Индуктор интерферона и ингибитор вируса

(я)5 А 61 К 37/64 ательский биологии ецкая ро ,1 И ГИе вещест сперимен нои оль- нов ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР 1(54) ИНДУКТОР ИНТЕРФЕРОНАБИТОР ВИРУСА(57) Использование: предлагаемво может быть использовано в эк Изобретение относится к экспериментальным областям медицины и биологии, связанным с использованием веществ, которые обладают способностью стимулировать неспецифические иммунологические вещества (в частности - интерферонообразование) и противовирусными свойствами.Целью изобретения является поиск среди эфиров оксиэтиленгликоля биологически активных веществ с широким спектром активностей, включающим интерферониндуцирующие и антивирусные свойства.Поставленная цель достигается использованием лаурокса - 9- смеси полиоксиэтиленгликолевых эфиров лауриновой кислоты с формулой СНЗ(СН 2) 1 оСо(ОСН 2 СРЙОН (ТУ 6-14-882/78), которая находит применение в эамасливателях синтетических волокон (в частности, на Могилевском комбинате синтетического волокна).Интерферониндуцирующие и антиви. русные свойства у лауроксавыявлены тальной медицине и биологии. Цель: расширение спектра биологической активности вещества из группы полиоксиэтиленгликолевых эфиров. Сущность изобретения заключается в том, что в качестве индуктора интерферона и ингибитора вируса применяются полиоксиэтиленгликолевые эфиры лауриновой кислоты, который обычно используют в замасливателях синтетических волокон. Положительный эффект; возможность сочетанного интерфероногенного и антивирусного воздействия в эксперименте с помощью вещества из группы полиоксиэтиленгликолевых. Ф впервые и не вытекают из ранее известных его характеристикСущность изобретения поясняется примерами, выполненными с использованием не токсичных для клеток доз лаурокса.Испытания индукторной активности, П р и м е р 1. В пробирку с культурой клеток фибропластов эмбриона человека (Ф ЕЧ) с 1 мл питательной среды 199 вносят 200 мкг лаурокса, оставляют на контакт в течение 4 ч при 37 С, сливают жидкую фазу, отмывают клетки раствором Хенкса, заливаютсвежей порцией питательной среды, инкубируют 24 ч при 37 С, собирают культуральную жидкость и по стандартной методике различные ее разведения тестируют на культуре клеток ФЕЧ с вирусом везикулярного стоматита и определяют в ней титр интерферона, которьй равен 1;40.П р и м е р 2. По методике, описан в примере 1, проводят испытание с исп зованием клеток фибробластов змбрио1803123Фкур (ФЭК) и 25 мкг лауроксаи получают ЬОЕ/мл, т,е, 100 мкг/мл лауроксаоказытитр 1;20. вает сильное антивирусное действие.П р и м е р 3, По методике, описанной П р и м е р 5, По методике, описанной в примере 1, проводят испытание с исполь- в опыте 4, проводят испытания на клетках зованием клеток929 и 50 мкг лауроксаи 5 Ы 29 с использованием 4-х доз лауроксаи . получают титр 1;30. получают следующий результат;Более полное представление о приме-доза(мкг/мл). степень ингибиции рах испытаний лауроксав качестве индук- (1 д БОЕ/мл) тора интерферона дает таблица. л 200 58 .Современная классификация исходит 10 100 3,8 из того, что активными признаются индукто 3,8 ры, обусловливающие титры 1:16-1;32, а вы- . 25 3 8 . сокоактивными - вещества с титрами 1:32 и Представленные в примерах 1-5 и табвыше. Это означает, что, судя по результа- лице данные свидетельствуют о том, что эатамопытовнзФЭЧи 929,лауроксдолжен 15 являемое вещество лауроксявляется классифицироваться как .высокоактивный высокоактивным индуктором интерферона, индуктор интерферона.: обладающим одновременно свойством поИспытания противовирусной активно- давлять размножение вируса везикулярности. го стоматита. Следует также. отметить 2П р и м е р 4, В 3 пенициллиновых 20 дополнительных положительных эффектафлаконах с монослоем фибробластов амбри- заявляемого вещества: 1) лауроксобладаона человека вносят по 1 мл питательной . етспособностью задерживать раэвитиеэкс, среды 199 со 100 мкг лаурокса. С 3 конт- периментальной карциномы ОЯ путемрольными флаконами проводятаналогичные 1,6-2-кратного снижения объема накаплипроцедуры, но без внесения испытуемого 25 вающейся асцитической жидкости и достовещесва. Контакт препарата с клетками верного (Р 0,05) 1,5-кратного увеличенияосуществляют 24 ч при 37 С, после чего про- продолжительности жизни крыс с привитойводятмикроскопирование,убеждаются,что опухолью; 2) заявляемое вещество - лау.внесенная доза вещес. ва не вызывает цито- роксстоит дешевле, чем прототип - стеапатических изменений, и удаляч)т жидкую 30 рокс СП,фазу. Затем клетки заражают тест-вирусом Заявляемое вещество как промышлен(вирус везикулярного стоматита, штамм Ин- но выпускаемый продукт уже сейчас готоводиана) в предварительно подобранной до- для экспериментального использованиязе, вызывающей 100;-ной.пораженйе - по крайней мере в 2-х целях: 1) как лабораклеток через 24 ч, После адсорбции вируса 35 торный реактив с известной стандартнойпри 370 С в течение 1 часа его отмывают . интерфероногенной и антивирусной активраствором Хенкса и во флаконы заливают ностью, 2) как стандарт для фармакологичепо 1 мл питательной среды. Зараженные ских производств, предназначенный дляклетки инкубируют при 37 С 18-24 ч, соби- оценки и контроля интерфероногенной акрают культуральную жидкость, объединяя 40 тивности партий лаурокса, используемыхее в опытный (3 мл) и контрольный (3 мл) как вспомогательное вещество в лекарстобразцы, по стандартной методике опреде- венных препаратах. Интерферониндуцируляют" концентрациювируса в опыте и конт- ющие и антивирусные свойства лаурокса роле, выражая ее в д .бляшкообразующих могут быть также использованы в экспериединиц (БОЕ/мл), и по разнице данных по ментальной ветеринарии,казателей вычисляют степень ингибиции. вируса в опыте. В контроле концентрация Формула изобретениявируса составляет 6,2 1 д БОЕ/мл, в опыте(сПрименение полиоксиэтиленгликолеиспытуемым веществом) бляшкообразова- вых эфиров лауриновой кислоты в качествение подавлено полностью (О 1 д БОЕ/мл), 50 индуктора интерферона иингибитора вирустепень ингибиции составляет 6,2-08,2 1 дса,1803123 Испытание интерфероногенной активности лауроксав культуре клеток (средние титры 2-кратных испытаний)Н. Козлова зводствен Ужгород, ул. Гагарина, 10 иэдатааьокиа комбинат ".Патон аказ 1018 . ВНИИПИ.Государ Составитель О. ДавыдовТехред М.Моргентал: Корректор, Л. Лукач ТиражПодписноеенного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 13035, Москва, Ж-ЗЬ, Раушская наб 4/б