Способ отбора овцематок доноров эмбрионов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ 175942 ЕСПУБЛИК 5)5 А 61 К 35 Е 2 ТОК-ДОНО огия размнох животных, аткам в эст- кортикотроопределяют воротке кро,9 нг/мл льзаяания в табл. нои биологи Б.Х.Аббасов,Н Мал)лакови надпочечниа (Научно-тех,тоа Лесостепис. 29-33,яичников у цией на гарство желтых в пределах альнага апа 3-5-е сут :ции яичниема. ОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Институт экспериленталАН КазССР(56) Критерии оценки функцков у крупного рогатого скобюллетень НИИ животноводи Полесья УССР, 1978, Р 22 Изобретение относится к области животноводства, в частности к методу моделирооания состояния стресса у овец иньекцией синтетического кортикотропина, и может быть использовано как тест для прогнозирования суперовуляции по степени стрессоустойчивости у животных указанного вида, устанавливаемой по концентрации картикостерона в крови,Известны способы вызывания у овец множественной овуляции, оключающие следующие основные этапы.1. Стимуляция двойневости у овец: а) выявление в астральный сезон у овцематок признаков половой охоты без осеменения их; б) на 14-15-й дни полового цикла подкожная иньекция им 1000-1200 л,е. ГСЖК, в) па мере повторного ими проявления признаков охоты они двукратно искусственно осеменяются - утром и вечером. При этом многоплодие (2 и более ягненка в разовом приплоде) достигается в среднем у 50 маток, в том числе - 47 их с двумя и 5-306 с тремя ягнятами (по результатам весеннего ягн ения).(54) СПОСОБ ОТБОРА ОВЦЕМА РОВ ЭМБРИОНОВ(57) Использование: биотехнол жения сельскохозяйстоенны Сущность изобретения: авцем ральный сезон вводят 30 - 50 ЕО пина. До и после введения уровень кортикостеронов о сы ви. При разности уровней в 9,8 овцематок отбирают для испо качестве доноооо эмбрионов. 1 2. Стимуляция суперооуляции у маток; а) в астральный сезон у маток-доноров ценного генотипа выявляются признаки половой охоты без осемонения их; б) на 8-9-й дни или на 12-й день полового цикла им подкожно инъецируется 2,5 - 3,0 тыс. м.е. ГСЖК; в) через 48 ч после введения указанной гормональной сыворотки этим овцам делается внутримышечная инъекция 250 мкг простагландина подгруппы - Ф 2-альфа (эстрофан); г) по мере повторного проявления ими признаков половой охоты после обработки указанными препаратами они трехкратно естественно осеменяюся бараном также ценного генотипа утром, вечером и утрам следующего дня,При этом степень реакци овцелаток-донороо суперовуля мональную Обработку и количе тел после овуляции колеблется от 1 до 15 (по результатам визу ределения при лапоротамии н после случки), т.е, степень реа ков этих животных не нредскаэУказанные способы вызывания суперовуляции у овец имеют существенные недостатки. Так. не учитывается индивидуальнаяспецифика реакции яичников на гонадотропины иньецируемых препаратов нз одной и 5той же стадии полового цикла разных животных и генотип маток, определяющий ихособенности быть донором эмбрионов, Всвязи с большой вариабельностью показателей количества овуляций среднее число 10извлекаемых эмбрионов нз одного положительного донора не превышает 1,5-2 оплодотворенных яйцеклеток,Однако при такой биотехнике подготовки овцематок-доноров без знания характера их стрессоустойчивости значительноснижается эффективность использованияих при эмбриопересадке в овцеводстве.Предлагаемый способ отличается отпрототипа тем, что предполагает предвзрительный отбор таких генотипов маток, которые способны реагировать наибольшимчислом овуляций на назначен сную дозу гонадотропного препарата.Цель изобретения - индивидуальный 25отбор большого количества маток-доноровэмбрионов с повышенной реакцией на гормональную обрзботку по результатам превентивного прогнозирования у них уровнясуперовуляции. 30Цель достигается определением у предполагаемых маток-доноров эмбрионов функциональных резервов надпочечников. Приэтом главным методическим приемом служит оценка генотипа животных по уровню 35показателя кортикостерона в крови в результате индукции модельного стресса в ихорганизме с помощью стимуляции кортикотропином,Известно, что в ответ на стрессирующие 40воздействия факторов вн.-"ней и внутренней среды передняя доля .,пофиза выделяет адренокортикотропный гормон.Адекватно уровню в крови этого гормонапучковая и сетчатая эоны коркового вещества надпочечников выделяют глюкокортикоидные гормоны. Как ответная реакцияорганизма концентрация в крови одного изэтих кортикоидов свидетельствует о характере стрессоустойчивости животного. 50Основываясь на этой природной модели механизма действия адренокортикотропного гормона гипофиза на функциюукаэанных парных желез, оценивают степень функциональных резервов надпочечников у овец казахской тонкорунной породыпо уровню кортикостерона в крови на фо.геспецифической экэогенной стимуляции кортикотропином в связи с индуцированной суперовуляцией у доноров эмбрионов,В астральный сезон у предполагаемых маток-доноров из яремной вены берут образцы крови для рздиоиммунологического установления в ее сыворотке исходного уровня кортикостерона. После этого всем животным производят инъекцию 30 - 50 ЕД кортикотропина, Для создания в организме овец плато уровня данного стимулирующего гормона через 30 мин укаэанную иньекцию препарата повторяют, Уровень реакции надпочечников, толерантных к стрессовой ситуации, созданной с помощью стимуляции кортикотропином, определяли по концентрации кортикостерона в сыворотке крови, взятой у маток по истечению 90 мин после последней иньекции стимулятора. Разница в показателях концентрации этого кортикоидного гормона надпочечников в образцах крови, взятых у животных до и после стимуляции кортикотропином, служит критерием для прогнозирования размера суперовуляции.На одну и ту же дозу ГСЖК(3,0 тыс. м,е.) у 21 овцематок этой породы среднее число овуляций составляет 3,8(минимальная реакция), у 79% их - 10,3 (высокая реакция), Если исходный уровень кортикостерона в сыворотке крови маток с минимальной реакцией их яичников на гонадотропин СЖК составил 7,3, с высокой - 6,0 нг/мл, после нагрузки кортикотропина этот показатель повышается соответственно до 11,0 и 14,6 нг/мл. Если разницу между исходным показателем концентрации кортикостерона и ее уровня в крови после нагрузки у маток с минимальной реакцией (4,3 цг/глл) принять за 100;, то у маток с высокой реакцией (8,6 нг/мл) он составит 200.Таким образом генотипы маток с учетом высокой реакции их надпочечников на модельный .стресс, индуцированный иньекцией кортикотропинз, отбирают в число доноров с целью получения от каждой из них от 6 до 15 эмбрионов для последующей трансплантации (маткам-реципиенталг), Это значительно повысит эффективность отбора доноров для совершенствования метода трансплантации в овцеводстве.Размеры множественной овуляции у маток-доноров с разной реакцией их яичников на гонздотропин гормональной сыворотки в зависимости от уровня функциональных резервов йадпочечников приведены в таблице.Формула изобретения Способ отбора овцематок-доноров эмбрионов, включающий иньекцию овцематкам физиологически-активного вещества и оценку реакции организма, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью выявления потен1759425 циал ных доноров при получении большого количества нормотрофных зародышей. в качестве физиологически-активного вещества используют кортикотропин в дозе 30-50 ЕД, а оценку реакции ведут по величине разноКо азател и ах 1 и эх Составитель А. ФилипповТехред М.Моргентал оРРектоР С. Пе Заказ 3133 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКН 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 льский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 водственно-и КоличествоживотныхМ оличествживотныхМ сти уровней кортикостерона в. сыворотке крови до и после инъекции кортикотропина, причем у потенциальных доноров змбрионов эта величина составляет 9.8 + 0,9 нг/мл, 5