаровой.Штамм Лврегр 11 цз огукае 8 Н сильно гидролизует крахмал, разжижает желатипу и пеитонизирует молоко, Оптимальная температура роста штамма 30 С, его оптимальная влажность 55% и оптимальное значение р 11 6,0 6,5.Ферментативная активность культуры Лврегр 11 цв огууае 8 П (при лабораторных условиях культивирования) в сравнении с ферментативной активностью культур Лзрегр 1 цэ огуеае КС и Лврегр 1 цв аюагпог 1 дана в таблице. 5 10 15 20 25 30 35 50% . Через сутки культивирования при 30 оС отруби покрываются обильным мицелием, а через двое - вся толща отрубей пронизывается светло-зелеными спорами. Через сутки роста гриба среда становится очень рыхлой и подвижной, превращаясь в пыль.2 - 3-суточную культуру из колб пересевают в посевные кюветы на отруби, влажность которых составляет 40 - 45%, толщина слоя 1 - 1,5 сл, температура культивирования 30 С, Интенсивное спорообразование начинается после 24 час роста. Через 48 час роста вся толща среды пронизывается спорами, среда подсыхает, начинает крошиться. Такой споровый материал имеет на 1 г 700 - 750 млн. спор. При более длительном культивировании (65 - 72 час) происходит полное видоизменение спорового материала. Последний при легком встряхивании превращается в сильно пылящий порошок, содержащий до 1 - 1,5 млрд. спор на 1 г,Полученный посевной материал обладает большей сыпучестью и рыхлостьп, чем посевной материал Лврегр 11 цз огухае КС и Азрегр 1 цз астап)оп 22, и служит для получения производственной культуры.Выращивание последней осуществляют иа пшеничных простерилизованных отрубях, увлажненных стерильной водой до влажности 60 - 61%. Количество посевного материала берут из расчета 0,03 - 0,04% к весу отрубей.Выращивают гриб Лзрегр 11 цз огукае 8 П в производственных растнльных камерах, емкость которых равна 250 - 300 кг по сухим отрубям, В первые 8 - 10 час в каждой камере поддерживают температуру 32 С и относительную влажность воздуха 85 - 90%. В этот период споры набухают. К концу периода появляется первый мицелий. Во второй период (последующие 8 - 10 час) происходит обильный рост,мицелия и интенсивное выделение тепла. Температуру в камере в этот период поддерживают в пределах 25 - 27 С и относительную влажность воздуха 100%Через 20 час роста вся толща среды прорастает мицелием. Интенсивно растет ферментативная активность, температура воздуха в камере 28 - 29 С и относительная влажность воз203601 Составитель Г. ф. ЛошкареваТехред Л, Я. Бриккер Корректор О, Б. Тюрина Редактор В. Чулкова оаказ 3865 у 19 Тираж 535 ПодписноеЦ 11 ИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 духа 90 - 95%, 24-часовая культура Лврегр 1- 1 цз огулае 811 легко дробится, не имеет спор. Выход культуры по отношению к исходной среде составляет 68 - 70/о.В процессе культивирования гриба определяют накопление ферментов во времени. Установлено, что, например, амилолитическая активность штамма Лзрегр 1 цз огукае 811 через 24 час его роста составляет 35 ед/г абсолютно сухой культуры, а штамма Лзрегр 11 цз огугае КС через 24 час роста только 19,6 ед/г абсолютно сухой культуры.Штамм Азрегр 11 цз огукае 8 П за 24 час роста накапливает всех ферментативных активностей больше, чем обе используемые в настоящее время культуры плесневых грибов Лзрегр 11 цз огукае КС и Азрегр 11 цз ажагпог 1 22,Полученная сухая поверхностная культура Азрегр 11 цз огукае 811 была испытана в лабораторных и производственных условиях для осахаривания спиртовых заторов с последующим их сбраживанием. Использование этой культуры обеспечивало интенсивность процесса осахаривания и сбраживания и получение высоких выходов спирта с низким содержанием остаточного сахара. Предмет изобретенияШтамм гриба Азрегр 11 цз огукае. 8 П. Синт е т и ч е с к а я с р е д а. На синтетической среде Чапека колонии бархатистые, в центре слегка клочковатые, ближе к периферии они становятся желтоватыми. Преобладают зеленые тона. Обратная сторона колонии беловатая. На третьи сутки после посева диаметр колонии в среднем достигает 3,9 сл и споро- образующей зоны 3,4 см.М о р ф о л о г и я. Конидиеносцы без перегородок, бесцветные, с возрастом приобретают легкий коричневатый оттенок, Конидиеносцы большей частью гладкие, на некоторых имеются редко расположенные небольшие вмятины или очень маленькие пологие бугорки. Конидиеносцы в длину достигают 194 - 350 лк ив поперечнике 8,3 - 10,1 цк,Пузыревидныс вздутия имеют шаровидную5 или слегка удлиненную форму 15,4 - 27,02;";к,13,2 - 27,02 лк. Стеригмы однослойные, у,.,- лпненные, цилиндрические, на некоторых пузыревидных вздутиях они слегка расширенныеили даже клиновидные 11,6(4,6 - 5,8 лк. Ча 10 ще стеригмы расположены на верхней частипузыря.Коидии шаровидные с гладкой оболочкой,их диаметр от 3,8 до 11,58 вк. Конидиальнысголовки шаровидные или слегка удлиненнь 1 е15 размером 22 - 48(22 - 44 л 1 к, Гифы бесцветные, в поперечнике они имеют от 3,96 до7,92 лис, иногда они колбовидно утолщены8,8 лк.Органические среды. На сусло-агаре20 на третьи сутки, диаметр колонии достигает4,5 с,я и спорообразующей зоны 4,0 слю. В центре колонии выпуклые с более высоким мицелием, чем по краю, Они окрашены в желтовато-зеленоватый цвет с преобладанием желто 25 ватых тонов. Обратная сторона колонии бесцветная.На пшеничных отрубях к 30 час культивирования образуется плотный корж, которыйполностью прорастает мицелием. Спорообра 30 зованпе начинается к 36 час, к 48 час становится обильным.На рисовых отрубях и рисовой шелухе и35 час образуется плотный корж, спорообразование начинается к 35 час роста, обильным35 оно становится к 42 час.От н о ш е н и е к с а х а р а м. Интенсивноокисляет глюкозу, мальтозу, сахарозу, ксилозу, сорбит, слабее - галактозу, рафинозу, декстрин и маннпт.40 Ж е л а т и н а, Желатину разжижает,М о л о к о. Пептонизирует.К р а х м а л. Крахмал гидролизует сильно.