Способ определения термоустойчивых спор облигатно анаэробных микроорганизмов в рыбном продукте

( 9) О, 104 ТЕ Т РЫБ носится жет при- сследонова ния ботки и обретегоВеиона, ета вызультат й пита- количепособа стойчи- икроорГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(71) Атлантический научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии(56) 1. ГОСТ 10444,4-85. Консервы. Метод определения мезофильных анаэробных микроорганизмов. М.: Изд-во стандартов, 1988, с,50-54.2. Анализ и оценка качества консервов по микробиологическим показателям. М.; Пищевая промышленность, 1977, с.219 - 221,54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРМОУСТОЙЧИВЫХ СПОР ОБЛфГАТНО-АНАЭИзобретение относится к технической микробиологии и может применяться для микробиологических исследований рыбных продуктов.Изобретение направлено на повышение точности способа определения термоустойчивых спор облигатно-анаэробных микроорганизмов в рыбном продукте, Технический результат достигается тем, что согласно изобретению вуплотненный питательный агардобавляют крахмал в количестве 0,8 - 3,0 О. Способ осуществляют следующим образом. Готовят уплотненный питательный агар, в который добавляют крахмал в количестве 0,8 - З,ООь, Рыбный продукт высевают на эту питательную среду в трубки Вейона, Посевы термостатируют при температуре, оптимальной для развития микроорганизмов)5 6 01 М 33/12, С 12 РОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ ВНОМ ПРОДУКТЕ(57) Использование: изобретение отк технической микробиологии и моменяться для микробиологических иваний рыбных продуктов и обос"мягких" режимов тепловой абратермоповреждений. Сущность изния: способ осуществляется путемтовления уплотненного питательногпосева продукта на агар в трубкитермостатирования посевов и подсчросших колоний. Технический редостигается тем, что в уплотненнытельный агар добавляют крахмал встве 0,8-3,0. Применение спозволяет полнее выявлять термоувые споры облигатно-анаэробных мганизмов в рыбном продукте. 1 табл(для СЕ,зрогоцепез это может быть 37 С) и производят подсчет выросших на средах колоний микроорганизмов, По известному способу большинство. выросших спор в трубках Вейона дают бурный рост и газообразование, делая невозможным выявление и подсчет спор, выросших значительно позже (например, термоповрежденных спор), Однако по способу согласно изобретению добавление крахмала в питательную среду позволяет ограничить бурный рост и чрезмерное газообразование выросших первыми спор, Кроме того, крахмал поглощает небольшие количества присутствующих в среде веществ, подавляющих прорастание и восстановление термоповрежденных спор, Это приводит к тому, что все споры прорастают в одно и то же время,.что облег1808016 спор епез ных в дукт до обраор/г при 37 Си и 20 Сдней при 37 С иднеи при 20 С не выявлено из-за ножественных разывов в столбике сре- ды 72 128 128 80 80 чает их подсчет и способствует более точному их определению, При добавлении крахмала в питательную среду в количествеменее 0,8% положительный эффект не наблюдается, а при использовании крахмала в 5количестве более 3% подсчет выросшихспор микроорганизмов невозможен из-зачрезмерной мутности среды,П р и м е р, В 1 л водопроводной водывносят 10 г агар-агара, кипятят 20 мин, добавляют 50 г сухого питательного агара (всоответствии с прописью на этикетке), кипятят 2 мин, фильтруют через ватно-марлевыйфильтр, добавляют 1 мас,% крахмала от общего количества жидкости, стерилизуют. 15Затем определяют количество термоустойчивых спор облигатно-анаэробных микроорганизмов в рыбном продукте, В качествеспор используют штамм "25" спор чистойкультуры С 1,зрогоцепеэ. Рыбный продукт 20заранее готовят из фарша ставриды, фасуютв банку И 2 в количестве 160 г и после предварительной тепловой обработки пастеризуют в автоклаве по режиму 5 - 15 - 80 - 20мин/100 С, В этот продукт доего тепловойобработки вносят споры тест-культуры С 1,зрогоцепев - "25" в количестве 1400 спор/г,Навески готового продукта высевают на питательную среду в трубки Вейона, термостатируют в течение 7 дней при 37 С, затем при 3020 С в течение 7 дней, подсчитывают количество выросших спор, которое оказалосьравным 1280 спор/г,Для сравнения и наглядного представления о достигаемом техническом результате готовят аналогичным образом питательныесреды с 0,5. 0,8, 3,0 и 4,0% крахмала и беэкрахмала (известный способ) и вы сева ют тотже продукт на эти среды в трубки Вейона,термостатируют аналогичным образом, 40подсчитывают количеСтва выросших колоний, Трубки Вейона оставляют после этого на 30 дней при 20 С для последующего подсчета, Результаты исследований представлены в таблице,По известному способу на 14-й день термостатирования (7 дней при 37 С и 7 дней при 20 С) выявляются споры в количестве 720 спор/г. Эти споры активно размножаются, выделяют газ, дают разрывы агара в трубках Вейона, что не позволяет даже на 44-й день термостатирования определить количество начавших вырастать позже спор.По заявленному способу (0,8-3,0% крахмала) к 14-му дню термостатирования выявляются не только известные 720 спор/г, но одновременно с ними вырастают еще 560 спор/г, которые должны были прорасти позже,Реализация способа определения термоустойчивых спор облигатно-анаэробных микроорганизмов позволит более точно учитывать их количество, что особенно важно при, разработке режимов стерилизации и пастеризации, а также для обоснования "мягких" режимов тепловой обработки рыбных продуктов повышенного качества без ухудшения микробиологической надежности,Формула изобретения Способ определения термоустойчивых спор облигатно-анаэробных микроорганизмов в рыбном продукте, заключающийся в приготовлении уплотненного питательного агара, посеве продукта на агар в трубки Вейона, термостатировании посевов и подсчете выросших колоний микроорганизмов, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в уплотненный питательный агар добавляют крахмал в количестве0,8 - 3,0% Количество спор тест-культуры С,зрогоцепез -"25" в 1 г рыбного продукта после его тепловой обработки, выявленных при термостатировании посевов в трубках Вейона по ежим1808016 Продолжение таблицы Способ определения 7 дней при 37 С и 7 ней и и 20 С7 дней при 37 С и 37 ней и и 20 С 3,04,0 % 1400 1400 1280 1289Не выявлено из-за большой мутности среды Вывод: добавление крахмала в количестве 0,8 - 3,0обеспечивает более быстрое выявление и полное определение количества спор термоустойчивых облигэтно-анаэобных мик оо ганизмов Составитель С,ГолубевТехред М.Моргентал Редактор Корректор М,Самборская Заказ 1395 Тираж Подписное ВНИЙПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Количество спорС. зрогоцепез "25", внесенных в рыбный продукт до его тепловой обработки, спор/г Количество.ор тест-культуры С.зрогоцепеф 25" в 1 г рыбного продукта после его т:пловой обработки, выявленных при термостатировании посевов в трубках Вейона по ежим