Способ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды

(57) Способ опреде селения к условиям пользование: био оценки состояния ад ся повышение чув Сущность изобрет ность глутатионред дисмутазы (СОД) к снижению СОД с о нием ГР относител ют дезадаптацию. 1 ения дезадаптации наокружающей среды. Исхимические способы аптации, Целью являеттвительности способа, ения: измеряют активктазы (ГР) и супероксирови в динамике и по дновременным увеличено контроля определятабл. Известен спо тации путем выяв нений клеточных способ является н ным, так как выяв рактерны для патологических и ОСУДАРСТВЕННЪИ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР САН И Е ИЗС) БР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЬСТВУ(56) Куликов В.Ю., Ким Л.Б., Кислородныйрежим при адаптации человека на крайнемСевере, Новосибирск, 1987 г.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕЗАДАПТАЦИИ НАСЕЛЕНИЯ К УСЛОВИЯМ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЪ Изобретение относится к биохимичеим способам определения дезадаптации соб определения дезадапления атрофических изме- структур, Однако данный едостаточно чувствител ьляемые им изменения хафизиологических и роцессов,Известен способ определения неспецифической резистентности организма к действию экстремальных факторов внешней среды путем измерения теолдисульфидного отношения в клетках крови, Однако наличие возрастных и суточных колебаний определяемого данным способом показателя, зависимость тиолдисульфидного отношения от гелиофизических и сезонных факторов в физиологических условиях, а также прямое влияние на его величину ряда химических веществ не позволяют использовать данный 2 й 9/02, 6 01 й 33 68 тест для определения дезадаптации населения,Известен способ определения дезадаптации путем измерения конечного продукта перекисного окисления легнидов - малонового диальдегида (МДА) в плазме крови. Однако в способе-прототипе отсутствует корреляция между содержанием МДА в кро ви и заболеваемостью, что снижает его чув- Ы ствител ьность. Ф Цель изобретения - повышение чувст-СОвительности способа,Цель достигается тем, что определяют активность глутатиогредуктазы (ГР) и супероксидаисмутазы (СОД) крови и по увеличению ГР одновременно со снижением СОД по сравнению с исходным периодом определяют дезадаптацию.Способ осуществляется следующим образом.Забор крови производится у практически здоровых лиц в то же время суток для исключения суточных изменений покаэателей. Кровь получают путем укола мякоти пальца копьем-скарификатором одноразового пользования. Отбирают 0,05 мл крови в пробирку, содержащую 0,95 мл 0,1%-ного раствора трилона Б (рн 7,0) и выдерживают в течение 30 мин при+5 + 7 С, после чего гемолизат используют для определения ГР и СОД. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 1. Определение активности глутатионредуктазы (4).Реактивы: 1. Буферный раствор трис- НС 1 М, трилон Б 5 мм, рН 8,02. Глутатион окисленный 0,033 М, рН 7,03, НАДФ.Н 2 мМ.Ход определения.В пробирку вносят 0,15 мл буферного раствора 0,2 мл гемолиэата, 2,2 мл Н 20 и 0,3 мл окисленного глутатиона. Смесь инкубируют в течение 10 мин при 37 С, затем добавляют 0,15 мл НАД,Ф,Н и измеряют на спектрофотометре оптическую плотность проб при 340 нм, После этого пробы выдерживают точно 30 мин при 37 С и повторно измеряют оптическую плотность при той же длине волны.Расчет; Аммоль Д 3 л.сек где 3 - объем пробы в мл; 1800 - время в с;6,22 - коэффициент малярного светопоглощения; 0,2 - объем гемолизата в мл.2. Определение активности супероксиддисмутазы (5)Реактивы; 1. Буферный раствор К-фосфатный 5 мМ, 10 мкМ трилон Б, рН 7,8,2, Буферный раствор глининовый 0,1 М,0,3 мМ трилон Б, рН 10,4.3. Раствор адреналина 0,041;-ный, готовится за 1 ч до определения и подкисляется Н С (1:2) до рН 2,5.Смесь этанола и хлороформа (2,5:1,5).Ход определения,0,2 мл гемолизата и 0,2 мл охлажденнойсмеси этанол-хлороформ вносят в пробиркус предварительно замороженным К-фосфатным буферным раствором (0,3 мл) и-:. - . встряхивают в течение 15 мин, Осадок отделяют центрифугированием при 8000 об/минв течение 15 мин,В стеклянную пробирку вносят 1,5 млглицинового буферного раствора 0,5 мл Кфосфатного буферного раствора, 0,4 мл адреналина и 0,1 мл надосадочной жидкости,после чего измеряют изменение оптическойплотности при 480 нм на СФв течение 3мин. Контрольная проба содержит все ингредиенты, кроме надосадочной жидкости,вместо нее добавляют 0,1 мл Н 20.,:,. д -а:.ЙюД контр,Ед ТАГ мл) =х 700, гдеогде Т - торможение окисления адреналина в ; А - активность СОД в условияхединицах; 700 - разведение крови.3. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощьюТ-критерия Стюдента (6).Способ поясняется примером,П р и м е р. Кровь брали у практическиздоровых женщин в возрасте 18-48 лет от 9до 10 часов утра согласно описанию (см.выше) и рассчитывали средние величины и средние квадратичные отклонения(М + в).Приведенные в таблице данные показывают, что предлагаемым способом состояние дезадаптации определяется в примерахМ 4 и 5. Подтверждением этому служит увеличение бронхолегочной заболеваемости уобследуемого населения более чем в 4 разав периоды времени, соответствующие примерам 4 и 5 по сравнению с исходным уровнем,В таблице приведены также результатыопределения МДА в плазме крови у тех жеобследуемых по способу-прототипу, Из нихследует, что содержание МДА в период,предшествующий подъему заболеваемости(пример 3), и во время повышенной заболеваемости населения примеры 4 и 5) достоверно не отличалось от исходного уровня,Таким образом, по сравнению с прототипомпредлагаемый способ является более чувствительным для определения дезадаптациик условиям окружающей среды.Приведенные примеры подтверждаютполезность предлагаемого способа для определения дезадаптации населения.Способ может применяться при проведении экологических исследований, например в условиях промышленного региона,насыщенного предприятиями разного профиля, которые загрязняют окружающуюсреду. Способ не требует дорогостоящейаппаратуры и дефицитных реактивов и может быть освоен и внедрен в учрежденияхздравоохранения,Использование предлагаемого способаопределения дезадаптации дает возможность своевременно выявлять изменения вгруппах риска и проводить соответствующие профилактические мероприятия дляпредупреждения массовой заболеваемости.Формула изобретенияСпособ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды пу1763487 Составитель А, Агуреевактор Н. Козлова Техред М.Моргентал Корректор Л нц Заказ 3430 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ С 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 ательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 1 изводстве тем биохимическго исследования крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, дополнительно определяют активность глутатионредуктазы и супероксиддисмутазы и при повышении активности глутатионредуктазы с одновременным снижением супероксиддисмутазы относительно контроляопределяют дезадаптацию.