Способ определения мышьяка в биологическом материале

(и) 21 ИЗ 1 ОО ИЕ ИЗОБРЕТЕ П льзова 4 Р Комитет Российской федерации о патентам н товарным знакам Щ 4870273/04(73) Акатьев Владимир Андреевич(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЫШЬЯКА ВБИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ(57) Способ определения мышьяка Испо ние: в аналитической химии Сущность изобрете - ния: водный раствор пробы обрабатывают пикриновой кислотой, полученный пикрат экстрагируют хпозроформным раствором а-метил -Ь - циклогексанкарбоновой кислоты, органическую фазу отделяют, разбавляют этиловым спиртом с последующим атомно-абсорбционным анализом спиртового рас - твора 2 табл, 2003970Изобретение относится к токсикологии, в частности к способу определения мышьяка в биологическом материале, и может быть использовано для извлечения данного элемента из биоматериалов,Известен способ определения мышьяка в биологическом материале, включающий минерализацию пробы и обработку химическим реагентом, при этом в качестве органического реагента используют тетрабром пиокатехин, а катионного красителя - родамин б Ж.Недостатком известного способа .является недостаточная чувствительность и селективность, Определению мышьяка :.;ашают серебро, золото, медь, свинец, висмут, кадмий, железо, хром, олово, марганец, магний, которые образуют комплексы с родамином б Ж. Поэтому необходимо предварительное отделение мышьяка от мешающих элементов. Кроме того, точность определения мышьяка уменьшается вследствие сильного наложения окраски красителей на окраску комплекса,Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности при определении мышьяка в биологическом материале.Поставленная цель достигается тем, что пробу после минерализации обрабатывают пикриновой кислотой, экстрагируют хлорозформным раствором а-метил -Л -циклогексанкарбоновой кислоты, экстракт обрабатывают этиловым спиртом с последующим атомно-абсорбционным анализом спиртового раствора.Сущность способа заключается в том, что к водному раствору определяемого элемента добавляют пикриновую кислоту, которая образует пикрат, и количественно экстрагируется хлороформным растворомза -метил- Л -циклогексанкарбоновой кислоты,Заявленный способ осуществляется следующим образом.Подготовка пробы, В колбу емкостью 330 мл помещают 30 г измельченного анализируемого биологического материала, например белка. заливают 35-40 мл концентрированной азотной кислоты и 45 мл 42 - 57 оь-ного раствора хлорной кислоты. Затем нагревают до разрушения форменных элементов. При сильном вспенивании прекращают нагревание и добавляют по каплям иэоамиловый спирт, По окончании деструкции нагревание временно прекращают. Деструктат охлаждают и по каплям вводят 30 мл концентрированной. азотной кислоты, после чего нагревание усиливают.30 ского метода определения мышьяка.Мышьяк в белках определяли двумяспособами и проверялся с помощью критерия Фишера. Расхождение незначительно и их можно отнести к одной совокупности.45Относительное стандартное отклонение при определении мышьяка составляет 0,015 10 15 20 25 Окисление продолжают при периодическом добавлении концентрированной азотной кислоты до тех пор, пока не станет появляться энергичное вскипание. В этом случае нагрева ние ослабляют и окисление заканчивают, вводят еще некоторое время разбавленную азотную кислоту (2;1), Закончив окисление, минерализат нагревают еще в течение 10 мин для удаления избытка хлорной кислоты.Экстракция. К 2,5 мл пол 2 ученного раствора добавляют 2,5 мл 7 х 10 М стандартного раствора пикриновой кислоты и экстрагируют с 5,0 мл 5 х 10 М хлороформзным раствором а -метил-Л -циклогексанкарбоновой .кислоты. Органическую фазу отделяют, профильтровывдют и разбавляют абсолютным этиловым спиртом в соотношении по объему 1:2, Содержание мышьяка определяют атомно-абсорбционным методом на приборе марки "НТАСНГ при аналитической линии, равной 193,7 нм, Вначале пропускают стандартные растворы, а затем фотометрируют анализируемые пробы и по калибровочному графику находят концентрацию данного элемента,С помощью заявленного способа проанализированы образцы различных белков с известным содержанием металла. Реэультаты определения металла приведены в табл.1.Полученные данные статические обработаны. Достоверность результатов проверена при анализе искусственных смесей стандартных образцов, Полученные данные сопоставлены с результатами фотометриче 0,04, Предел обнаружения металла в экстракте составляет 0,005 мкг/кг. На определение мышьяка не влияют другие ионы (кадмий, хром, олово, магний,марганец, железо, свинец, серебро, медь,золото и др,).Преимущества предлагаемого способапо отношению к прототипу представлены в табл,2. Учитывая регенерируемость экстрагента, способ является экономически эффективным,(56) Быховская М.СГинзбург С,Л, и х(али- Авторское свидетельство СССР зова О,Д, Методы определения вредных ве- М 1270694, кл. 6 01 й 31/22, 1984, ществ в воздухе.М., 1966, с,119-126. Таблица 1 Сравнительное определение содермания мышьяка в белках ( и-; рН 208, аналитическая линия дв . 193.7 нм)3 и-число повторений эксперимента;бт,З относительное стандартное отклонение:тр,т. коэффициент Стьюдента. Таблица 2 П е агаемый способ Показатель П ототипПредел обнаружения, мкг/мл Чувствительность,мас.Не влияют: серебро, золото, медь, Селективность Мешают: серебро, золото, медь, сви свинец, висмут, кадмий, же- нец, висмут, кадмий, железо,хром, олово, магний, маргалезо,нец,иапазон Н 2-10 Формула изобретения Составитель В.Акатьев Редактор ТПилипенко Техред М,Моргентал Корректор Н ревскаяЗаказ 3323 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113035, Москва, тК, Раушская наб., 4 П Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЫШЬЯКА В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ, включающий минерализацию пробы и обработку химическим реагентом, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и селективности определения, пробу 40 после минерализации обрабатывают пикриновой кислотой, зкстрагируют хлороМорфным раствором а -метил- Ь -циклогексан-карбоновой кислоты, экстракт обрабатывают зтиловым спиртом с 45 последующим атомно-абсорбционным анализом спиртового раствора.