Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях

СОЮЭ СОВЕТСНИХыимаюмеиаРЕСПУБЛИН Б ддС 12 М 3/00 ОБРЕТЕН 8 1 учноветер логии Н.Б.Г в и Ю сследованарной вир ськов,В.А,Ко Ф,КалантаенУДАРСТБЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРДЕЛАМ ЙЗОБРЕТЕНИЙ ИОТНРЫТИЙ ОПИСАНИЕ И АВТОРСКОМУ С 8(71) Всесоюзный нательский институтсолот ии и микробио(56) Воесйпо 1 о 8 у ап 4 Воещдпеетзпр. 1975, ХУП, р, 1467-1471.Авторское свидетельство СССРВ 1082807, кл. С 12 М 3/00, 1982,(54) АППАРАТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК ИЛИ ВИРУСОВ НА МИКРОНОСИТЕЛЯХ(57) Изобретение относится к биологии и может быть использовано в медицине ветеринарии и вирусологии, Цельюизобретения является повышение выхода клеток или вирусов, Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 стермоизоляционной рубашкой 2 и крышкой 3, выполненной иэ стекла. Емкость1 снабжена патрубком для подачи внее через мембранный фильтр газовойсмеси и патрубком для отбора пробы.Емкость 1 снабжена также патрубками130862 для заполнения 7 и слива 8 культу- ральной жидкости. Аппарат содержит устройство для перемешивания культу- ральной жидкости с микроносителями, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11. Барабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и зафиксированной пру. - жинйым элементом. Емкость 1 установлена на осях 14 и 15 в опорах 16 и 17 с возможностью свободного враще 3ния. Полая ось 15 соединена с патрубком 18 для загрузки микроносителей и имеет уплотнение 19. На стенкеемкости 1 размещен съемный привод,состоящий из электродвигателя 20редуктора 21 и магнитных полумуфт 22и 23. Аппарат посредством цапф установлен на кронштейнах 25 и с помощью червячной пары переводится изгоризонтального в вертикальное положение или любое промежуточное.1 з.п.ф-лы,ил.1Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано вмедицине, ветеринарии и вирусологии.Цель изобретения - повышение выхода клеток или вирусов. 5На фиг. 1 схематично изображен аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях,продольный разрез; на фиг, 2 - разрез А-А на фиг. 1.10Аппарат содержит цилиндрическую емкость .1 с термоизоляционной рубашкой 2 и крышкой 3, выполненной изстекла.Емкость 1 снабжена патрубком 4 для подачи в нее через мембранный фильтр-аэратор 5 газовой смеси,патрубком 6 для отбора пробы и патрубками 7 и 8 для заполнения и слива культуральной жидкости.Аппарат содержит устройство для перемешивания культуральной жидкос- ти с микроносителями, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11.Ба,рабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и фиксируемой пружинным элементом 13. Емкость 1 установлена на осях 14 и 15 в опорах 16 и 17 с возможностью свободного вращения. Полая ось 15 соединена с патрубком 18 для загрузки микроносителей в барабан и уплотнена в отверстии крышки 3 посредством сальника 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состоящий из электродвигате-. ля 20 и редуктора 21, а также магнит 2ных полумуфт 22 и 23. Емкость 1 посредством цапф 24 установлена на кронштейнах 25 и может быть снабжена механизмом поворота ее и барабана на 90 , содержащим червячную паруО26, с помощью которой можно переводить из горизонтального положения в вертикальное или любое промежуточное.Аппарат работает следующим образом,:В перфорированный барабан 9 встав. ляют сетку 12 и закрепляют ее пружинным элементом 13, затем устанавливают крышку 10 и закрепляют ее винтами. Барабан 9 помещают в емкость 1 таким образом, чтобы ось 14 входила в опору 16. В отверстие крышки 3 устанавливают полую ось 15 с патрубком 18 и уплотняют ее посредством сальника 19. Крышку 3 монтируют на емкости 1 так, чтобы полая ось 15 вошла в опору 17 и через резиновую прокладку винтами закрепляют ее на емкости 1, Патрубок 4 соединяют силиконовой трубкой с мембранным фильтром 5.На патрубки 6 - 8 и 18 надевают силиконовые трубки с пружинными зажимами. Затем аппарат помещают в автоклав и стериолизуют 2 ч при 130 Г. После охлаждения аппарата к нему подсоединяют привод и устанавливают посредством цапф на кронштейны 25 в вертикальном положении, а в рубашку 2 подают воду от термостата с температурой 37 + 0 5 оС.При выращивании клеток емкость 1 через патрубок 7 заполняют на 70- 80 объема культуральной жидкостью, В барабан 9 через патрубок 18 загружают микроноситель. Для прикрепления клеток к микроносителям аппарат находится в таком положении 8-16 ч, затем он с помощью червячной пары 26 переводится в горизонтальное положение . При этом микроноситель с прикрепленными на нем клетками опускается на сетку и удерживается внутри барабана 9. При вращении барабана 9, которое осуществляется электродвигателем 20 и редуктором 21 при помощи 15 магнитных полумуфт 22 и 23, микроноситель переходит во взвешенное состояние, перемешивается и удерживается во взвеси при частоте вращения 6- 10 об/мин. Частота вращения регулируется тиристорным регулятором. Контроль за процессом культивирования осуществляется путем отбора проб через патрубок 6. Аэрирование проводят через фильтр 5. Культуру выращивают до получения необходимой плотности клеток.При выращивании вируса полученную культуру клеток заражают вирусом без смены среды. 30Для этого через патрубок 18 вносят необходимое количество вирусосодержащего материала и культивируют при постоянном вращении.Клетки, разрушенные в результате 35 репродукции в них вируса, отслаиваются с поверхности,микроносителя и переходят в культуральную жидкость. Сбор вирусосодержащего материала производится через патрубок 8. 40Для извлечения микроносителей из барабана 9 емкость 1 на 1/2 объема заполняют физиологическим раствором и при помощи червячной пары 26 переводят в положение крышкой вниз.Мик роносители опускаются на конусную проточку крышки 10 и через полую ось 15 и патрубок 18 удаляются вместе с раствором из барабана 9.Наличие в аппарате для культивирования клеток или вирусов на микро- носителях устройства для перемешивания, выполненного в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращения и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой, а также механизма поворота емкости и барабана позволяет увеличить выход клеток илн вирусов с единицы объема, исключив механическое разрушение микроносителей, а также клеток и вирусов, использовать аппарат совместно с управляемым ферментом для промьпнленной наработки клеток или вирусов.Формула изобретения1. Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях, содержащий герметичную цилиндрическую емкость, снабженную азратором, и устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями,. о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения выхода клеток или вирусов, устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями вь 1 полнено в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращения и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой,при этом микроносители размещены внутри барабана.2. Аппарат по и. 1, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью улучшения прикрепления клеток к микроносителям, аппарат снабжен механизмомв поворота емкости и барабана на 90/5 кая наб,роизводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектна Заказ 1774/21 Тира ВНИИПИ Государственнога по делам изобретений 313035, Москва, Ж, Ра